解析：(1)据图可知，D图所示的菌落分布为划线分离法接种获得的。
(2)利用涂布分离法进行微生物计数时，需要得到30～300个菌落的平板进行计数。 (3)为了增强实验的说服力，通常要设置对照实验，本实验可设置空白对照排除培养基污染产生的影响。
(4)根据公式计算每升原水样中大肠杆菌数为50×10÷0.1×1 000＝5.0×10。 答案：(1)D (2)C
(3)需要 培养基制备不合格会导致菌落数增加 (4)5.0×10
8．(2020·浙江教育绿色评价联盟高三考试)已知某细菌的两种突变类型细菌Ⅰ和细菌Ⅱ的营养条件和菌落特征都相同，但细菌Ⅰ能分解有机物A而不能分解有机物B，细菌Ⅱ能分解有机物B而不能分解有机物A。现有这两种类型细菌的混合液样品，要将其分离，有人设计了一种方案，部分操作步骤如下图。请回答下列问题：
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3
8
(1)步骤一使用的是____________培养基，其中含有细菌生长所需的水、无机盐、碳源和氮源等营养物质，此外还必须加入____________，以利于对不同菌种进行分离操作。
(2)步骤一采用____________法接种，此接种法可使接种细菌逐渐稀释，经适宜条件培养，可形成单个、独立的____________，最终可能得到纯种的细菌；要进行上述接种操作，必须在____________及酒精灯火焰附近进行，以避免杂菌污染。
(3)步骤三中，若对其中某瓶培养液中A、B两种有机物含量进行测定，当培养液中检测出如下的实验结果时，能说明培养液只有细菌Ⅰ的是________。
A．化合物A与B含量都明显下降
B．化合物A含量明显下降，B含量基本不变 C．化合物A含量基本不变，B含量明显下降 D．化合物A、B含量都基本不变
解析：(1)步骤一使用的是LB固体培养基，其中含有细菌生长所需的水、无机盐、碳源和氮源等营养物质。由于需要配制固体培养基，所以还必须加入凝固剂——琼脂，以利于对不同菌种进行分离操作。(2)步骤一采用划线分离法接种，此接种法可使接种细菌逐渐稀释，经适宜条件培养，可形成单个、独立的菌落，最终可能得到纯种的细菌；为了避免杂菌污染，必须在超净台及酒精灯火焰附近进行。(3)当培养液中检测出化合物A含量明显下降，B含
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量基本不变，才能说明培养液只有细菌Ⅰ，因为细菌Ⅰ只能分解利用有机物A不能利用有机物B。
答案：(1)LB固体 琼脂 (2)划线分离 (单)菌落 超净台 (3)B
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