31．（7分）下图1为生产HIV单克隆抗体的过程；图2为运用基因工程技术生产HIV疫苗的操作简要路径。据图分析回答：
（1）图1中,过程①称为__________技术。过程②融合实验完成后,融合体系中通常会有__________种细胞(只考虑一次融合)。杂交瘤细胞产生的抗体的优点是__________。
（2）图2中, 过程①需要用到__________酶。一个DNA片段进行扩增最简便的方法是使用PCR技术，如果这个过程中消耗了引物62个，则进行了__________轮的DNA复制。 （3）若将重组质粒导入小鼠受精卵细胞中,通常应采取__________技术。
（4）用限制酶处理DNA片段,可使特定核苷酸序列特定部位的__________键断开。 若用X、Y两种限制酶作用于图2中的DNA片段,并进行电泳分析,其结果如图：
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A至D选项中,关于两种酶切位置的判断,正确的是__________。
【答案】 （1）(动物)细胞融合 5 特异性强，灵敏度高，并可大量制备 （2） 逆转录 5 （3） 显微注射 （4） 磷酸二酯 B
(2) 图2中, 过程①是以RNA为模板合成DNA的逆转录过程，需要用到逆转录酶。利用PCR技术扩增一个DNA片段的过程中，除了最初亲代DNA的两条模板链不含引物外，凡是新形成的子链均含有引物。如果利用PCR技术连续扩增n轮的过程中共消耗了引物62个，则2－2＝62，解得n＝5。 (3) 将重组质粒导入小鼠受精卵细胞中,通常应采取显微注射技术。
(4) 用限制酶处理DNA片段，可使特定核苷酸序列特定部位的磷酸二酯键断开。图2显示：单独使用Y限制酶切割得到2种8000和2000碱基对的片段，说明该DNA片段中有1个Y限制酶的切割位点；单独使用X限制酶切割该DNA片段，得到3种分别为6000、3500和500碱基对的片段，说明该DNA片段中有2个X限制酶的切割位点；同时使用X和Y两种限制酶切割得到4种4500、3500、1500和500碱基对的片段，说明在用Y限制酶切割得到的2000碱基对的片段中存在1个X限制酶的切割位点，该切割位点将2000碱基对的片段切割为2种1500和500碱基对的片段；在用Y限制酶切割得到的8000碱基对的片段中也存在1个X限制酶的切割位点，该切割位点将8000碱基对的片段切割为4500和3500碱基对的片段。综上分析，B正确，A、C、D均错误。
32．（8分）重组人血小板生成素（rhTPO)是一种新发现的造血生长因子，如图为通过乳腺生物发生器产生rhTPO的相关过程。请回答下列问题。
n
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（1）构建重组质粒时选用的限制酶是____________，原因是__________________。重组质粒中的标记基因是___________，标记基因的作用是_________________________。
（2）通常采用__________技术将重组质粒导入受精卵，图中所示的过程与胚胎工程相关的有_________(至少写出两个）。
（3）若检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，检测方法是___________技术，其次还需检测目的基因____________，这是检测目的基因是否发挥作用的第一步，最后检测目的基因是否翻译成蛋白质。 【答案】（1） HindⅢ和XhoⅠ SmaⅠ的酶切位点位于目的基因中间，如果用SmaⅠ切割，不能得到完整的目的基因（或用HndⅢ和XhoⅠ可以得到完整的目的基因) 抗卡那霉素基因 鉴别受体细胞中是否含有目的基因，以便筛选 （2）显微注射 体外受精、早期胚胎培养(动物细胞培养）、胚胎移植 （3）DNA分子杂交 是否转录出mRNA
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