__________________________________________________________________________________________ 正确答案:( 十二烷基硫酸钠 非离子 疏水 非极 甲叉双 TEMED 过硫酸铵 垂直 分离 无氧 ) 解析:
在进行蛋白质变性电泳时, 常用的蛋白质变性剂是 SDS, 即十二烷基硫酸钠, 它是一种非离子型去污剂, 能破坏蛋白质的疏水力, 使非极性基团暴露。 在制备 SDS-PAGE 电泳凝胶时, 除了需要丙烯酰胺、 甲叉双丙烯酰胺、 过硫酸铵、 SDS 溶液外, 还需要加入一种具有浓烈味道的微量液体试剂TEMED 以加速凝胶聚合反应。 凝胶制备很简单, 通常将事先配制好的电泳胶储液按一定比例混合, 但过硫酸铵需要新鲜配制。 对于不连续电泳, 在双层垂直玻璃板之间首先灌入分离胶, 然后在胶上再加一薄层水, 这不仅能使胶表面整齐, 而且可以加速凝胶的聚合反应, 因为丙烯酰胺凝胶的聚合需要无氧条件。 当在凝胶和水之间出现界面时表明凝胶已经聚合好, 就可以除去水层, 加入浓缩胶了。
八、分析论述题(总题数:2,分数:26.00)
41.一个蛋白质分子的某些氨基酸残基明明发生了突变, 但在功能上并没有表现出明显变化。 请结合这一现象, 用辩证的观点讨论蛋白质一级结构与功能的关系。(分数:13.00)
__________________________________________________________________________________________ 正确答案:(
(1)一级结构是蛋白质的重要结构, 一级结构决定高级结构, 高级结构决定生物功能。 (2)蛋白质多肽链在折叠为天然构象时, 不同位点氨基酸的贡献是不同的。
(3)有些位点的氨基酸残基在进化上比较保守, 称为不变残基或保守残基, 它们对蛋白质特定结构和功能非常重要, 如果发生突变, 蛋白质极易丧失正常功能; 有些位点的氨基酸残基可以发生改变, 称为可变残基, 它们对蛋白质的结构和功能没有特殊影响, 一般只在物种进化中起作用, 与免疫性有关。 (4)另外, 有时虽然发生了突变, 但氨基酸性质相近, 属于氨基酸替代, 也不会表现出蛋白质功能的差别。 可见, 蛋白质的一级结构与生物功能的关系是辩证的, 既具有保守、严格的对应关系, 又有一定变异性, 以适应物种进化的需要。 ) 解析:
42.请讨论在葡萄糖经过糖酵解和TCA 循环彻底氧化分解为 CO2 和 H2O 这个过程中有哪些代谢调控酶, 并写出这些酶催化的反应。(分数:13.00)
__________________________________________________________________________________________ 正确答案:(
分成 EMP 途径、 丙酮酸脱氢以及 TCA 循环三个阶段, 分别说明参与代谢调节的酶及其催化的反应。 (1) EMP 途径: 己糖激酶 葡萄糖→6-磷酸葡萄糖 磷酸果糖激酶
6-磷酸果糖→1,6-二磷酸果糖 丙酮酸激酶 PEP→丙酮酸
中磷酸果糖激酶的调节最为关键。 (2)丙酮酸脱氢:
丙酮酸脱氢酶复合体(丙酮酸脱氢酶为主) 丙酮酸→乙酰 CoA (3) TCA 循环: 柠檬酸合酶
草酰乙酸十乙酰 CoA→柠檬酸 异柠檬酸脱氢酶 异柠檬酸→α-酮戊二酸 α-酮戊二酸脱氢酶 α-酮戊二酸→琥珀酰 CoA 其中柠檬酸合酶的调节最为关键。 ) 解析:
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