2015-动物实验基本操作

3、眶静脉丛（窦）采血 将动物麻醉，采用侧眼向上固定体位，用左手拇指和食指从背部较紧地握住大（小）鼠颈部。取血时，左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，是头部静脉血液回流困难，眼球充分外突，眶静脉丛充血。 【注意事项】

1、掌握方法，胆大心细，做好防护。

2、常用灌胃量：小鼠：0.2～1ml, 大鼠1～4ml

3、摘取眼球采血法一般可取约为小鼠体重4-5%的血液量。 【思考题】

1.如何熟练掌握大小鼠的给药途径和采血方法？

动物实验基本操作三（安乐死）

【实验目的】在科学应用和教学实验中，因实验终结、研究所需提供血液或其他组织脏器、不适合繁殖或者是当动物的疼痛与窘迫程度超过预期等情况下，需

要我们以人道的方式使动物死亡，使动物在最低程度的疼痛、恐惧，并在最短的时间内失去知觉和痛觉。

【实验对象】KM小鼠，雌雄各半，体重18-22g。 【实验器材和药品】

器材：鼠笼、大小鼠固定器、注射器（1ml）、棉球，剪毛剪、手术剪、手术刀、采血管、弯头镊子、烧杯100ml、方木板

药品：吸入性麻醉剂、注射型麻醉剂、75％酒精棉球

【实验步骤】

1、 颈椎脱臼法 用拇指和食指用力往下按住鼠头，另一只手抓住鼠尾（鼠尾根部），用力往后上方一拉，使颈椎脱臼，造成脊髓与脑髓断离，动物立即死亡。

2、放血法 麻醉动物后，将动物股、颈动脉、静脉全切断，血液立即喷出；用一块湿纱布不断擦去股动脉切周围处的血液和血凝块，同时不断的用自来水冲洗流血，使股动脉切口处保持畅通，动物3～5分钟内即可致死。 3、药物致死法

A、药物吸入 药物吸入是将有毒气体或挥发性麻醉剂，被动物经呼吸道吸入体内而

致死，将KM小鼠放入含有乙醚的密封烧杯中，3-5分钟后可死亡

B、药物注射 将药物（腹腔注射硫酸镁）通过注射的方式注入动物体内，使动物死亡

【注意事项】

1、实验人员要有精神准备：掌握方法，胆大心细，做好防护、克服心理紧张等因素 【思考题】

1.安乐死的意义是什么？

实验二 家兔的气管及动脉插管

实验目的

1.学习捉拿家兔的正确方法和固定。

2.掌握常用手术器械的正确使用方法。

3.学习动物实验的基本操作技术，包括麻醉、切口与止血、气管插管术、颈动脉插管术

实验对象 健康家兔,雌雄均可,体重2.0～2.5Kg 实验内容

1.家兔的捉拿、麻醉与固定 2.颈总动脉、神经等的分离技术 3.气管插管 4.动脉插管

器材与药品 器材：

兔手术台、哺乳类动物手术器械一套、三通、动脉夹、动脉插管、气管插管、纱布、棉线、注射器、绑腿带、污物杯。

20%氨基甲酸乙酯溶液(乌拉坦，4-5ml/kg体重，麻醉用) 步骤和方法

一、家兔的捉拿与称重

1、家兔的捉拿：右手抓住家兔颈背部皮肤，轻轻将家兔提起，迅速以左手托住其臀部，使家兔体重主要落左掌心上，以免损伤动物颈部。 注意点：

家兔一般不咬人，但脚爪锐利，在挣扎易抓伤捕捉者，所以捕捉时要特

别注意其四肢。

2、家兔的称重： 将家兔放在婴儿秤上，待家兔安静的时候观察体重并记录。 注意点：

(1)调零

(2)切勿使劲按压称面

二、家兔的麻醉

1、麻醉药的注射

如图1：

助手的一侧上肢弯曲与同侧的躯干夹住家兔的后半部位，同时该侧的手托住家兔的腹部，另一只向上抓住家兔的颈背部，充分暴露耳背外缘耳缘静脉。实验者的左食指、中指轻夹耳根部使静脉充盈，从远心端以30℃角度进针刺入静脉后顺血管平行方向深入1cm，左手拇指、食指在刺入部位将针头与兔耳固定，即可注入麻醉药。

2、麻醉效果判定：可以通过观察动物呼吸平稳深慢、角膜反射迟钝或消失、

肢体肌肉松弛、皮肤夹捏反射消失四方面来判定是否达到理想的麻醉效果

三、家兔的气管与动脉插管

1、仰卧固定：头部用一根粗棉线拉住兔的两只门齿后栓在兔板的铁柱或固定于钩上。两前肢平直放在胸腰部两侧,用粗棉绳的一端缚扎腕关节以上部位,缚绳从背后左右交叉穿过,压在对侧前肢的前臂上,再紧扎于兔板两侧的木钩上,两后肢左右分开, 缚绳扎踝关节以上部位,另一端分别固定于兔板后两侧