诱导过程 正常小鼠免疫处理 动物细胞的融合 （物、化、生法） 杂交瘤细胞的筛选与培养 专一抗体检验阳性细胞培养 单克隆抗体的提纯 用途和意义 克服远缘杂交的不亲和障） 制备单克隆抗体 碍，大大扩展杂交的亲本组） 诊断、治疗、预防疾病，例如合范围 “生物导弹”治疗癌症 应用：白菜-甘蓝等杂种植株 4.单克隆抗体
（1）a.抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种_____________。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。
b.B淋巴细胞特点：可以产生________，但不能无限增殖； 骨髓瘤细胞特点：能__________，但不能产生抗体。 （2）单克隆抗体的制备过程： 抗原注入小鼠体内
分离
B淋巴细胞
细胞融合 杂交瘤细胞 细胞培养选择培养细胞 注入小鼠 培养基 体外培养 从培养液提取 单克隆抗体 21
第一步：原生质体的制备 （酶解法） 第二步：原生质体融合 （物、化法） 第三步：杂种细胞的筛选和培养 第四步：杂种植株的诱导与鉴定 骨髓瘤细胞 体内培养 从腹水提取
（3）杂交瘤细胞的特点：既能大量______，又能产生_________________。
（4）单克隆抗体的优点：_______________________________________________。 （5）单克隆抗体的作用：
① 作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟一定抗原发生特异性结合，具有准确、高效、简易、快速的优点。
② 用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症治疗，可制成“生物导弹”（_____________________________），也有少量用于治疗其它疾病。 补充：
淋巴因子中的干扰素是治疗病毒的特效药，通常只能从体内获得，且数量非常的少，为了在体外获得大量的干扰素，我们可以用鼠的效应T淋巴细胞与其骨髓瘤细胞进行融合，进而从小鼠的腹水中或从培养液中提取。
干扰素是由效应T淋巴细胞产生的，所以在进行细胞融合时，选用的是效应T淋巴细胞和骨髓瘤细胞。
专题3 胚胎工程
（一）生殖细胞的发生和受精作用
1.精子与卵细胞的发生过程
（1）精子的发生：精原细胞先进行有丝分裂后进行减数分裂；变形过程中，细胞核为精子头的主要部分，高尔基体发育为顶体，中心体演变为精子的尾，线粒体在尾基部形成线粒体鞘膜，其他物质浓缩为原生质滴直至脱落。[线粒体为精子运动提供能量]
（2）卵子的发生：卵原细胞演变成初级卵母细胞[被卵泡细胞包围]，减一分裂在_______________，形成次级卵母细胞和第一极体进入输卵管准备受精；减二分裂是在_________过程中完成的。
（3）精子与卵细胞发生过程比较 项目 精子的发生过程 卵子的发生过程 发生场所 发生时间 发生过程是否连续 核物质含量
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是否变形 结果 细胞质分裂 2.受精作用： （1）受精场所：是母体的______________ （2）受精前的准备
a.精子获能（在雌性动物生殖道内）；
b.卵子的准备（排出的卵子要在输卵管中进一步成熟到_______________
才具备受精能力）；
（3）受精过程[卵子周围的结构由外到内：放射冠、透明带、卵黄膜]， a顶体反应：精子释放顶体酶溶解卵丘细胞之间的物质，穿越放射冠。
B_________：顶体酶可将透明带溶出孔道，精子穿入，在精子触及卵黄膜的瞬间阻止后来精子进入透明带的生理反应[它是防止多精子入卵受精的第一道屏障]；
C__________________：精子外膜和卵黄膜融合，精子入卵后，卵黄膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程[它是防止多精子入卵受精的第二道屏障]；精子尾部脱落，原有核膜破裂形成雄原核，同时卵子完成减二分裂，形成雌原核
[注意：受精标志是___________的形成；受精完成标志____________________ （二）动物胚胎发育的基本过程
1.胚胎发育是指受精卵发育成_______________的过程 2.胚胎发育的各个阶段的特点：
（1）卵裂期：特点：细胞进行______分裂，细胞数量不断增加，但胚胎的总体体积并不增加。
（2）桑椹胚：特点：胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹，是______细胞。
（3）囊胚：特点：细胞开始出现分化（该时期细胞的全能性仍比较高）。聚集在胚胎一端个体较大的细胞群称为___________，将来发育成胎儿的各种组织。而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现_______[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]
（4）原肠胚：特点：有了______的分化，具有原肠腔。 (三) 胚胎工程的应用
胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，由________、___________、____________、胚胎冷冻保存技术和_________技术等组成的现代生物技术。
1.体外受精和胚胎的早期培养 (1)卵母细胞的采集和培养：
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主要方法：用_____________处理，使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。第二种方法：从刚屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞；第三种方法是借助超声波探测仪、腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。采集的卵母细胞，都要在体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精。
(2) 精子的采集和获能：在体外受精前，要对精子进行______处理。
(3) 受精：获能的精子和培养成熟的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程。
(4)胚胎的早期培养：精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。培养液成分较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。不同动物胚胎移植的时间不同。(牛、羊一般要培育到_____或______阶段才能进行移植，小鼠、家兔等实验动物可在更早的阶段移植，人的体外受精胚胎可在8~16个细胞阶段移植。)
2.胚胎移植
(1)胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎，移植到____________________其它_____动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“____”，接受胚胎的个体称为“___”。（供体为优良品种，作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种。）
地位：如转基因、核移植，或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎，都必须经过胚胎移植技术才能获得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。
(2) 胚胎移植的意义：大大缩短了供体本身的繁殖周期，充分发挥雌性优良个体的繁殖能力。
(3) 生理学基础：①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。
②早期胚胎在一定时间内处于游离状态。这就为胚胎的收集提供了可能。 ③受体对移入子宫的外来胚胎不发生____________。这为胚胎在受体的存活提供了可能。
④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。
(4) 基本程序主要包括：
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