实验一 直接滴定法测定食品中还原糖含量
一、目的与要求
1、学习直接滴定法测定还原糖的原理，并掌握其测定的操作技术 2、通过对实验结果的分析，了解影响测定准确性的因素
二、实验原理
将等量的碱性酒石酸铜甲液、乙液混合时，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀立即与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。此络合物与还原糖共热时，二价铜即被还原为一价的氧化亚铜沉淀，氧化亚铜与亚铁氰化钾反应，生成可溶性化合物，达到终点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原成无色，溶液呈淡黄色时为滴定终点。根据还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量，以及测定样品液所消耗的体积，计算还原糖含量。
三、仪器与试剂 1、仪器
酸式滴定管（25mL） ，锥形瓶，电炉，石棉网，容量瓶250ml，移液管，洗耳球，水浴锅，玻璃珠，烧杯，玻璃棒 2、试剂
碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O） 及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释到1000 ml。
碱性酒石酸铜乙液:取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，在加4g亚铁氰化钾，完全溶解后，再用水稀到1000 ml，储存于橡胶塞玻璃瓶内。
葡萄糖标准液：准确称取1.000g干燥至恒量的纯葡萄糖，加水溶解后加入5 ml盐酸，并以水稀释至1000 ml。 雪碧
四、实验步骤 1、样品处理
汽水等含二氧化碳的样品，吸取100 ml试样在水浴上除去二氧化碳后，移入250mL容量瓶中，并用蒸馏水洗涤烧杯，洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混匀后备用。 2、标定碱性酒石酸铜溶液
吸取5.0 mL 碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置于锥形瓶中，加水20 mL, 加玻璃珠2粒，从滴定管中加约9 mL葡萄糖或其他还原糖标准溶液，摇匀，置于电炉上加热至沸，然后保持沸腾时以每2s 1 滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去，显示淡黄色为为终点，记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。 F= c × V
F为还原糖因数，10ml 碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的量, mg;
C为葡萄糖标准溶液的浓度,1.0 mg／ml；V为标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积，ml。 同时平行操作三份，后滴定的葡萄糖或其他还原糖标准溶液的体积应该控制在0.5-1.0 mL,否则增加预加量，重新滴定。 3、样品溶液预滴定
吸取5.0 mL 碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置于锥形瓶中，加水20 mL, 加玻璃珠2粒，在电炉上加热至沸，称热先快后慢的速度，从滴定管中滴加试样溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，然后趁热以每2s 1 滴的速度迅速滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录样品消耗体积。当样液还原糖浓度过高时应适当稀释，过低直接吸取样液，加葡萄糖标准溶液进行滴定，再进行测定，(应稀释相应倍数后测定) 使每次滴定消耗样液的体积控制在与标定时葡萄糖标准溶液的体积相近， 约在10 mL左右，记录消耗样液的总体积，作为参考 4、样品溶液正式滴定
吸取5.0 mL 碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置于锥形瓶中，加水20 mL, 加玻璃珠2粒，从滴定管中加比预备测定体积少1mL的样品溶液，摇匀，置于电炉上加热至沸，然后趁热以每2s 1 滴的速度继续滴加，直至溶液蓝色刚好褪去，显示淡黄色为为终点，记录消耗样液总体积。平行测三份。
五、结果计算
X=
??
????××1000
250×100
X为试样中还原糖的含量，g/100g, m 为样品的质量，g, V为测定时平均消耗样品溶液的体积， mL。
标定碱性酒石酸铜溶液 样品溶液滴定
六、注意事项
1、实验时加热时间要短，防止糖的消耗， 2、滴定时要保持沸腾，以免影响滴定终点的判断
1 2 3 1 2 3 葡萄糖预加体积 消耗总体积 后滴加体积 平均值 RSD% 样品预加体积 消耗总体积 后滴加体积 平均值 RSD% 七、思考题
1、为什么要进行预备滴定？ 2、为什么滴定过程要保持沸腾？
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