中药抗氧化的作用机理及评价方法研究进展

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中药抗氧化的作用机理及评价方法研究

进展

（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）

作者：李秋红，李廷利，黄莉莉，李飞

【摘要】 综述了中药抗氧化作用的可能机理和中药抗氧化作用的评价方法；重点介绍了二苯代苦味酰基自由基(DPPH)法、硫代巴比妥酸（TBA）法、Fe3+还原/抗氧化能力（FRAP）法和生物化学发光法4种目前常用的中药抗氧化作用评价方法及采用这些方法所取得的研究结果。

【关键词】 中药； 抗氧化作用； 机理； 评价方法

Abstract:This article overviews the possible mechanism of antioxidation and the evaluation method of Chinese medicine;Four kinds of frequently used evauation methods for Chinese medicine at present are introduced mainly in this article,including

DPPH,TBA,FRAP

and

biochemilemine

scence.Some research results using these methods are also introduced.

Key words:Chinese medicine; Antioxident activity;

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Mechanism; Evaluation method

衰老的自由基(free radical)学说是英国的Harman于1956年最早提出的，该学说认为自由基攻击生命大分子造成组织损伤，是引起机体衰老的根本原因，也是诱发肿瘤等恶性疾病的重要原因［1］。近年来，新的抗氧化机制不断被发现，人们越来越趋向于应用天然抗氧化剂，我国有丰富的中草药资源，它们的药效和安全性比较明确。许多学者认为某些中草药的疗效与其抗氧化作用密切相关。已发现的植物药抗氧化成分有黄酮类、皂苷类、多糖类、有机酸类、萜烯等，这些物质通过清除人体内自由基，还原氧化物质，从而达到保护机体的作用［2］。因此，从中草药中筛选具有抗氧化和清除自由基活性的物质，对食品和医药工业均有重要意义，可为今后系统研究植物药抗氧化活性奠定基础。

1 中药抗氧化作用的可能机理

目前认为中药成分对机体氧化损伤的保护作用主要包括以下几方面:

1.1 直接清除活性氧自由基自由基又叫游离基,活性氧自由基是一些处于激发态的含氧基团,如超氧阴离子自由基、羟基自由基、烷氧基自由基等。·ＯＨ是化学性质最活泼的活性氧，它带有一个不成对电子，是对人体毒性最大的自由基，它可以与活细胞中的任何分子发生反应而造成损害，而且反应速度极快。Ｏ-2·是自由基引起机体中毒的主要原因，可使核酸链断裂、多糖解聚和不饱和脂肪酸过氧化，进而造成膜损伤、线粒体氧化磷酸化等影响。目前制备超氧阴离子自

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由基的经典方法是邻苯三酚自氧化法。如陈玫等［3］采用连苯三酚自氧化法,研究浙贝母、茵陈等8种中药不同提取物的抗氧化活性。结果表明,其中7种中药都可抑制连苯三酚自氧化,清除超氧阴离子自由基。

1.2 增强抗氧化酶活性细胞在生命活动过程内不断地产生自由基，机体的抗氧化酶通过一系列的催化反应将其转化为O2和CO2。细胞中的主要抗氧化酶是超氧化物歧化酶（SOD），谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）。SOD是含有Cu，Zn，Mn，Fe等金属离子，是体内超氧阴离子的主要清除者，将其催化分解为H2O2，H2O2也具有氧化损伤作用，通过过氧化氢酶将其转化为O2和H2O。同时H2O2也可通过GSH-Px的催化和还原型谷胱甘肽（GSH）反应生成H2O,同时生成还原型谷胱甘肽［4］。如槲皮素能减少胰岛β细胞的氧化损伤，同时还能恢复Fe2+致肾细胞损伤动物的SOD， GSH-Px和过氧化氢酶的活力［5］。李波等研究表明杨梅素芸香苷对氧化损伤性原代培养大鼠肝细胞具有明显保护作用，其保护作用机理是直接清除氧自由基，增加原代培养肝细胞内抗氧化酶SOD和GSH-Px的活力。 1.3 抗脂质过氧化，维持细胞膜稳定性细胞中自由基对细胞的直接损伤作用主要是攻击细胞膜上的脂质，自由基先和细胞膜上的磷脂或低密度脂蛋白（LDL）的不饱和脂肪酸反应，该反应产物又攻击附近的不饱和脂肪酸，最终导致链式反应的产生。过氧化程度多以其最终产物中丙二醛（MDA）为评价指标［6］。近来有研究认为，部分黄酮类化合物以氢键形式与细胞膜结合，保护细胞膜上的不饱和键不与

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自由基接触，抗脂质过氧化［7］。

1.4 减少DNA损伤自由基学说认为，过剩的自由基可以攻击DNA，引起DNA损伤，从而引发多种疾病。对中药抗氧化作用的研究目前在某些方面已深入到 DNA分子水平［8］。

1.5 对氧化酶系活力及表达的影响如对黄嘌呤氧化酶（XO）的影响。XO可将黄嘌呤催化生成尿酸盐，同时产生超氧阴离子。该过程是缺血/再灌注损伤的一个非常重要的途径。在机体正常生理状态下，该酶以黄嘌呤脱氢酶形式存在，在机体处于缺血状态时，黄嘌呤脱氢酶转化为XO，当缺血组织再灌注时，XO催化产生超氧阴离子，导致氧化损伤。因此黄嘌呤氧化酶的含量可作为抗氧化研究的指标成分（2005浙江大学硕士论文《八种中药豆类荚果乙醇提取物及所含杨梅树芸香苷抗氧化作用研究》）。

另外,对一氧化氮（NO）及一氧化氮合酶的影响。正常生理状态下，NO在舒张血管内皮、维持机体血压平衡方面起重要作用。但高浓度却能和活性氧反应后产生氧化能力更高的亚硝基自由基，同时NO也可看作是一种自由基，导致细胞氧化损伤。在缺血再灌注损伤时，NO主要合成酶，诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性增加，大量NO产生而导致氧化损伤形成［9］。研究发现许多黄酮类化合物包括槲皮素、姜黄素在缺血再灌注损伤时可抑制iNOS的活性，而起到抗氧化作用［10］。

2 中药抗氧化活性的评价方法

中药抗氧化活性的评价方法随着科学技术的发展和设备的更新而不