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p53反式结合hsp90β基因

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p53反式结合hsp90β基因

陈丽玲;吴宁华;沈珝琲;关新民

【期刊名称】《中国医学科学院学报》 【年(卷),期】2002(024)003

【摘要】目的探讨hsp90β基因中p53结合位点(+31/+60)是否参与p53与hsp90β基因的反式结合,以进一步揭示该位点在p53调节hsp90β基因转录中的作用.方法将含有p53结合位点的hsp90β基因片段插入质粒pBS-SK,然后将它与突变引物和选择引物一起依次退火和延伸,经过两轮细菌转化,酶切筛选出突变阳性质粒后进行序列分析.采用电泳迁移率变更测定(EMSA)检测突变后基因片段与转染p53表达质粒的Jurkat细胞核抽提物的结合.结果序列分析证实p53结合位点第2个半位点核心序列的两个碱基已发生突变,EMSA结果表明,突变后基因片段不能与p53结合.结论hsp90β基因中p53结合位点的核心序列在p53与hsp90β基因的反式结合中起关键作用. 【总页数】4页(285-288)

【关键词】p53 hsp90β基因 定点突变 【作者】陈丽玲;吴宁华;沈珝琲;关新民

【作者单位】Ph.D. Candidate in Tongji Medical College of Huazhong University of Science and Technology;中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005;中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005

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