_____________________________________________________________________(答出两点)。 (2)步骤②的操作是______________________________________________________________， 以让纤维素分解菌被_____________________________________________________________。 (3)鉴定纤维素分解菌时，培养基用______________染色。根据__________________________， 评定菌株的产酶能力。
答案 (1)增加纤维素分解菌的浓度 提供碳源、对纤维素分解菌有筛选作用 (2)梯度稀释(或“系列倍数稀释”) 分散成单个细胞 (3)刚果红 菌落产生的透明圈直径大小 解析 (1)题图中步骤①是将大熊猫粪便接种到液体培养基中进行培养，是为了增加纤维素分解菌的浓度；纤维素分解菌需要碳源，故要加入纤维素，另外只以纤维素为碳源可以作为筛选纤维素分解菌的指标。
(2)题图中步骤②是对纤维素分解菌进行梯度稀释处理，是为了让纤维素分解菌分散成单个细胞。 (3)可以采用刚果红染色法来鉴定纤维素分解菌，培养基需要用刚果红染色。刚果红会与纤维素形成红色复合物，若纤维素被分解，则在菌落周围会形成透明圈，故可以根据菌落产生的透明圈直径大小，评定菌株的产酶能力。 考向二 运用培养基进行微生物的筛选和纯化
3．(2019·全国Ⅰ，37)已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解，会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。 Ⅰ号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5g/L)。
Ⅱ号培养基：氯化钠(5g/L)，硝酸铵(3 g/L)，其他无机盐(适量)，X(15g/L)。 Ⅲ号培养基：氯化钠(5g/L)，硝酸铵(3 g/L)，其他无机盐(适量)，X(45g/L)。 回答下列问题：
(1)在Ⅰ号培养基中，为微生物提供氮源的是__________________。Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物是________。
(2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会__________________，其原因是_____________________________________________________ _______________________________________________________________________________。 (3)Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是__________________。
(4)假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供________和__________________。
答案 (1)牛肉膏、蛋白胨 X (2)下降 不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的细菌能够增殖(3)稀释涂布平板法 (4)能量 合成其他物质的原料
解析 (1)牛肉膏蛋白胨培养基中，牛肉膏、蛋白胨为微生物生长提供了氮源，而Ⅱ号、Ⅲ号培养基中除X外的其他物质均不含碳，所以能为微生物提供碳源的有机物是X。(2)因为Ⅱ号
培养基中碳源只有X，属于选择培养基，只有能降解X的细菌才能增殖，而不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖。(3)要对菌落进行计数，应采用稀释涂布平板法进行接种。(4)在有氧条件下，丙酮酸参与细菌的有氧呼吸，可以为该菌的生长提供能量和合成其他物质的原料。 4．(2019·福州质检)研究表明，香菇含有多种有效药用成分，其提取物有抗菌、抗肿瘤等多种功能。为研究香菇中的酚类物质对不同菌种的抑菌活性，科研人员进行了如下实验： (1)根据香菇中酚类物质具有____________的特点，可采用萃取法提取。 (2)制备大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉菌的菌液。
(3)用____________法将3种菌液分别接种在固体培养基上，使其均匀生长。 (4)将浸透____________的无菌圆纸片分别贴在各个平板上。
(5)将完成步骤(4)的平板置于恒温培养箱中进行培养，不同平板的培养温度不一定相同，原因
是
______________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________。 (6)测量抑菌圈直径，结果如下：
项目 香菇酚类物质
实验结果说明香菇酚类物质对______________没有明显的抑制作用，通过抑菌圈直径可以判断香菇酚类物质的抑菌活性高低的原理是____________________________________________ _______________________________________________________________________________。 为使实验更具说服力，应如何设计对照组？___________________________________________ _______________________________________________________________________________。 答案 (1)易溶于有机溶剂 (3)稀释涂布平板 (4)香菇酚类物质 (5)不同微生物的最适生长温度可能不同(6)黑曲霉菌 香菇酚类物质在平板上扩散使周围的微生物生长受到抑制，抑菌能力越强，抑菌圈直径越大 同时将用无菌水浸泡的相同大小的无菌圆纸片分别贴于接种了3种菌液的培养基上
解析 (1)根据香菇酚类物质易溶于有机溶剂的特点，可采用萃取法提取。
(3)微生物常见的接种方法包括平板划线法和稀释涂布平板法。用稀释涂布平板法将3种菌液分别接种在固体培养基上，使其均匀生长。
(4)将浸透香菇酚类物质的无菌圆纸片分别贴在各个平板上。
