再论细菌内毒素限值的确定

再 论 细 菌 内 毒 素 限 值 的 确 定

中国药品生物制品检定所 北京 100050

王思理 张国来 蔡 彤 国家药典委员会 北京 100061

王 平 张莜红

中国药典2000年版已经正式出版，并将于2000年7月1日正式执行。细菌内毒素检查法应用指导原则及附件细菌内毒素定量检测法（动态浊度法和显色基质法）均被列入新版药典。指导原则中对细菌内毒素限值的确定有非常明确清楚的规定：

\细菌内毒素限值的确定 药品、生物制品的细菌内毒素限值（L）一般按以下公式确定：

L＝K/M

式中 L为供试品的细菌内毒素限值，以EU/ml、EU/mg、EU/u表示。K为按规定的给药途径，人用每公斤体重每小时最大可接受的内毒素剂量，以EU/(kg·hr)表示。注射剂，K＝5 EU/(kg·hr)；其中放射性药品注射剂，K＝2.5 EU/(kg·hr)；鞘内用注射剂，K＝0.02 EU/(kg·hr)。M为人用每公斤体重每小时最大剂量，以ml/ (kg·hr)、mg/(kg·hr)、u/(kg·hr)表示，人均体重按60kg计算，注射时间小于1小时，按1小时计算。 按人用剂量计算L值时，如遇特殊情况，可根据生产和临床用药实际作必要调整。应该说，今后国内对细菌内毒素限值（L）的确定可以统一了。然而，从目前发表的文章和笔者审核的成果报告等都发现在药品的细菌内毒素检查法建立时对关键性的细菌内毒素限值（L）的确定尚存在不少问题。主要问题是对\为人用每公斤体重每小时最大剂量\作了如下的解释：

其一、把最大剂量解释成\热原检查法剂量\。例如：\注射用硝普钠中细菌内毒素的检查

注射用硝普钠的内毒素限值（L）：根据药品内毒素限值的计算方法，K=5.0EU/Kg，注射用硝普钠热原检查剂量M=1mg/Kg

L=K/M=(5.0EU/Kg)/(1mg/Kg)=5EU/mg。显然，我们不能把热原检查剂量当作人用最大剂量。查阅美国药典24版（2000）规定的硝普钠和注射用硝普钠的细菌内毒素限值均为0.05EU/μg。本例比美国严了10倍左右。

其二、把最大剂量解释成\每小时的人用量的f倍\。例如：\无热原剂量者，按以下公式计算：

L=K/(fM)

f为安全系数，一般为3-10（因为热原检查建立一般为临床一次用量的3-10倍）。例如，中国药典规定硫酸镁注射液每小时的人用量为25mg/Kg，按公式计算其细菌内毒素限值为：

L=K/(fM)= (5.0EU/Kg)/(4×25mg/Kg)=0.05EU/mg。

显然，人用每公斤每小时最大剂量在本例中就应使用中国药典规定的每小时的人用量，而不是它的4倍。

其三、把最大剂量解释成\热原剂量或人用最大剂量。上述解释似乎对了一半即\人用最大剂量\，但是在实际计算时，又提出：\值按下式确定：

L=K/(fM)

式中，f为安全系数，一般为3-10（因为热原检查剂量一般为临床一次用量的3-10倍）。例如：注射用头孢哌酮钠，其热原检查剂量M=1ml/Kg（浓度Co=100mg/ml），或M=100mg/Kg。L=K/M=(5.0EU/Kg)/(1mg/Kg)=5EU/mg。

或 (5.0EU/Kg)/(100mg/Kg)=0.05EU/mg。显然，本例所说人用最大剂量实际上也是热原检查剂量。查阅美国药典24版（2000）规定的头孢哌酮钠（注射液）细菌内毒素的限值L=0.2EU/mg。本例比美国严了4倍左右，造成4倍的差异笔者认为是由于f=4倍所致。

其四、把最大剂量解释成\求低不求高。即按上述计算得到某种药品的细菌内毒素限值后，再查阅有关资料如美国药典等，与美国药典比较，哪个低（严），那么就以严的为准。 笔者认为科学地合理地确定细菌内毒素限值不仅对我国建立细菌内毒素检查法至关重要，对保证被检药品的安全使用也十分重要。而且它还直接关系到判断药品合格与否，影响药品能否出厂，同时与国际贸易和对外技术交流等都有十分密切的关系。因此，对细菌内毒素限值的确定必须引起我们的高度重视。为此我们将中国药典2000年版已经规定的用细菌内毒素检查的69个品种列表，并将查阅美国药典24版规定的限值作对比（表一）。笔者认为虽然同一品种，由于中国和美国的人用最大剂量有所不同以及人体重60Kg与70Kg的差异，因此限值的差异是必然的。但是，同品种限值相差f倍是不合理的，值得引起重视的。中国药典2000年版细菌内毒素检查法应用指导原则对细菌内毒素限值的确定已经很明确，对自己负责管制的品种进行细菌内毒素限值的重新审核是非常必要的。

