《生物化学》习题册

16. 利用SDS-PAGE测定蛋白质亚基的相对分子质量。下面给出了作为标准的4种纯化蛋白质

的亚基的相对分子量和相应的迁移率。求迁移率为蛋白质1和2的平均值的未知蛋白的相对分子质量。

蛋白质编号 1 2 3 4

17．从肝细胞中提取的一种蛋白水解酶的粗提液300 mL含有150 mg蛋白质，总活力为360单位。经过一系列纯化步骤以后得到的4 mL酶制品含蛋白质0.08 mg，总活力为288单位。整个纯化过程的回收率是多少？纯化了多少倍？

18.由于对蛋白质样品组成不清楚，从以下的SDS-PAGE和阳离子交换层折图1-4分析样品组成。

相对分子质量 15 000 35 000 25 000 20 000 迁移率 5 cm 为1的39％ 为1的63％ 为1的81％

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19. 下表是一种酶的各个纯化步骤的总蛋白和总活性单位数。 纯化步骤 1. 粗提 2. 盐沉淀 3. pH沉淀 4. 离子交换层折 5. 亲和层折 6. 凝胶过滤层折 总蛋白/mg 20 000 5 000 4 000 200 50 45 总活性单位数 4 000 000 3 000 000 1 000 000 800 000 750 000 675 000 (a) 从表中给出的信息计算每一步纯化步骤得到的酶溶液的比活。 (b) 哪一纯化步骤最有效 （相对纯度增加最大）？ (c) 哪一纯化步骤效率最低？

(d) 按照表中的6个步骤纯化的酶是纯酶，表中结果是否有指示？有没有别的方法评价酶的纯度？

20. 试述用凝胶电泳鉴定过氧化物酶同工酶的原理和主要操作步骤？

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