1.2基因工程的基本操作程序习题

习题：§1.2基因工程的基本操作程序 备课时间：2月25日 姓名： 班级： 小组： 1．下列关于cDNA文库和基因组文库的说法中，不正确的是( )

A．cDNA文库中只含有某种生物的部分基因，基因组文库中含有某种生物的全部基因 B．如果某种生物的cDNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同，则这两个基因的结构也完全相同

C．cDNA文库中的基因都没有启动子

D．一种生物的cDNA文库可以有许多种，但基因组文库只有一种

2．限制酶Mun Ⅰ和限制酶EcoR Ⅰ的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。

下图表示四种质粒和目的基因，其中，箭头所指部位为酶的识别位点，质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因运载体的质粒是( A )

3．下图是将人的生长激素基因导入细菌D细胞内，产生“工程菌”的示意图。所用的载体为质粒

A。若已知细菌D细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌后，其上的基因能得到表达。能表明目的基因已与载体结合，并被导入受体细胞的结果是( )

A．在含氨苄青霉素的培养基和含四环素的培养基上均能生长繁殖的细菌

B．在含氨苄青霉素的培养基和含四环素的培养基上都不能生长繁殖的细菌

C．在含氨苄青霉素的培养基上能生长繁殖，但在含四环素的培养基上不能生长繁殖的细菌 D．在含氨苄青霉素的培养基上不能生长繁殖，但在含四环素的培养基上能生长繁殖的细菌 4．将一个目的基因放入PCR扩增仪中,其他条件都具备的条件下循环30次,合成的目的基因个数 为( )。

A.30 B.60 C.229 D.230

5．人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个抗生素抗性基因,该抗性基因的主要作用是( )。

A.提高受体细胞在自然环境中的耐药性 B.有利于对目的基因是否成功导入进行检测 C.增加质粒分子的相对分子质量 D.便于与外源基因连接

6．甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法，以下说法中错误的是( )

A．甲方法可建立该细菌的基因组文库 B．乙方法可建立该细菌的cDNA文库

C．甲方法要以脱氧核苷酸为原料 D．乙方法需要逆转录酶参与 7．我国科学工作者培育的转基因抗虫棉，其抗虫基因来源于( )

A．苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因 B．棉铃虫变异形成的致死基因 C．寄生在棉铃虫体内的线虫基因 D．普通棉的突变基因

8．下图是获得抗虫棉的技术流程示意图。卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下列叙述正确的是( )

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A．构建重组质粒过程中需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶

B．愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株

C．卡那霉素抗性基因(kanr)中有该过程所利用的限制性核酸内切酶的识别位点 D．抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传

9．以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图。据图分析，下列说法正确的是( )

A．催化①过程的酶是RNA聚合酶 B．④过程发生的变化是引物与单链

DNA结合 C．催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高温

D．如果RNA单链中A与U之和占该链碱基含量的40%，则一个双链DNA中，A与U之和 也占该DNA碱基含量的40%

10．下图表示细胞膜上乙酰胆碱(一种神经递质)受体基因的克隆技术操作过程，下列相关分析中

正确的是 ( )

A．获得该mRNA的最佳材料是受精卵

B．构建基因表达载体最可能使用的载体是大肠杆菌 C．完成过程①②必不可少的酶分别是逆转录酶、DNA 聚合酶

D．探针筛选的目的是淘汰被感染的细菌，获得未被感 染的细菌

11．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是( )

A．人工合成基因 B．制备重组DNA分子 C．把目的基因导入受体细胞 D．目的基因的检测和表达 12．采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但是，人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。以下有关叙述，正确的是( )

A．如果人凝血因子基因的核苷酸序列已知，可用人工合成的方法获得该目的基因 B．人体细胞中凝血因子基因进入羊受精卵细胞后，其传递和表达不再遵循中心法则 C．在该转基因羊体内，人凝血因子基因存在于乳腺细胞中，而不存在于其他体细胞中 D．人凝血因子基因开始转录后，DNA聚合酶以DNA分子的一条链为模板合成mRNA 13．科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中，在医学研究及相关疾病治疗方面都具有重要意义。下列有关叙述错误的是( )

A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞具有全能性 B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达

C．人的生长激素基因能在小鼠细胞内表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用 D．转基因小鼠的肝细胞含有人的生长激素基因

14．两个核酸片段在适宜的条件下，经X酶的作用，发生下述变化，则X酶是

A. DNA连接酶 B．RNA聚合酶 C．DNA聚合酶 D．限制酶

15．科学家通过基因工程的方法，使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白，此过程不涉及

A．DNA按照碱基互补配对原则自我复制 B．DNA以其中一条链为模板合成RNA C．RNA以自身为模板自我复制 D．按照RNA密码子的排列顺序合成蛋白质 16．细胞内合成DNA连接酶的场所是 （ ）

