Gateway重组系统快速构建花生条纹病毒cp基因反向重复序列载体

Gateway重组系统快速构建花生条纹病毒cp基因反向重

复序列载体

晏立英;许泽永;陈坤荣;Rob Goldbach;Marcel Prins

【期刊名称】《农业生物技术学报》 【年(卷),期】2007(015)002

【摘要】Gateway重组系统是Invitrogen公司推出一种新的克隆策略。鉴于一般用于农杆菌转化植物的质粒比较大，采用常规的酶切和连接的克隆策略耗时、费力，Gaytewayw重组系统为大载体的操作提供了一种快速和可靠的手段。该系统利用噬菌体转染细菌后整合细菌DNA的位点特异性重组策略（Landy，1989），重组过程是保守位点特异性DNA链的切割和重接，整个过程中没有DNA的合成。应用Gateway重组系统构建植物反向重复序列表达载体包括两个重组过程：第一，BP重组：目的片段重组至入门载体（Entry clone）；第二，LR重组，目的片段自入门载体重组至植物表达载体。本实验室拟利用这一系统构建花生条纹病毒（PStV）红安株系的cp反向重复序列载体，进行烟草转化，期望获得抗性的转基因植株。 【总页数】2页(356-357)

【关键词】花生条纹病毒;cp;Gateway;反向重复序列载体 【作者】晏立英;许泽永;陈坤荣;Rob Goldbach;Marcel Prins

【作者单位】中国农业科学院油料作物研究所油料作物遗传改良农业部重点实验

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Virology,Wageningen

University,Netherlands;中国农业科学院油料作物研究所油料作物遗传改良农业部重点实验室,武汉,430062;中国农业科学院油料作物研究所油料作物遗传改