②内质网、高尔基体等细胞器 对多肽链进行加工 真核细胞（酵母菌） 植物
17.（海淀区高三上期中44)菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基因转入菊花，培育出抗虫菊花。图11是获得转基因菊花的技术流程，请据图回答：
含重组质抗虫基因构建重组离体菊花愈伤分化再生检测转基因抗 粒的土壤侵染R质粒叶片组织组织植株虫植株农杆菌 含kan质粒 （注：卡那霉素抗性基因（kanR）作为标记基因，菊花叶片对卡那霉素高度敏感。） （1）为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒，图可用11 ______________处理土壤农杆菌，使其处于感受态。
（2）将重组质粒导入土壤农杆菌的目的是利用农杆菌能够
_______________________的特点，使目的基因进入受体细胞中，并插入到菊花细胞的_______________上，最终形成转基因植株。 （3）将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素和_____________的培养基中，在适宜条件下进行培养，筛选转基因菊花。 （4）用PCR方法检测转基因菊花是否含有目的基因时，需根据________________的核苷酸序列设计特异引物，以________________为模板进行第一轮扩增。 （5）将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2 龄幼虫，实验结果如下表所示。 组别 死亡率（%） 转基因植株1 60.00 实验组 转基因植株2 53.33 对照组 13.33
①对照组应饲喂等量的_______________________________。
②据表分析，______________________________差异显著，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。 答案： （1）Ca2+（或“CaCl2”） （2）感染菊花（或“植物”）细胞，并将T-DNA转移至受体细胞 染色体DNA
（3）卡那霉素
（4）抗虫基因（目的基因） 转基因菊花的DNA（或“含目的基因的菊花DNA”） （5）①非转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料混合物 ②实验组与对照组死亡率
18.（2012年海淀高三上期中42）
I.逆转录病毒载体是一种表达型质粒，结构如图15所示。图上的“逆转录病毒序列”可以整合到动物细胞的染色体上，不断地表达其携带的目的基因。（E、F、H分别为限制酶E、F、H的酶切位点）。
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（1）逆转录的模板是______________，原料是___________________。
（2）在构建重组质粒时，目的基因应插入到该质粒的位置是______________，此过程需使用的酶是_____________________。为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加__________的培养基进行培养。获取大量重组质粒后，将其再转入到某种哺乳动物细胞中，可获得大量重组逆转录病毒。
II.图16为培育转基因小鼠基本过程的示意图。请回答下列问题：
（1）如A为重组质粒溶液，将其导入原核期受精卵的方法是_____________；如A为重组逆转录病毒，还可采取______________方法。
（2）小鼠出生后可从其尾巴提取_________分子，通过______________方法，可检测出携带目的基因的小鼠。
（3）若目的基因进入细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子小鼠的方法是________________________________________________________。 答案： （1）RNA （四种）脱氧核苷酸
（2）F（逆转录病毒序列） 限制酶和DNA连接酶（缺一不得分） 抗生素A （3）显微注射（法） 感染（侵染） （4）DNA DNA分子杂交（或核酸杂交） （5）转基因小鼠间相互交配（或杂交）
19.（2012年西城区期末36）我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下图为培育转基因水稻过程示意图，请分析回答：
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（1）铁结合蛋白基因来自菜豆，且基因的脱氧核苷酸序列已知，可以用 法获得此目的基因或用 扩增目的基因。
（2）构建重组Ti质粒时，通常要用 分别切割 。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用 处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。 （3）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得 ；培养基3与培养基2的区别是 。检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻 。 （4）为研究外源基因的遗传方式，将To代植株上收获的种子种植成T1代株系，检测各单株的潮霉素抗性。在检测的多数T1代株系内，抗潮霉素植株与潮霉素敏感植株的比例为3：1，此结果说明外源基因的遗传符合 。有少数T1代株系的所有植株都表现为对潮霉素敏感，但其体内能检测到铁结合蛋白基因，造成这一结果最可能的原因是 。 答案：（1）从基因文库中获取目的基因（化学合成） PCR （2）（同种）限制性核酸内切酶 含目的基因的片段和质粒（答全给分）
氯化钙
（3）含有重组质粒（有潮霉素抗性）的愈伤组织 生长素和细胞分裂素的
浓度比例
（成熟）种子中的铁含量
（4）基因分离定律 潮霉素抗性基因没有表达（潮霉素抗性基因丢失
细胞工程 植物细胞工程
1.（11年西城高三期末19）兰花、生菜以及无籽西瓜的试管苗的产业化生产依赖于植物组织培养技术，下列关于此技术优越性的叙述错误的是
A．能保持亲本的优良性状 B．能高效地实现种苗的大量繁殖 C．可用于繁殖三倍体植物 D．后代含有两个亲本的遗传物质 答案：D
2.（11年西城高三期末26）紫草素是紫草细胞的代谢产物，可作为生产治疗烫伤药物的原料。研究人员欲用植物组织培养技术通过培养紫草细胞生产紫草素，
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下列相关操作不适合的是
A．对作为外植体的紫草叶片进行消毒处理既保证细胞活性也可减轻污染 B．培养基中要加入植物激素保证已分化的植物细胞脱分化形成愈伤组织 C．调节植物激素的种类和比例以保证愈伤组织再分化并得到完整的植株 D．在培养细胞的过程中要不断通入无菌空气以保证氧气的充足供应 答案：C
3.（海淀区高三上期中16）细胞脱分化过程中一定不会发生的是 ．． A.失去原来的结构和功能 B.细胞核体积增大 C.细胞全能性得到表现 D.线粒体数目增加 答案：C
4.（海淀区高三上期中18）下列生物学过程中体现了细胞全能性的是
A.转基因小麦的种子发育成小麦幼苗 B.胚胎干细胞经诱导分化成神经细胞 C.杂交瘤细胞在培养基中无限增殖
D.经体细胞杂交获得白菜-甘蓝杂种植株 答案：D
5.（海淀区高三上期中19）图3表示四倍体兰花叶片植物组织培养的过程，下列相关叙述不正确的是 ．．．
胚状体兰花植株
图3
A.通过消毒和无菌操作避免①②过程发生杂菌污染 B.需生长调节物质调控①②过程细胞分裂和分化 C.细胞全能性表达前提是①过程，体现在②③过程 D.此兰花的花药离体培养所得植株为二倍体植株 答案：D
6.（2012年海淀高三上期中8）图3为植物组织培养过程流程图解，以下相关叙述不正确的是
四倍体兰花叶片愈伤组织①②③
A. a、b、c、d中的植物细胞都具有完全相同的DNA和RNA B. a ~ d的培养过程中，植物生长调节剂的种类和比例不同 C. 脱分化发生在a ~ b步骤，再分化发生在a ~ d步骤
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