(5)将贴有浸透香菇酚类物质的无菌圆纸片的各个平板置于恒温培养箱中进行培养，由于不同微生物的最适生长温度可能不同，因此不同平板的培养温度不一定相同。
(6)从实验数据看出，黑曲霉菌的抑菌圈直径为0，说明香菇酚类物质对黑曲霉菌没有明显的
7.79 抑菌圈直径(mm) 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 黑曲霉菌 8.93 0 抑制作用。通过抑菌圈直径可以判断香菇酚类物质抑菌活性高低的原理是香菇酚类物质在平板上扩散使周围的微生物生长受到抑制，抑菌能力越强，抑菌圈直径越大。为使实验更具说服力，应设计对照组，即同时将用无菌水浸泡的相同大小的无菌圆纸片分别贴于接种了3种菌液的培养基上。 考向三 微生物的计数
5．(2019·广东汕头质检)某生物兴趣小组的同学计划调查某快餐店的冰块中大肠杆菌的含量。具体实验步骤如下：
第一步：配制培养基(成分：蛋白胨、氯化钠、乳糖、水、X和Y)。 第二步：制作无菌平板。
第三步：设置空白对照组和实验组，对照组接种①，实验组接种②。
第四步：将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。 回答下列问题：
(1)培养基中的乳糖可以为大肠杆菌提供____________________________________________。 为了方便大肠杆菌的鉴定，需要在培养基中添加成分X________________，在该培养基表面，大肠杆菌的菌落呈现________________(填颜色)。为了完成步骤二，该培养基中的成分Y通常是________________。 (2)完善步骤三
①是___________________________________________________________________________； ②是___________________________________________________________________________。 (3)在纯化大肠杆菌前，将灭菌后的空平板先培养一段时间，目的是________________。划线的某个平板培养后，第—划线区域的划线长满了菌落，第二划线区域却无菌落产生，可能的原因是__________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________。 (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是振荡培养能提高培养液中________________的含量和________________的利用率。
答案 (1)碳源 伊红美蓝 黑色 琼脂 (2)适量无菌水 取自该快餐店的等量冰块水 (3)检测培养基平板灭菌是否合格 接种环灼烧后未冷却便进行划线(或划线未从第一区域末端开始) (4)氧气 营养物质
解析 (1)乳糖是糖类物质，不含氮元素，所以培养基中的乳糖可为大肠杆菌提供碳源。鉴定大肠杆菌时，在培养基中添加的成分X是伊红美蓝，大肠杆菌的菌落呈现黑色。制作无菌平板是制作固体培养基，所以该培养基中还应加入琼脂，即成分Y是琼脂。
(2)本实验的目的是调查某快餐店的冰块中大肠杆菌的含量，故实验中对照组应接种适量无菌水，实验组应接种取自该快餐店的等量冰块水。
(3)为了检测培养基平板灭菌是否合格，常在纯化大肠杆菌前，将灭菌后的空平板先培养一段时间，若平板上有菌落生长，说明灭菌不合格。接种环在平板内的每一次划线前，都要先灼烧灭菌，待冷却后划线，而且要从上一次划线末端而非空白处划线，若不冷却会烫死上次划线末端的菌株，使以后的划线处没有菌落生长，若从空白处划线也是不会有菌落生长。所以划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线长满了菌落，第二划线区域却无菌落产生，可能的原因是接种环灼烧后未冷却便进行划线(或划线未从第一区域末端开始)。
(4)振荡培养可增加溶液中氧气的含量以及增强菌体与营养物质的接触，提高营养物质的利用率，从而使振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。
6．手机上的细菌真的比马桶还多吗？就此问题，甲、乙两位同学进行了下列实验(如图)。请回答下列相关问题：
(1)该实验需制备培养基，培养基中一般都含有水、碳源、______________________。 (2)据图，两位同学均采用______________法接种，该方法需要__________(多选)。 A．接种环B．酒精灯C．移液管D．涂布器 E．无菌水
(3)通过观察菌落的__________，可知手机屏幕和马桶按钮上都存在多种微生物。两位同学的实验操作均正确且完全一致，但实验结果却截然不同，你认为原因是______________________ _______________________________________________________________________________。 (4)按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将10mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为10的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为48、50、52，则该手机屏幕的细菌数为______个/cm。该实验对照组该如何设置？________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________ _______________________________________________________________________________。 答案 (1)氮源和无机盐 (2)稀释涂布平板 BCDE (3)形态、大小 手机的取样和马桶的取样都不相同 (4)2×10 取培养基涂布0.1mL无菌水进行培养
解析 (1)微生物培养基的成分一般包括水、碳源、氮源和无机盐。(2)根据题图分析，该实验的接种方法为稀释涂布平板法，选项中该方法用到的工具有酒精灯、移液管、涂布器、无菌水。(3)不同的菌落形态、大小不同，图示两位同学调查的手机屏幕和马桶按钮上都有多种形态的菌落，即存在多种微生物。两位同学实验操作均正确且完全一致，但实验结果截然不
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