一、药物分析方法学的建立
1、 标准曲线的绘制：取标准品10mg（实际称取量为9.5mg），加入10ml 容量瓶中，以甲
醇为稀释剂，定容至刻度，定容后即为1mg/mL的标准品溶液。从中取10、25、50、100uL，以甲醇为稀释剂，分别定容至10mL，HPLC测定含量（色谱条件在后面叙述），然后得到线性回归方程。由曲线可知，在0.95~9.5ug/mL范围内，线性关系良好，且吸收无干
扰。
600500y = 52.14x - 16.867R = 0.99982Peak area40030020010000246810
Flavopiridol Concentration (ug/mL)图1 标准曲线
2、 HPLC色谱条件：流动相为A: Water (0.05% TFA)：B: Acetonitrile=7:3;流速为1mL/min;
检测波长为264nm;进样量为20uL；最大压力200bar;柱温为室温。 3、 HPLC测定图谱
a
VWD1 A, 波长=264 nm (DEF_LC 2012-04-12 09-48-17\\027-0701.D) 5.229mAU 250标准品 20015010050001234567min
b
VWD1 A, 波长=264 nm (DEF_LC 2012-06-05 11-31-38\\033-0301.D) 1.295mAU 43.532.521.510.50PLGA微球 5.45701234567min c
VWD1 A, 波长=264 nm (DEF_LC 2012-06-05 11-31-38\\031-0101.D) 1.497 1.786mAU 6空白 54321001234567min 图2 HPLC色谱图:a)为Flavopiridol标准品的图谱;b)为Flavopiridol的PLGA微球的图谱;c)
为空白PLGA微球的图谱
由图谱可知，在Flavopiridol的出峰时间处，无空白干扰。
二、药物的PLGA微球制备
1、 配制PVA17-88的水溶液（1%）；
2、 取100mgPLGA（LA/GA=50/50,分子量5.5万），溶于1mL的氯仿中；另取10mg药物，
加入此氯仿中，加入10uL三乙胺，静置10min，观察是否溶解，若不溶解继续加5uL即可。
3、 在1000rpm不停搅拌下，取上述氯仿溶液，逐滴加于含PVA17-88的水溶液中，水溶液
的体积是氯仿体积的25倍，加完后，高速（7000rpm）均质15s。转移至通风橱中，继续搅拌（600rpm）2min后，补加等体积蒸馏水，继续搅拌4h。
4、 待氯仿挥发完后，取溶液高速离心（15000rpm，温度4度）10min，加适量蒸馏水分散
后，冻干。
三、制剂的表征
1、粒径
取5.8mg制剂溶于5mL氯仿中，水浴超声使分散均匀，然后测定粒径。
指标
Z-AVERAGE SIZE(nm)
1080
PEAK(nm)
867
PDI 0.063
2、含量测定
称取制剂11.5mg，置于10mL容量瓶中，以氯仿定容至刻度，HPLC测定含量。计算得知，此溶液浓度为32.80ug/mL，载药量为2.85%。 3、释放
准确称量制剂10mg，以1mLpH7.4的PBS溶液分散后转移至透析袋中。然后将透析袋置于含40mLpH7.4的PBS溶液(含0.1%的Tween-80)的离心管中，恒温振荡（37度，50rpm）。取样时间点为2h,4h,6h,8h,12h,24h,48h,72h。得到释放曲线（三天就已经释放完全，用乙基纤维素包衣时并没有很明显的延缓释放的作用；现在正在考虑用丙烯酸树脂包衣，实验正在进行中）。
1009080706050403020100010203040时间/h50607080释放率%
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