方法: 取本品,缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中,即生成氧化亚铜的红色沉淀。
2. 杂质的检查:5-羟甲基糠醛
原理:葡萄糖注射液在高温加热灭菌时,易分解产生5-羟甲基糠醛:
利用5-羟甲基糠醛在284nm的波长处有吸收,而葡萄糖无吸收,将样品配制成一定浓度的溶液,在284nm的波长处测定,规定吸收度不得大于0.32来控制5-羟甲基糠醛的量。
方法:精密量取本品适量(约相当于葡萄糖1.0g),置100mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,在284nm的波长处测定,吸收度不得大于0.32。 3. 葡萄糖含量的测定
旋光法(中国药典2005年版二部附录Ⅵ E)
原理: 葡萄糖分子中含不对称碳原子,具有旋光性,在一定条件下,其水溶液的比旋度[α]tD为+52.5°~+53.0°,根据旋光度α与浓度c的比例关系可进行含量
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测定: α=[α]tD·l·c, 式中l为液层厚度(dm),c为溶液的百分浓度(g/mL,按干燥品或无水物计算)。所以: c = α100/[α]tD·l
方法:精密量取本品适量(约相当于葡萄糖10g),置100mL容量瓶中,加氨试液0.2mL(10%或10%以下规格的本品可直接取样测定),用水稀释至刻度,摇匀,静置10分钟,测定旋光度。测定时使用读数至0.01°并经过检定的旋光计,先用水校正零点,再将测定管(长度为1dm)用供试溶液冲洗数次,缓缓注入供试溶液适量(注意勿使发生气泡),置于旋光计内检测读数,记录旋光度,同法操作读取旋光度3次,取3次的平均值作为样品的旋光度。与2.0852相乘,即得100mL供试溶液中含有C6H12O6·H2O的质量(g)。测定后再用水核对零点,若零点变动,应重测。 四、注意事项
1. 旋光仪接通电源后需预热5~20分钟。每次测定前后应用溶剂作空白校正。配制溶液及测定时,均应调节温度至20℃±0.5℃(除另有规定外)。供试溶液应澄清,如显浑浊或含有混悬的小粒,应预先滤过,并弃去初滤液。测定管装样时应注意光路中不应有气泡,使用后应立即用水洗净晾干,切勿用刷子刷,也不能用高温烘烤。
2. 标示量=规格=处方量——表示单位制剂内(例如:每片,每丸、每毫升、每瓶等)所含主药的量。
五、思考题
1. 葡萄糖旋光度法测定含量时,为什么要加氨试液并放置后进行测定? 2. 推算出旋光度法测定葡萄糖含量时的计算系数2.0852
实验二附录
1. 碱性酒石酸铜试液 (1)取硫酸铜结晶6.93g,加水使溶解成100mL。
(2)取酒石酸钾钠结晶34.6g与氢氧化钠10g,加水使溶解成100mL。用时将两液等量混合,即得。 2. 中国药典2005年版二部附录Ⅵ E 旋光度测定法
平面偏振光通过含有某些光学活性的化合物液体或溶液时,能引起旋光现象,使偏振光的平面向左或向右旋转。旋转的度数,称为旋光度。偏振光透过长1dm并
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每1mL中含有旋光性物质1g的溶液,在一定波长与温度下测得的旋光度称为比旋度。测定比旋度(或旋光度)可以区别或检查某些药品的纯杂程度,亦可用以测定含量。
本药典系用钠光谱的D线(589.3nm)测定旋光度,除另有规定外,测定管长度为1dm(如使用其他管长,应进行换算),测定温度为20℃。
测定旋光度时,用读数至0.01°并经过检定的旋光计。将测定管用供试液体或溶液(取固体供试品,按各药品项下的方法制成)冲洗数次,缓缓注入供试液体或溶液适量(注意勿使发生气泡),置于旋光计内检测读数,即得供试液的旋光度。使偏振光向右旋转者(顺时针方向)为右旋,以“+”符号表示;使偏振光向左旋转者(反时针方向)为左旋,以“-”符号表示。用同法读取旋光度3次,取3次的平均数,照下列公式计算, 即得供试品的比旋度。 对液体供试品 ???D? 对固体供试品 ???D?tt?ld
100? lc 式中 [α]为比旋度; D为钠光谱的D线; t为测定时的温度; l为测定管长度, dm; α为测得的旋光度; d为液体的相对密度; c为每100mL溶液中含有被测物质的重量g(按干燥品或无水物计算)。 旋光计的检定,可用标准石英旋光管进行,读数误差应符合规定。
【注意事项】 (1) 每次测定前应以溶剂作空白校正,测定后,再校正1次,以确定在测定时零点有无变动;如第2次校正时发现零点有变动,则应重新测定旋光度。
(2) 配制溶液及测定时,均应调节温度至20℃±0.5℃(或各药品项下规定的温度)。
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(3)供试的液体或固体物质的溶液应不显浑浊或含有混悬的小粒。如有上述情形时, 应预先滤过,并弃去初滤液。
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