实验一 常用培养基的制备、灭菌与消毒
思考题
1、培养基配好后,为什么必须立即灭菌?如何检查灭菌后的培养基是无菌的?
2、在配制培养基的操作过程中应注意些什么问题?为什么? 3、培养微生物的培养基应具备哪些条件?为什么? 4、培养基的配制原则是什么?
5、高压蒸汽灭菌开始之前,为什么要将锅内冷空气排尽?
6、灭菌完毕后,为什么要待压力降到0时才能打开排气阀,开盖取物?
7、在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时,怎样杜绝一切不安全的因素?
实验二、普通光学显微镜的使用
思考题
1、试列表比较低倍镜、高倍镜及油镜各方面的差异。为什么在使用高倍镜及油镜时应特别注意避免粗调节器的误操作?
2、什么是物镜的同焦现象?它在显微镜观察中有什么意义? 3、影响显微镜分辨率的因素有哪些?
4、根据你的实验体会,谈谈应如何根据所观察微生物的大小,选择不同的物镜进行有效的观察。
实验三、革兰氏染色法
思考题
1、哪些环节会影响革兰色染色结果的正确性?其中最关键的环节是什么?
2、进行革兰氏染色时,为什么特别强调菌龄不能太老,用老龄细菌染色会出现什么问题?
3、革兰氏染色时,初染前能加碘液吗?乙醇脱色后复染之前,革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌应分别是什么颜色?
4、 不经过复染这一步,能否区别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌? 5、 你认为制备细菌染色标本时,应该注意哪些环节? 6、 为什么要求制片完全干燥后才能用油镜观察?
7、 如果涂片未经热固定,将会出现什么问题?加热温度过高、时间太长,又会怎样呢?
实验四、显微镜直接计数法
思考题
根据你实验的体会,说明用血球计数板计数的误差主要来自哪些方面?应如何尽量减少误差,力求准确?
实验五 微生物接种技术
思考题
1、 如何确定平板上某单个菌落是否为纯培养?请写出为什么高氏I号培养基和马丁氏培养基中要分别加入酚和链霉素?如果用牛肉膏蛋白胨培养基分离一种对青霉素具有抗性的细菌,你认为应如何做? 2、 试述如何在接种中,贯彻无菌操作的原则? 3、 以斜面上的菌种接种到新的斜面培养基为例说明操作方法和注意事项。
实验七、 酸乳中乳酸菌的测定
思考题
为什么乳酸菌的检测关键是选用特定良好的培养基?
实验 八 水中细菌总数的测定
思考题
1、自来水的细菌总数结果来看,是否合乎饮用水的标准? 2、 测的水源水的污秽程度如何?
实验 九 细菌总DNA的提取
思考题
1、菌种保藏中,石蜡油的作用是什么?
2、经常使用的细菌菌株,使用那种保藏方法比较好? 3、沙土管法适合保藏那一类微生物?
实验十一、 微生物遗传实验
思考题
梯度平板中部的单个菌落被划线,并二次培养的目的是什么?
实验十二、 大肠杆菌生长曲线的测定
思考题
1、较A、B、C三组生长曲线有什么不同?说明原因,标出A组生长曲线的四个时期的位置及名称。
2、条A生长曲线有什么不同?为什么?
实验十三、 霉菌的形态观察
思考题
1、比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌形态上的异同。 2、玻璃纸应怎样进行灭菌?为什么?
实验十四、 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴定
思考题
1、吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同,对酵母菌死细胞数量有何影响?试分析其原因。
2、在显微镜下,酵母菌有哪些突出的特征区别于一般细菌?
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