A．细胞核 B．核区 C．核糖体 D．内质网

17．某科学工作者把兔子的血红蛋白的信使RNA加入到大肠杆菌的提取液中，在这个细胞的合成系统

中能合成兔子的血红蛋白，这个事实说明（ ）

A．蛋白质合成是在核糖体上进行的 B．各种生物共用一套遗传密码 C．兔子和大肠杆菌的基因发生了重组 D．兔子的基因发生了突变 18．能够使植物体表达动物蛋白的育种方法是 （ ）

A．单倍体育种 B．杂交育种 C．基因工程育种 D．多倍体育种

答题卡 姓名： 班级：

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19．(2012·全国新课标)根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有______________和______________。 (2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：

AATTC……G

G……CTTAA

为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是_____________________________________________________。

(3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即 __________DNA连接酶和__________DNA连接酶。

(4)反转录作用的模板是_________________，产物是________________。 若要在体外获得大量反转录产物，常采用__________________技术。 (5)基因工程中除质粒外，__________和__________也可作为运载体。

(6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是___________________________________________________________________________________。

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答案：(1)平末端和黏性末端 (2)切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同 (3)T4 E·coli (4)mRNA 单链DNA PCR(聚合酶链式反应) (5)动植物病毒 λ噬菌体的衍生物 (6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱

12. [2013·北京师大附中质量检测](13分)棉铃虫是一种危害棉花的害虫。我国科学工作者发现一种生活在棉铃虫消化道内的苏云金杆菌能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死，而这种毒蛋白对人畜无害。通过基因工程方法，科学家采用花粉管通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并成功表达，棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊，进而导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚细胞，最终形成含有目的基因的种胚。此种方法的优点是操作简便，省去了组培的复杂过程。

(1)利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞，此过程是基因操作的基本步骤中的第三步，即________。此前一步要把目的基因整合到Ti质粒的T－DNA上，目的是为了________________。如果我们已知毒蛋白的氨基酸序列，可以采用________的方法获取毒蛋白基因。

(2)基因工程的工具酶可以将目的基因切下并连接到运载体上。限制酶可以识别特定的DNA序列，并切断________键。下列所示的黏性末端是由________种限制酶作用产生的。

(3)用标记的特异性抗体可以直接检测毒蛋白，这种检测方法称为________________。也可在宏观性状水平检测该目的基因是否表达，方法是____________________________________________。已知转基

因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞______________________________。

答案：将重组DNA导入受体细胞 Ti质粒能将目的基因整合到棉花染色体的DNA上 人工法化学合成目的基因

(2)磷酸二酯键 4

(3)抗原－抗体杂交 让害虫吃棉花，观察害虫的生存状态 表面无特异性受体

7.(预测题)科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—，据图回答：

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答案：(1)(用逆转录等方法进行)人工合成 (2)限制酶 DNA连接酶 (3)标记基因 (4)转化作用

(1)过程①表示的是采取___________的方法来获取目的基因。

(2)根据图示分析，在构建基因表达载体过程中，应用限制酶___________切割质粒，用限制酶___________切割目的基因。用限制酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端通过___________原则进行连接。

(3)人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为____________________。写出目的基因导入细菌中表达的过程_________________________________。

(4)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长，说明大肠杆菌B已导入了______________________，反之则没有导入。 答案：(1)反转录(人工合成) (2)Ⅰ Ⅱ 碱基互补配对 (3)共用一套密码子

生长激素基因???转录?mRNA???翻译?生长激素

(4)普通质粒或重组质粒

10．(11分)在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值。右图所示是获得转基因莴苣的技术流程，请据图回答下列问题：

(1)获取目的基因的主要途径包括从自然界已有的物种中分离和________。 (2)①过程需要的酶有________、________。

(3)重组质粒除了带有抗冻蛋白基因afp以外，还必须含有启动子、终止子和________，这样才能构成一个完整的基因表达载体。

(4)如果受体细胞C1是土壤农杆菌，则将目的基因导入它的目的是利用农杆菌的________，使目的基因进入受体细胞C2，并将其插入到受体细胞C2中________上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达，形成转基因莴苣。经②过程获得的转基因莴苣中的目的基因是否表达，在分子水平上可用________法进行检测，如果出现杂交带，说明目的基因已经表达蛋白质产品，转基因莴苣培育成功。

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染色体DNA 抗原—抗体杂交

【课后反思】本课时你有什么心得或是不明白的地方？ 把你的问题写在下面，让我们一起讨论。

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