1）污点随载玻片的移动而移动，则位于载玻片上；
2）污点不随载玻片移动，换目镜后消失，则位于目镜；换物镜后消失，则位于物镜； 3）污点不随载玻片移动，换镜后也不消失，则位于反光镜上。
实验九 用高倍镜观察线粒体和叶绿体（必修一P47） 一、实验目的
使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态分布。 二、实验原理
叶绿体的辨认依据：叶绿体是绿色的，呈扁平的椭圆球形或球形。
线粒体辨认依据：线粒体的形态多样，有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等，本身无色，需染色体才能观察到。
健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色。 三、实验材料 观察叶绿体时选用：藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是：叶子薄而小，叶绿体清楚，可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料。 （若用菠菜叶作实验材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。） 四、方法步骤 实验 观 察 叶 绿 体 步 骤 1．制片。用镊子取一片黑藻的小叶，放入载玻片的水滴中，盖上盖玻片。 2．低倍镜下找到叶片细胞 3．高倍镜下观察叶绿体的形态和分布 观 察 线 粒 体 1．制作人的口腔上皮细胞临时装片 2．低倍找到口腔上皮细胞后，换高倍镜观察线粒体 注 意 问 题 制片和镜检时，临时装片中的叶片不能放干了，要随时保持有水状态 在洁净载玻片中央滴一滴健那绿染液→用牙签取口腔上皮细胞→盖盖玻片 蓝绿色的是线粒体，细胞质接近无色。 分 析 否则细胞或叶绿体失水收缩，将影响对叶绿体形态和分布的观察。 健那绿染液是活细胞染料（不影响细胞生命） 专一性染线粒体的 讨论 1、细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的？为什么？
答：不是。呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动，这种运动能随时改变椭球体的方向，使叶绿体既能接受较多光照，又不至于被强光灼伤。
2、叶绿体的形态和分布，与叶绿体的功能有什么关系？
答：叶绿体的形态和分布都有利于接受光照，完成光合作用。如叶绿体在不同光照条件下改变方向。又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多，这可以接受更多的光照。
实验十 观察植物细胞的质壁分离和复原（必修一P61“探究”）
用心 爱心 专心
一、实验目的
1．学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法。 2．了解植物细胞发生渗透作用的原理。
二．实验原理
1．质壁分离的原理：当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而失水，细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁分离。
注意：质壁分离后，在原生质层与细胞壁之间存在外界溶液（因为细胞壁是全透的）。 2．质壁分离复原的原理：当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而吸水，外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，紧贴细胞壁，使植物细胞逐渐发生质壁分离复原
3．原生质层：包括细胞膜、液泡膜以及两层膜之间的细胞质；相当于一层半透膜。 二、实验材料
紫色洋葱鳞片叶的外表皮。因为液泡呈紫色，易于观察。也可用水绵代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。 三、实验步骤
步 骤 1．制作洋葱外表皮细胞的临时装片。 在载玻片上滴一滴水，撕取洋葱鳞片叶外表皮放在水滴中展平【也可挑取几条水绵放入水滴中】。盖上盖玻片。 2．观察洋葱（或水绵）细胞 可看到：液泡大，呈紫色，原生质层紧贴着细胞壁。【或水绵细胞中有带状叶绿体，原生质层呈绿色，紧贴着细胞壁】。 3．观察质壁分离现象。 从盖玻片的一侧滴入0．3g/ml的蔗糖溶液，在另一侧用吸水纸吸引，重复几次。镜检。 观察到：液泡由大变小，颜色由浅变深，原生质层与细胞壁分离。 推测：原生质层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。 注 意 问 题 盖盖玻片应让盖玻片的一侧先触及载玻片，然后轻轻放平。 分 析 防止装片产生气泡。 液泡含花青素，所以液泡呈紫色。 先观察正常细胞与后面的“质壁分离”起对照作用。（前后对照——分离前与分离后对照） 蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度，细胞通过渗透作用失水，细胞壁伸缩性小原生质层的伸缩性大，液泡和原生质层不断收缩，所以发生质壁分离 为了使细胞完全浸入蔗糖溶液中。 否则，细胞严重失水死亡，看不到质壁分离的复原。 重复几次 糖液浓度不能过高 用心 爱心 专心
4．观察细胞质壁分离的复原现象。 从盖玻片的一侧滴入清水，在另一侧用吸水纸吸引，重复几次。镜检。 观察到：液泡由小变大，颜色由深变浅，原生质层恢复原状。 发生质壁分离的装片，不能久置，要马上滴加清水，使其复原。 重复几次。 细胞液的浓度高于外界溶液，细胞通过渗透作用吸水，所以发生质壁分离复原现象。 因为细胞失水过久，也会死亡。 为了使细胞完全浸入清水中。 实验讨论答案 1．如果将上述表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖溶液中，这些表皮细胞会出现什么现象？
答：表皮细胞维持原状，因为细胞液的浓度与外界溶液浓度相等。
2．当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时，红细胞会不会发生质壁分离？为什么？ 答：不会。因为红细胞不具细胞壁。
