2019秋+金版学案设计+生物·选修1(人教版)练习:专题5课题3血红蛋白的提取和分离+Word
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(1)提取DNA和提取血红蛋白,猪血都是适宜材料吗?___________________。原因是_______________________________
_____________________________________________________。 (2)无论是提取DNA还是提取血红蛋白,都需要先用________对红细胞进行洗涤,其目的是________________________。
(3)电泳是分离鉴定蛋白质的常规方法。下图为几种蛋白质通过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳的图谱,据图,你认为相对分子质量最大的蛋白质是________,依此推理该样品在凝胶色谱法中最后流出的蛋白质应该是________________。
解析:(1)猪血是提取血红蛋白的适宜材料,不是提取DNA的适宜材料,因为猪成熟的红细胞没有细胞核,提取DNA可用鸡血。
(2)提取DNA和血红蛋白,需要先用生理盐水对红细胞进行洗涤,其目的是去除血浆蛋白(杂蛋白)。
(3)图为SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳的图谱,γ球蛋白离点样处最近,说明相对分子质量最大,清蛋白离点样处最远,说明相对分子质量最小;在凝胶色谱法中相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶颗粒内部的通道,路程长,移动速度慢;而相对分子质量大的蛋白质无法进入凝胶颗粒内部,路程较短,移动速度快,所以最后流出的蛋白质
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应该是相对分子质量最小的清蛋白。
答案:(1)猪血是提取血红蛋白的适宜材料,不是提取DNA的适宜材料 猪成熟的红细胞没有细胞核
(2)生理盐水 去除血浆蛋白(杂蛋白) (3)γ球蛋白 清蛋白
9.如今人类已跨入了蛋白质时代,对蛋白质的研究和应用,首先需要获得高纯度的蛋白质。请回答下列问题:
(1)蛋白质的提取和分离一般分为四步:_________、_______、__________和纯度鉴定。
(2)如果要从红细胞中分离出血红蛋白,实验前取新鲜血液要在采血容器中预先加入柠檬酸钠,这样做的目的是________________。
(3)血红蛋白的提取又可以细分为:红细胞的洗涤、_________、分离血红蛋白溶液和__________。其中分离血红蛋白溶液时需要用到__________(仪器)分离出下层红色透明液体。
(4)装填凝胶色谱柱时,要注意色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡必须重新装。这是因为
_____________________________________________________。 (5)欲探究色谱柱的高度是否影响蛋白质分离的因素,应把______________________作为自变量,把_______________________
__________作为无关变量,把________________作为因变量。 答案:(1)样品处理 粗分离 纯化 (2)防止血液凝固
(3)血红蛋白的释放 透析 分液漏斗
(4)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果 (5)色谱柱的高度变化 缓冲液的用量和pH、样品的用量、温度等
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因素 大小不同的蛋白质分子的间距
10.红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的。我们可以选用猪、牛、羊等动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白,请回答下列有关问题:
(1)实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。
①其中加入柠檬酸钠的目的是____________________________ _____________________________________________________。 ②此过程即是样品处理,它应包括红细胞洗涤、___________、分离血红蛋白溶液。
③洗涤红细胞的目的是__________________________________ _____________________________________________________。 (2)收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析,这就是样品的粗分离。 ①透析的目的是_______________________________________。 ②透析的原理是______________________________________ _____________________________________________________。 (3)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化,最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。其中通过凝胶色谱法将样品纯化的目的是____________________________________________________
_____________________________________________________。 解析:(1)柠檬酸钠是一种抗凝剂,加入柠檬酸钠可以防止血液凝固;样品处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液;洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白,以利于后续步骤的分离纯化。(2)透析袋一般是用硝酸纤维素制成的,透析袋能使小分子自由进出,而
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将大分子保留在袋内,透析可以去除样品中分子量较小的杂质或用于更换样品的缓冲液。(3)凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的方法,因此,通过用凝胶色谱法去除相对分子质量较大的杂质。
答案:(1)①防止血液凝固 ②血红蛋白的释放 ③去除杂蛋白 (2)①去除相对分子质量较小的杂质
②透析袋能使小分子自由进出,而大分子则保留在袋内 (3)通过凝胶色谱法去除相对分子质量较大的杂质
11.血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中O2或CO2的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题:
(1)将实验流程补充完整。
(2)凝胶色谱法的基本原理是根据________________________分离蛋白质。
(3)洗涤红细胞的目的是去除________,洗涤干净的标志是 _____________________________________________________。 (4)下面是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加入示意图,正确的加样顺序是________。
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