(4)结果报告 将计得酵母菌细胞数填入表5-5,并计算单位体积的菌数(个/mL)。 4.2.2黑粉菌细胞数测定
(1)制备菌悬液 取一穗麦黑粉菌标本,加入10mL无菌水,充分振荡,然后适当稀释至10,待用。
表5-5 微生物细胞的血球板计数结果统计
计数 微生物 酿酒酵 母菌分生孢子
-3
计数室 各中格细胞数 1
第一室细胞数 第二室 细胞数 第一室细胞数 第二室 细胞数
2
3
4
5
5个中格 总细胞数 A 菌液稀释浓度 B 两室 平均数 细胞数 个/mL
黑粉菌
(5)小结与讨论
要求将下列问题体现于讨论中。
①哪些操作步骤会影响血球计数板计数的正确性?
②试比较血球计数和平皿计数所得结果的不同,并分析原因。
4.3 悬滴法观察细菌的运动
(1)制备菌悬液 用无菌长滴管分别向枯草芽孢杆菌、大肠杆菌斜面滴加5mL 无菌水,制成轻度混浊的菌悬液;
(2)涂凡士林 取一干净无油的盖玻片,在其四周涂少许凡士林; (3)滴菌悬液 用无菌长滴管分别向盖玻片中央滴1滴菌悬液;
(4)盖凹玻片 将凹玻片的凹槽对准盖玻片中央的菌悬液,并轻轻盖在盖玻片上,使两者粘在一起,然后反转凹玻片,使菌液恰好悬在凹槽中央;
图5-5 悬滴观察玻片
凹玻片 悬滴标本正面 悬滴标本侧面
(5)镜检:由于菌体透明,镜检时可适当缩小光圈或降低聚光器,以增大反差,便于观察;可先在低倍镜下找好视野,再转换至油镜下仔细观察,注意区分细菌运动与布朗运动的区别。前者在视野下可见细菌自一处游动至它处,而后者仅在原处左右摆动。细菌的运动速度依菌种不同而异,应仔细观察。
(6)清理:清理显微镜、废玻片及桌面。 (7)设计表格报告悬滴法观察细菌运动结果。
表5-6 细菌运动观察结果
菌名 Erwinia aroideae Escherichia coli
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运动方式
(8)小结与讨论
要求将下列问题体现于讨论中。
观察细菌运动时,如何区分细菌的运动、布朗运动和菌液的流动?
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