11、共价结合：是将植物细胞和固定载体通过共价键结合进行细胞固定的技术 二、判断题
1、生长偶联型的次生代谢物是在稳定期积累。（x ）
2、细胞固定化培养方法是一种最接近自然状态的细胞培养方法 。（√ ） 3、化学消泡的效果不如机械消泡。（ X ）
4、剪切力能使细胞破损，因此，大规模细胞培养中剪切力越小越好。（ X ） 5、多数的次生代谢物位于细胞内部，提取前需先进行植物细胞破碎。（√ ） 6、萃取分离是通过改变某些条件或添加某种物质使次级代谢物在溶液中的溶解度降低，从溶液中沉淀析出，而与其他杂质分离的过程。（X ）
7、浓缩是指从低浓度的溶液中除去部分水分或其他溶剂而成为高浓度溶液的过程。（ √） 三、问答题
1、利用植物细胞培养技术生产次生代谢物的优点？
1、代谢物生产是在人工控制的条件下进行的，不受季节和地域限制 2、减少占用耕地，保护资源和环境 3、在无菌条件下进行，排除病菌和害虫干扰 4、快速、高效 2、简述利用植物细胞培养技术生产次生代谢物方法？ 3、简述植物次生代谢物分离和纯化的步骤
细胞破碎 次生代谢物的提取 次生代谢物的分离 浓缩与干燥 第十六章 植物种质资源的超低温保存 一、名词解释 1、超低温
2、超低温保存: 冰冻保护剂的保护下，将生物材料在超低温 （-80℃以下）下保存，最大限度地抑制生理代谢活动，降低劣变频率，达到长期保存种质资源的目的方法。
3、低温保存: 通过降低温度抑制中间繁殖体的生长而进行种质保存的方法成为 4、快速冰冻法: 指将材料从0℃或其他预处理温度直接投入液氮中保存。 5、玻璃化法: 是指样品在添加冰冻保护剂后，快速投入液氮中、玻璃化冰存 6、干燥法 7、预培养法 8、慢速冰冻法 二、判断题
1、种质超低温保存成功的关键是降温冰冻过程中避免细胞内脱水。（X ） 2、玻璃化法保存的材料宜采用慢速化冻，以减少次生结冰对细胞的伤害。（ X ） 3、经过冬天低温锻炼的植物材料可以用快速冰冻法。（√ ） 4、甘油是非渗透冰冻保护剂。（X ）
5、控制细胞内外水的冻结状态是细胞冰冻保存技术的关键。（√ ） 三、问答题
1、植物种质资源保存的方式有哪些？与传统方式相比较，离体保存的优点是什么？ 1)原地保存
2)异地保存:种植保存;贮藏保存; 基因文库保存;离体保存 优点：（1）很高的增殖率；
（2）无菌和无病虫环境，不受自然灾害的影响；
（3）保存的材料体积小，占用空间小，节省大量的人力、物力及财力；
（4）不存在田间活体保存存在的像异花授粉、嫁接繁殖而导致的遗传蚀变现象； （5）有利于国际间的种质交流及濒危物种的抢救和快繁。 2、阐述植物超低温保存的方法及影响因素。
1、材料类型：
植物的基因型、抗冻性、材料年龄和生理状态 2、预处理和低温锻炼 脱水方法
3、冰冻保护剂（cryoprotective agent，CPA）的种类： 一类是能穿透细胞的低分子量化合物如二甲基亚砜（dimethylsulphoxide，DMSO）和各种糖类等； 另一类是不能穿透细胞的高分子量化合物如聚乙烯吡咯烷酮（PVP）和聚乙二醇（PEG）等。 4、降温速度
预冻法； 慢速冷冻法 快速冷冻法 5、解冻方式
缓慢解冻时，细胞内容易发生剧烈的再结冰，快速解冻（37-40 ℃ ）能防止降温过程中形成的晶核对细胞的损伤 6）、恢复生长培养基种类、生长调节剂组分和条件 3、缓慢生长保存方法的概念及方法
4、离体保存种质的遗传稳定性及其检测方法 第十七章 植物遗传转化 一、名词解释
1、遗传转化：指利用重组DNA技术，将外源基因导入植物细胞，外源基因与受体植物染色体整合并稳定遗传和表达的过程或技术
2、遗传转化受体系统：是指用于转化的外植体通过组织培养途径或其他非组织培养途径，能高效、稳定地再生无性系，并接受外源基因的整合，对用于转化选择的抗生素敏感的系统
3、中间繁殖体受体系统：以植物组织培养过程中产生的中间繁殖体为转基因的受体，然后通过再分化获得再生植株的受体系统
4、原生质体受体系统：以原生质体为受体材料，然后通过原生质体培 养获得再生植株的受体系统 5、组织器官受体系统：组织器官受体系统是 指以植物的组织器官为转基因的受体，然后通过脱分化和再分化获得再生植株的受体系统。
6、抑菌性抗生素：在农杆菌介导的遗传转化中用来抑制农杆菌生长的抗生素。 7、选择性抗生素：用来对转化子进行早期筛选的抗生素 二、判断题
1、不同种植物对农杆菌敏感性差异大，同一种植物敏感性相同。（X ） 2、遗传转化受体系统的建立是基因转移的基础。（√ ） 3、Vir基因的活化是农杆菌Ti质粒转移的先决条件。（√ ） 4、选择性抗生素浓度越高，假转化体比例越低，选择效果越好。（ x ） 5、原生质体受体系统是最好和应用最广的遗传转化受体系统。（ X ）中间繁殖体系统
三、问答题
1、什么叫遗传转化？它有什么特点和应用前景？ 2、基因克隆的方法有那些？其原理是什么？ 3、比较分析各植物遗传转化受体系统及其特点。
组织器官受体系统：1.受体来源广泛，容易获得；2. 适合于各种遗传转化方法，特别是农杆菌介导法；3. 适应于各种能够通过组织培养获得再生植株的植物；4. 获得再生植株的周期长 叶盘法、生殖细胞受体系统
中间繁殖体受体系统●特点：最理想的基因转化受体体统
获得再生植株周期短2）快速简单方便3）适合多种转化方法4）接受外源基因能力强转化率高 原生质体受体系统 1）转化率高2)获得再生植株无性系变异多，转化的外源基因稳定性差
出现的嵌合体少4）技术难度大 生殖细胞受体：
A、利用单倍体遗传转化受体系统进行基因转化，避免了基因显隐性的影响，有利于基因的充分表达，通过染色体加倍后即可使基因纯合，缩短了目的基因纯合的时间，加快了转基因育种过程； B、花粉管通道法和子房注射法由于操作简单，受实验室条件限制较小，已成为目前国内常用的转基因方法之一，同时，花粉管通道法是利用植物自身的有性生殖过程，有利于将现代的分子育种与常规育种紧密结合，也有利于目的基因在转基因后代中的稳定表达；
C、受体取材受到季节的影响大。利用花粉管通道法等进行遗传转化只能在短暂的开花期内进行，这是限制该系统应用的主要原因之一。
4、转基因的方法有那些？比较分析这些方法的优缺点。 5、转基因检测的的方法有那些？其原理是什么？
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