因素主→次 优方案 D>B>A>C D3B3A3C2
水提取法的结果分析：从正交试验得最优方案为D3B3A3C2即提取次数3，提取时间4h，提取温度80度，液料比为6。水浸提法是多糖提取的传统方法，此法操作简便，但由于水作为溶剂难以完全溶出其中的多糖物质，所以需要多次浸提，操作时间长，收率低。
3.4 复合酶提取法结果及分析
首先对提取时间、反应液pH、复合酶配比、提取温度单因素范围的确定。 3.4.1 提取时间范围的确定
每份称取10.0g样品，加入60mL蒸馏水（pH=6.0）和复合酶(配比为1%：1.5% ：1%)在40℃温度条件下恒温一定时间提取。
表13 复合酶提取时间水平实验结果
实验编号 1 2 10 2.09
3 20 2.28
4 30 2.32
5 40 2.36
时间（min） 5 多糖提取率 1.24
图6 提取时间与多糖提取率关系曲线
X-轴为提取时间（min），Y-轴为多糖提取率
21
由图6得：随提取时间变长多糖提取率升高，但是10min后效果不明显，可能是已经分解完毕，多糖大部分已经被提取出。故采取提取时间水平大致为10、20、30min。 3.4.2 反应液pH水平的确定
每份称取10.0g样品，加入60mL蒸馏水（pH梯度）和复合酶(配比为1%：1.5% ：1%)在40℃温度条件下恒温30min。
表14 溶液pH水平的实验结果
实验编号 1 反应液pH 2.0 多糖提取率
0.391
2 3.0 0.752
3 4.0 2.15
4 5.0 2.39
5 6.0 2.26
6 7.0 1.25
图7 反应液pH与多糖提取率关系曲线
X-轴为反应液pH值，Y-轴为多糖提取率
由图7可知，提取率随pH变大先升高然后降低，可能是由于pH的酸碱性直接影响到复合酶的活性，复合酶活性最高的最佳pH为4.0、5.0、6.0故采用最佳反应液水平为pH=4.0、5.0、6.0。 3.4.3 复合酶配比
没有发现任何变化规律，只得到部分散点，通过各种参考资料选用王洪伟确定最佳复合酶比为纤维素酶：果胶酶：木瓜蛋白酶1%：1.5%：1%、0.5%：2.5%：0.5%、
[22]
22
1.5%：0.5%：1.5%。
3.4.4 提取温度水平
每份称取10.0g样品，加入60mL蒸馏水（pH=6.0）和复合酶（配比为1%：1.5% ：1%）在一定温度条件下恒温30min。
表15 提取温度实验结果
实验编号 1 提取温度20 （℃）
多糖提取1.39 率
2 30 2.09
3 40 2.29
4 50 2.19
5 60 1.21
6 70 0.476
图8 提取温度与多糖提取率关系曲线
X-轴为提取温度。Y-轴为多糖提取率
由图8可得：多糖提取率随温度升高先上升后下降，说明温度对复合酶活性的影响较大，由图表显示30、40、50℃时复合酶活性最高，因此，最佳提取温度水平为30、40、50℃。
各称取10.0g样品根据提取时间、反应液pH、复合酶配比、提取温度等，进行L9(34)正交实验，因素水平见表16，正交试验表19。
表16 复合酶提取工艺的正交实验因素水平表
水平
A提取温度
B提取时间
23
因素
C复合酶配比
D pH值
（℃） （min）
1 2 3
30 40 50
10 20 30
（纤维素酶：果胶酶：木瓜蛋白酶） 1%：1.5% ：1% 0.5%：2.5%：
0.5% 1.5%：0.5%：
1.5%
4.0 5.0 6.0
表17 由正交试验得具体试验操作条件
试验编号
提取温度（℃） 提取时间（min） 复合酶配比（纤
pH值
1 2 3 4 5 6 7 8 9
30 40 50 30 40 50 30 40 50
10 10 10 20 20 20 30 30 30
维素酶：果胶
酶：木瓜蛋白
酶） 1.5%：0.5%：
1.5% 1%：1.5% ：1% 0.5%：2.5%：
0.5% 0.5%：2.5%：
0.5% 1.5%：0.5%：
1.5% 1%：1.5% ：1% 1%：1.5% ：1% 0.5%：2.5%：
0.5% 1.5%：0.5%：
1.5%
5.0 4.0 6.0 4.0 6.0 5.0 6.0 5.0 4.0
表18 正交实验结果分析(吸光值测定时稀释100倍)
实验编号 1 2 3 4 5
样品质量（g） 提取液总体积（mL）
10.79 10.04
10.13 10.64 10.12
65 62 66 64 64
24
吸光值 0.393 0.353 0.480 0.635 0.360
多糖质量（g） 多糖提取率（%）
0.3035 0.2577 0.3803 0.4973 0.2722
2.813 2.565 3.771 4.673 2.688
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