则根据三个实验组的数据可计算得出每升土壤溶液中的活菌数为(39+38+37)÷3÷0.1×1 000×100= 3.8×107个。 答案:(1)琼脂
(2)被该除草剂严重污染的土壤 该除草剂 增加目的菌的浓度 (3)接种环 灼烧
(4)稀释涂布平板 3.8×107
4.(15分)胡萝卜素是一种常用的食用色素,可分别从胡萝卜或产生胡萝卜素的微生物中提取获得,流程如下:
(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时,可选用__________或平板划线法接种。 (2)培养酵母菌R时,培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为酵母菌R提供____________和____________。
(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程应控制好温度和________,以防止胡萝卜素分解;萃取过程中宜采用________方式加热以防止温度过高;萃取液浓缩前需进行过滤,其目的是____________。
(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需要用胡萝卜素标准样品作为__________。
【解题指南】解答本题时,需要注意以下两点:
(1)明确酵母菌的培养需要碳源、氮源、生长因子等,糖类物质是重要的碳源之一。
(2)明确胡萝卜素易分解,温度过高、干燥时间过长会造成胡萝卜素分解。 【解析】本题考查微生物的实验室培养、植物有效成分的提取。 (1)接种微生物的方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法。
(2)蔗糖主要提供碳源,也可以作为能源物质,硝酸盐含氮元素,可提供氮源。 (3)温度过高、干燥时间过长会导致胡萝卜素分解;由于萃取剂往往有挥发性,直接加热时挥发出来的有机溶剂遇明火易爆炸,所以萃取时一般采用水浴加热方式;萃取后需将原料中的固体物滤去。
(4)提取出来的胡萝卜素往往不是纯的,用标准样品主要是起对照的作用。 答案:(1)稀释涂布平板法 (2)碳源 氮源
(3)时间 水浴 滤去不溶物 (4)(实验)对照
5.(15分)要从土壤中筛选出相应的分解菌,其实验流程如下,请回答: 世纪金榜导学号14120598 配制土壤溶液→系列稀释→涂布平板与培养→菌落计数 (1)采用________________法时需要将样液进行一系列的梯度稀释,然后接种培养,计数菌落。通常统计的菌落数比活菌的实际数目________。在稀释土壤的过程中,每一步都要在__________旁操作。
(2)对培养基灭菌常用的方法是____________。在接种前需要检测使用的培养基是否被污染,方法是__________________________。
(3)若要筛选出尿素分解菌,配制土壤溶液的土样应从________的土壤________层取样,培养用的培养基应为以________为唯一氮源的选择培养基。 (4)向培养基中加入酚红指示剂,若培养基中存在分解尿素的细菌,其菌落周围会出现________________,这是尿素被分解生成的________使酚红指示剂显色的结果。
【解析】(1)将样液进行一系列梯度稀释后进行的接种方法是涂布平板法,该方法可以对微生物进行计数,由于当两个或多个细菌连在一起时,培养基上观察到的只是一个菌落,因此通常统计的菌落数比活菌的实际数目少。稀释涂布平板法的各步操作均应在酒精灯的火焰旁进行。
(2)对培养基的灭菌通常采用高压蒸汽灭菌法。若要检测使用的培养基是否被污染,通常需要设置空白对照,即将未接种的培养基在37 ℃(或适宜温度或30~37 ℃的某一温度)恒温箱中倒置培养一段时间(或1~2天),观察是否有菌落生成,若无菌落生成,则说明培养基的制作是合格的。
(3)土壤中分解尿素的细菌生活在有机物丰富的土壤表层中,因此若要筛选出尿素分解菌,配制土壤溶液的土样应从有机物丰富的土壤表层取样,培养用的培养基应为以尿素为唯一氮源的选择培养基。
(4)分解尿素的细菌的鉴定是在培养基中添加酚红指示剂,由于分解尿素的细菌能够合成脲酶,脲酶能将培养基中的尿素分解产生氨(NH3),使pH升高,酚红指示剂变红色。
答案:(1)稀释涂布平板 少 酒精灯火焰
(2)高压蒸汽灭菌法 将未接种的培养基在37 ℃(或适宜温度或30~37 ℃的某一温度)恒温箱中倒置培养一段时间(或1~2天),观察是否有菌落生成 (3)有机物丰富 表 尿素
(4)红色 氨(或NH3)
6.(15分)(2018·太原模拟)科学家在深海火山周围的热泉(与地球上早期生命所处的环境类似)中发现大量的硫细菌,从中筛选出能高效产生高温蛋白酶的硫细菌SM06,它通过氧化硫化物过程中释放的能量来同化二氧化碳并进行生长,其筛选过程如图所示。请回答下列问题:
(1)硫细菌SM06的代谢类型为__________________(填“光能自养型”或“化能自养型”);其细胞结构中具有________(填细胞器名称)。
(2)接种前,随机取若干灭菌后的空白培养基培养一段时间,这样做是为了_________________________________________________________________。 (3)获得的菌种若要临时保藏,可将菌种接种到试管的________培养基上,在合适的温度下培养后放入4 ℃的冰箱中保藏;若要长期保存,可以采用___________的方法。
(4)研究热泉生态系统的意义有:______________________________________ (写出两点即可)。
【解析】(1)硫细菌SM06通过氧化硫化物过程中释放的能量来同化二氧化碳,说明其代谢类型为化能自养型;硫细菌属于原核生物,其细胞中只有核糖体一种细胞器。
(2)接种前,随机取若干灭菌后的空白培养基培养一段时间,这样做是为了检测培养基灭菌是否合格。
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