表一

页码 品名 内毒素限值（CP 2000） 内毒素限值（USP 2000） 117 右旋糖酐铁注射液 0.5 EU/mg Fe 0.5Eu/mgFe 158 甲硝唑注射液 0.35 EU/ml 0.35EU/ml 160 甲硝唑葡萄糖注射液 0.5 EU/ml * 173 头孢曲松钠 0.2 EU/mg 0.2Eu/mg 174 注射用头孢曲松钠 0.2 EU/mg 0.2Eu/mg 178 头孢呋辛钠 0.1 EU/mg 0.1Eu/mg 179 注射用头孢呋辛钠 0.1 EU/mg 0.1Eu/mg 182 头孢拉定 0.2 EU/mg 0.2 Eu/mg 185 注射用头孢拉定 0.2 EU/mg 0.2 Eu/mg 279 两性霉素B 5.0 EU/1000单位 *

280 注射用两性霉素B 5.0 EU/1000单位 0.9 EU/1000单位(鞘内注射) 5.0Eu/mg

313 邻碘[131I]马尿酸钠注射液 15 EU/ml 175EU/V 355 青霉素钠 0.01 EU/1000单位 0.01 EU/单位 356 注射用青霉素钠 0.01 EU/1000单位 0.01 EU/单位 356 青霉素钾 0.01 EU/1000单位 0.01 EU/单位

357 注射用青霉素钾 0.01 EU/1000单位 0.01 EU/单位 411 乳糖酸红霉素 0.17 EU/1000单位 1.0 Eu/mg 412 注射用乳糖酸红霉素 0.17 EU/1000单位 1.0 Eu/mg 428 注射用水 0.25 EU/ml 0.25 EU/ml 428 灭菌注射用水 0.25 EU/ml 0.25 EU/ml 429 注射用亚锡亚甲基二膦酸盐 75EU/瓶 * 430 注射用亚锡依替菲宁 75EU/瓶 * 430 注射用亚锡植酸钠75EU/瓶 * 431 注射用亚锡喷替酸75EU/瓶 *

432 注射用亚锡焦磷酸钠 75EU/瓶 *

432 注射用亚锡聚合白蛋白 75EU/瓶 * 434 注射用盐酸平阳霉素 25 EU/mg 10.0EU/单位 464 枸橼酸镓[67Ga]注射液 15 EU/ml 175EU/V 494 重组人生长激素 5 EU/mg * 496 重组人生长激素溶液 5 EU/mg * 496 注射用重组人生长激素 5 EU/mg * 497 重组人胰岛素 10 EU/mg 10EU/mg

498 重组人胰岛素注射液/80 EU/100单位 80 EU/100单位 499 精蛋白重组人胰岛素2.5 EU/单位 2.5 EU/单位 516 复方氯化钠注射液 0.5 EU/ml *

547 盐酸大观霉素 0.09 EU/1000单位 0.09EU/mg 548 注射用盐酸大观霉素 0.09 EU/1000单位 0.09EU/mg 629 盐酸林可霉素 0.5 EU/mg 0.5EU/mg 631 盐酸林可霉素注射液 0.5EU/mg 0.5EU/mg 697 莪术油葡萄糖注射液 0.5 EU/ml * 733 中性胰岛素注射液 0.8 EU/单位 *

733 精蛋白锌胰岛素注射液 0.8 EU/单位2.5EU/单位 741 胶体磷[32P]酸铬注射液 15 EU/ml 175EU/V 742 高三尖衫酯碱注射液 25 EU/mg *

742 高锝[99mTc]酸钠注射液 7.5 EU/ml 175EU/V 771 铬[51Cr]酸钠注射液 40 EU/ml 175EU/V 793 维生素C注射液 2.5 EU/ml 1.2EU/mg 816 葡萄糖氯化钠注射液 0.5 EU/ml 10.0 EU/g

816 葡萄糖注射液 0.5 EU/ml 0.5EU/ml(5%)10.0EU/ml(5~70%)大于10%的注射液要稀释至10%

863 硫酸西梭米星 0.5 EU/1000单位 0.5 864 硫酸西梭米星注射液 0.5 EU/1000单位 0.5 866 硫酸庆大霉素 0.5 EU/1000单位 1.7EU/mg 868 硫酸庆大霉素注射液0.5 EU/1000单位1.7EU/mg 878 硫酸奈替米星 1.25 EU/1000单位 1.25EU/mg

879 硫酸奈替米星注射液 1.25 EU/1000单位 1.25EU/mg 904 氯化亚铊[201Tl]注射液 50 EU/ml *

907 氯化钠注射液 0.5 EU/ml 0.5EU/ml(0.5-0.9%)3.6EU/ml(3.0-24.3%) 944 普鲁卡因青霉素 0.01 EU/100单位 0.01EU/单位 945 注射用普鲁卡因青霉素 0.01 EU/100单位0.01EU/单位 975 锝[99mTc]亚甲基二膦酸盐注射液 15 EU/ml 175EU/V 976 锝[99mTc]依替菲宁注射液 15EU/ml * 976 锝[99mTc]植酸盐注射液 15EU/ml * 977 锝[99mTc]喷替酸盐注射液 15EU/ml 175EU/V 977 锝[99mTc]焦磷酸钠注射液 15EU/ml 175EU/V 978 锝[99mTc]聚合白蛋白注射液 15EU/ml 175EU/V 1008 缩宫素注射液 2.5 EU/单位 35.7 EU/单位 1040 磺苄西林钠 0.05 EU/1000单位 * 1040 注射用磺苄西林钠 0.05 EU/1000单位 * 1072 磷[32P]酸钠注射液 15 EU/ml 175EU/V * 代表美国药典中无此药，或此药无细菌内毒素检查法项。