3．用8%的食盐溶液、5%的硝酸钾、尿素、甘油、乙二醇等进行质壁分离实验是会出现自动复原吗，为什么？
4．质壁分离与复原的引用：①判断细胞死活；②测定溶液浓度范围（类似于探究生长素类似物最适浓度实验）；③验证细胞壁与原生质层伸缩性大小；④比较不同植物细胞细胞液溶度；⑤比较一系列溶液浓度大小（逆向思维）。
实验十一 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（必修一P18） 一．实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
二．实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。 1．可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu 2O沉淀。如：
葡萄糖+ Cu ( OH ) 2 葡萄糖酸 + Cu 2O↓（砖红色）+ H 2O，即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。
实质：是还原糖（全部单糖、麦芽糖、果糖）与新制Cu ( OH ) 2反应生成砖红色氧化亚铜。 2．脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）。淀粉遇碘变蓝色。 3．蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu作用，产生紫色反应。）
实质：在碱性条件下，肽键结构与铜离子反生络合反应，生成紫色络合物。 三．实验材料
1．做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。（因为组织的颜色较浅，最好无色，易于观察。）
2．做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3~4小时（也可用蓖麻种子）。
3．做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清等。 四、实验试剂
斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液）、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液：质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液）、体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。 五、方法步骤
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2+
加热 （一）可溶性糖的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 1. 制备组织样液。 苹果或梨组织液必须临时制备。 因苹果多酚氧化酶含量高，（去皮、切块、研磨、过滤） 要取组织的颜色较浅，最好无组织液很易被氧化成褐色，色，易于观察。 将产生的颜色掩盖。 2. 取1支试管，向试管内注入2mL组织样液。 3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂，振荡。 斐林试剂很不稳定，易分解。 甲、乙液分别加入时可能无防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤； 缩短实验时间。 应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂； 切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。 04. 试管放在盛有50-65C温最好用试管夹夹住试管上部，使水的大烧杯中，加热约2分试管底部不触及烧杯底部，试管钟，观察到溶液颜色：浅蓝色 口不朝向实验者。 → 棕色 → 砖红色（沉淀） 也可用酒精灯对试管直接加热。 留适当样液与反应后溶液做对照 （二）脂肪的鉴定 ⑴显微镜观察法
操 作 方 法 花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。 在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，染色1分钟。 用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。 注 意 问 题 干种子要浸泡3~4小时，新花生的浸泡时间可缩短。 染色时间不宜过长。 酒精用于洗去浮色，不洗去浮色 解 释 因为浸泡时间短，不易切片，浸泡时间过长，组织较软，切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。 ①防止浮色影响对橘黄色脂肪滴的观察。 ②酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。 滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。 时间一长，油滴会溶解在乙醇中。 用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上1~2滴蒸馏水，盖上盖玻片。 低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。 装片不宜久放。 ⑵花生种子匀浆 + 苏丹III染液—— 橘黄色 或 花生种子匀浆 + 苏丹IV染液—— 红色
三、蛋白质的鉴定 操 作 方 法 制备组织样液 （浸泡、去皮研磨、过滤。） 注 意 问 题 解 释 黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间。 用心 爱心 专心
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