激光共聚焦显微镜

激光共聚焦显微镜；

Neuro Trace荧光尼氏染色液(Neuro Trace FluorescentNissl Stain)可以标记神经元细胞中的尼氏小体(Nissl body), 显示脑或脊髓的基本神经结构。脑切片Neuro Trace荧光尼氏染色液染色, 在激光共聚焦显微镜下观察, 用Tile Scan图像拼接功能对整张脑片成像。统计每组小鼠脑切片中组织破裂个数, 结果发现,冰冻切片经液氮速冻的脑组织容易冻裂, 导致脑组织切片出现裂缝及破损, 而振动切片脑组织结构较完整(P<0.01, 图1A和图1C, 表2)。为比较两种脑组织切片结构完整性, 每组脑切片选择24个视野采集图像, 统计空白区域百分比, 空白区域百分比是指每高倍视野中的空洞区域占总视野的面积比, 相同部位切片的空白区域百分比越大, 表示空洞面积越大,结果显示, 冰冻切片易产生冰晶, 特别是富含水分的皮层区有较多空洞产生, 而振动切片几乎没有空洞产生(P<0.01, 图1B和图1D, 表2)。冰冻切片方法中蔗糖脱水后会导致脑组织收缩, 选取两种切片相同部位采集图像, 每组脑切片随机测量200个神经元胞体面积, 冰冻切片组与振动切片组神经元胞体面积分别为157.73±16.26 μm2、194.97±20.93 μm2(P<0.01),表明振动切片由于无需脱水, 镜下所见细胞比冰冻切片的大, 更能反应脑组织的活体状态(图1C和图1D, 表2)。为验证尼氏荧光染色的结果, 本文对两种方法制备的脑片进行HE染色, 结果与荧光染色结果相符(图2)。

相差显微镜；

图1 可见原始的粘虫血细胞在细胞组成中随幼虫年龄渐趋减少，到前蛹期则全缺失。 图2 粘虫幼虫期的浆细胞（噬色细胞）。