图所示)。如果要得到目标菌，应该选择____________________菌落进一步纯化，选择的依据是
_______________________________________________________________________________。
(3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路、预期结果和结论，即_______________ _______________________________________________________________________________。 (4)该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶(酶E)。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。 ①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加含有酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加__________，三处滴加量相同。
②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明____________________；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明_________________________________________。 答案 (1)W (2)乙 乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W (3)将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源 (4)①缓冲液 ②缓冲液不能降解W 酶E与天然酶降解W的能力相近
解析 (1)要从土壤中分离出能降解含氮有机物W的目标菌，所用选择培养基应以该特定物质W为氮源。(2)题图信息显示，在乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W，若要得到目标菌，应该选择乙菌落进一步纯化。(3)若要通过设计实验确定甲、乙两种细菌能否利用空气中的氮气作为氮源，需将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若某细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源。(4)①实验应遵循单一变量原则，故C处应滴加缓冲液。②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明缓冲液不能降解W；若A、B处形成的透明圈大小相近，说明酶E与天然酶降解W的能力相近。
2．(2019·辽宁葫芦岛一模)在冬季部分城市出现严重雾霾，这与野外焚烧秸秆有一定关系。微生物学家试图通过微生物降解技术使秸秆尽快腐烂，以增加土壤肥力并缓解环境污染。请回答下列有关问题：
(1)专家研制的降解秸秆的“催腐剂”是十余种能分解纤维素的霉菌、细菌和酵母菌的组合。其中____________在细胞结构上与其他两者不同。
(2)纤维素酶是一种复合酶，其中______________可以将纤维素分解为二糖，______________可以将二糖分解为葡萄糖。
(3)微生物学家为从发黑的树干上分离出有分解纤维素能力的高产菌株而制备了选择培养基，将菌液进行一系列____________，并涂布到选择培养基上，从而得到单个菌落，再采用
__________法进行鉴定，得到下图所示菌落。那么，图中降解纤维素能力最强的菌株是______________(填图中序号)。
(4)为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，其发酵方法有______________和______________两种。
答案 (1)细菌 (2)C1酶、CX酶 葡萄糖苷酶 (3)梯度稀释 刚果红染色 ① (4)液体发酵 固体发酵
解析 (1)霉菌和酵母菌是真菌，属于真核生物，而细菌属于原核生物。细菌在细胞结构上与霉菌和酵母菌不同，细菌无以核膜为界限的细胞核。
(2)纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶等。其中C1酶、CX酶可以将纤维素分解为二糖，葡萄糖苷酶可以将二糖分解为葡萄糖。
(3)微生物学家为从发黑的树干上分离出有分解纤维素能力的高产菌株而制备了选择培养基，将菌液进行一系列梯度稀释，并涂布到选择培养基上从而得到单个菌落，再采用刚果红染色法进行鉴定。当纤维素被纤维素酶分解后，无法与刚果红染色剂形成红色复合物，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。菌落周围的透明圈越大，透明圈直径与菌落直径的比值越大，即被分解的纤维素越多，说明菌株降解纤维素的能力越强。因此，降解纤维素能力最强的是菌株①。
(4)为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，其发酵方法有液体发酵和固体发酵。
3．(2019·甘肃张掖质检)酸奶和泡菜的制作都离不开乳酸菌，请回答下列有关问题： (1)分离纯化乳酸菌的培养基中含蛋白胨，蛋白胨提供的主要营养有_____________________； 培养基灭菌常采用____________法；灭菌的标准是_____________________________________ _______________________________________________________________________________。 (2)培养乳酸菌一段时间后，培养基中的pH会下降，原因是______________________________ _______________________________________________________________________________。 (3)家庭制作泡菜时，一般需要配制泡菜盐水，但会因其含盐量过高而影响口感。直接接种乳酸菌制作泡菜时，产生的大量乳酸能够____________，因此可以采用低盐工艺制作泡菜，从而大幅降低泡菜的含盐量。下图中能正确表示泡菜中亚硝酸盐含量随发酵时间变化的曲线是__________。
(4)乳酸菌活菌数是衡量酸奶营养价值的一个重要指标，为检测某酸奶中乳酸菌的含量，取不同稀释度的样品各1mL涂布到固体培养基上，在适宜条件下培养一段时间，统计得到10、10、10三个稀释度的培养基上的平均菌落数依次为433个、76个、8个，据此估算，每毫升样品中的乳酸菌数约为____________个，接种乳酸菌所用的工具是____________。 答案 (1)碳源、氮源和维生素 高压蒸汽灭菌 杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子 (2)乳酸菌通过无氧呼吸产生的乳酸进入了培养基 (3)抑制杂菌生长 B (4)7.6×10 涂布器
解析 (1)蛋白胨可以为微生物的生长提供碳源、氮源和维生素；培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌；灭菌的标准是杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 (2)乳酸菌无氧呼吸产生的乳酸进入培养基，会导致培养基的pH下降。
(3)在泡菜制作的过程中，加入一定的食盐可以抑制杂菌的生长，而乳酸菌无氧呼吸产生的大量乳酸进入培养基，也能抑制其他杂菌的生长，因此可以采用低盐工艺制作泡菜，从而大幅降低泡菜的含盐量。
(4)微生物计数时，应该采用30～300菌落数的平板，因此符合要求的菌落数为76个，则其稀释的倍数为10，因此每毫升样品中的乳酸菌数约为7.6×10个；在稀释涂布平板法中，接种乳酸菌的工具是涂布器。
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