MicroRNA-222调控HUVECc-kit基因表达及对内皮微粒的影响

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东南大学学报(医学版)　２０１９?Ａｐｒ?３８(２):２８０￣２８６

ＪＳｏｕｔｈｅａｓｔＵｎｉｖ(ＭｅｄＳｃｉＥｄｉ)

??论　　著??

ＭｉｃｒｏＲＮＡ￣２２２调控ＨＵＶＥＣｃ￣ｋｉｔ基因表达及对内皮微粒的影响

秦薇１?刘庆芝２?张华坤３?高洁１?王萍３

(南方医科大学附属深圳市妇幼保健院１.产科?２.生殖综合门诊?３.生殖中心?广东深圳　５１８０００)

[摘要]目的:探讨微小ＲＮＡ(ｍｉＲ)￣２２２及特异性ｍｉＲ￣２２２抑制剂对人脐静脉内皮细胞(ＨＵＶＥＣ)ｃ￣ｋｉｔ基因的ｍＲＮＡ和蛋白表达、内皮微粒的影响?方法:设计ｍｉＲ￣２２２￣３ｐｍｉｍｉｃ和ｍｉＲ￣２２２￣３ｐｉｎｈｉｂｉｔｏｒ及相应的阴ＰＣＲ)验证转染效率?利用ｑＲＴ￣ＰＣＲ检测ｃ￣ｋｉｔ基因ｍＲＮＡ表达水平?免疫印迹技术分析ｃ￣ｋｉｔ蛋白表达水平?ＣＤ１４４标记内皮微粒?流式细胞仪检测ｍｉＲ￣２２２转染对内皮微粒分泌的影响?结果:与ｍｉｍｉｃｃｏｎｔｒｏｌ转染组相比?转染ｍｉＲ￣２２２￣３ｐｍｉｍｉｃ均显著降低ｃ￣ｋｉｔ基因ｍＲＮＡ和蛋白表达水平?与ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｃｏｎｔｒｏｌ转染组２２２￣３ｐ表达上调导致内皮微粒分泌增加?ｍｉＲ￣２２２￣３ｐ表达下调导致内皮微粒分泌减少?结论:ｍｉＲ￣２２２表达上调抑制ｃ￣ｋｉｔ基因ｍＲＮＡ的表达?进而抑制蛋白的表达?ｍｉＲ￣２２２表达上调可能通过引起ＨＵＶＥＣ株细胞活化而致内皮微粒分泌增加?进而介导了内皮细胞功能的紊乱?[关键词]ｍｉＲ￣２２２?人脐静脉内皮细胞?ｃ￣ｋｉｔ?内皮微粒ｄｏｉ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１６７１￣６２６４.２０１９.０２.０１３

[中图分类号]Ｒ￣３３　　[文献标识码]Ａ　　[文章编号]１６７１￣６２６４(２０１９)０２￣０２８０￣０７

相比?转染ｍｉＲ￣２２２￣３ｐｉｎｈｉｂｉｔｏｒ均显著提高ｃ￣ｋｉｔ基因ｍＲＮＡ和蛋白表达水平?流式细胞仪检测显示ｍｉＲ￣性对照(ｍｉｍｉｃｃｏｎｔｒｏｌ和ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｃｏｎｔｒｏｌ)?分别转染ＨＵＶＥＣ?通过实时荧光定量聚合酶链式反应技术(ｑＲＴ￣

ＴｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ￣２２２ｏｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｃ￣ｋｉｔａｎｄｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｎｈｕｍａｎｕｍｂｉｌｉｃａｌｖｅｉｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ

ＱＩＮＷｅｉ１?ＬＩＵＱｉｎｇｚｈｉ２?ＺＨＡＮＧＨｕａｋｕｎ３?ＧＡＯＪｉｅ１?ＷＡＮＧＰｉｎｇ３

(１.ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｂｓｔｅｔｒｉｃｓ?２.ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅＲｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅＣｌｉｎｉｃ?３.ＲｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅＣｅｎｔｅｒ?ＳｈｅｎｚｈｅｎＭａｔｅｒｎａｌａｎｄＣｈｉｌｄＨｅａｌｔｈｃａｒｅＨｏｓｐｉｔａｌＡｆｆｉｌｉａｔｅｄｔｏＳｏｕｔｈｅｒｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ?Ｓｈｅｎｚｈｅｎ５１８０００?Ｃｈｉｎａ)

[Ａｂｓｔｒａｃｔ]Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ:ＴｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｍｉＲ￣２２２ａｎｄｓｐｅｃｉｆｉｃｍｉＲ￣２２２ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｍＲ￣(ＨＵＶＥＣ)ｌｉｎｅ.Ｍｅｔｈｏｄｓ:ＭｉＲ￣２２２￣３ｐｍｉｍｉｃ?ｍｉｍｉｃｎｅｇａｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌ?ｍｉＲ￣２２２￣３ｐｉｎｈｉｂｉｔｏｒａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｏｒｎｅｇａ￣

[收稿日期]２０１８￣０３￣２７　　[修回日期]２０１８￣１２￣０３

ＮＡａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｏｆｃ￣ｋｉｔｇｅｎｅａｎｄｉｔｓｅｆｆｅｃｔｏｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｎｈｕｍａｎｕｍｂｉｌｉｃａｌｖｅｉｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌｗｅｒｅｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄａｎｄｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄｉｎｔｏＨＵＶＥＣｌｉｎｅｖｉａｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎｒｅａｇｅｎｔＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅＴＭ２０００ａｎｄｔｈｅ

[基金项目]深圳市科技计划资助项目(ＪＣＹＪ２０１６０４２７１９１５００４０６?２０１３０２１１５)[通信作者]张华坤　Ｅ￣ｍａｉｌ:ｋｕｎｋｕｎ２１ｃｅｎ＠１６３.ｃｏｍ(２):２８０￣２８６.

[作者简介]秦薇(１９６７)?女?河南南阳人?主任医师?医学博士?Ｅ￣ｍａｉｌ:９１３１０８６３２＠ｑｑ.ｏｍ

[引文格式]秦薇?刘庆芝?张华坤?等.ＭｉｃｒｏＲＮＡ￣２２２调控ＨＵＶＥＣｃ￣ｋｉｔ基因表达及对内皮微粒的影响[Ｊ].东南大学学报(医学版)?２０１９?３８