二、环境标本采集、处理、保存和运输 （一）标本采集和处理 1、采样液
环境标本采样液可用Hank's或Eagle's等培养液加入以下抗菌素和0.5%BSA：氨苄青霉素(2x106 IU/L)、链霉素(200mg/L)、多粘菌素B(2x106 IU/L)、庆大霉素(250mg/L)、制霉菌素(0.5x106 IU/L)、盐酸氧氟沙星(60mg/L)、磺胺甲基异恶唑(200mg/L)。 2、标本种类、采集方法及处理 （1）水标本
在禽类活动或笼具旁的水沟或水池不同部位共收集水标本5-10ml置于15ml外螺旋盖的管内。水样标本到实验室后应在采样管中加入上述抗生素和0.5%BSA，再分装。如果采集水标本中存在固体等物质，应将采集标本在无菌条件下反复吹打，以打碎固体物质，置4℃待其自然沉淀30min，也可3000rpm离心10min，取上清分装。 （2）笼具表面标本
每个笼具采集1份标本放在1个单独采样管中。用蘸有采样液的带有聚丙烯纤维头的拭子擦拭笼具表面禽类最常接触的3-5个不同部位（包括笼具底部），然后将擦拭过的拭子放入含5ml采样液采样管中，尾部弃去。也可用多个拭子充分擦拭笼具表面后放到1个采样管中。环境标本要在无菌条件下反复吹打收集的溶液，以打碎固体，置4℃待其自然沉淀30min，也可3000rpm离心10min，取上清分装。 （3）宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭标本
如宰杀或摆放禽肉使用不同案板，可采集擦拭标本放到不同采样管中。方法与采集笼具表面擦拭标本相同，拭子要擦拭禽肉接触最多部位。 （4）粪便标本
从禽舍或环境中采集新鲜禽类粪便样品3-5g左右，放入含5ml采样液的采样管中。采集的粪便标本要在无菌条件下反复吹打，以打碎粘液和固体物质，置4℃待其自然沉淀30min，也可3000rpm离心10min，取上清分装。 （5）清洗禽类的污水
如有清洗禽类的污水盆或桶，可采集清洗禽类的污水标本。将水槽中水样用无菌的、一次性的玻璃棒或棉签充分混匀后采集5-10ml置于15ml外螺旋盖的管内。水样标本到实验室后应在采样管中加入抗生素和0.5%BSA，再分装。方法与采集水标本相同。 （6）禽类饮用水
在每个笼具旁的饮水槽采集1份饮用水标本。方法与采集清洗禽类的污水标本相同。 （7）其他
包括地面污水、地面灰尘及笼具垫草等。 （二）环境标本保存和送检
环境可置4℃存放2天，存放超过2天需置-70℃或以下保存。环境标本处理后，将原始标本分为3份，1份用于核酸检测，1份保存备用，1份备用送国家流感中心，送检量不少于1.5ml。检出阳性后1周内送省疾控中心急传所实验室后统一运送国家流感中心。所有标本要求-70℃或以下保存。 （三）标本运输
标本放入专用运输箱内（或疫苗冷藏包），放入冰排，然后以柔软物质填充，内衬具吸水和缓冲能力材料。同时寄送标本登记表。运输要求符合国家生物安全有关规定。病原学标本按B类感染性物质运输。
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