B、同位素15N标记的密度梯度离心
323
C、同位素P标记的密度梯度离心 D、放射性同位素H示踪的纸层析技术 8．以下对大肠杆菌DNA连接酶的论述哪个是正确的？ A、催化DNA双螺旋结构中的DNA片段间形成磷酸二酯键 B、催化两条游离的单链DNA连接起来
C、以NADP+作为能量来源 D、以GTP作为能源 9．下面关于单链结合蛋白（SSB）的描述哪个是不正确的？ A、与单链DNA结合，防止碱基重新配对 B、在复制中保护单链DNA不被核酸酶降解
C、与单链区结合增加双链DNA的稳定性 D、SSB与DNA解离后可重复利用 10．有关转录的错误叙述是：
A、RNA链按3′→5′方向延伸 B、只有一条DNA链可作为模板 C、以NTP为底物 D、遵从碱基互补原则 11．关于σ因子的描述那个是正确的？
A、不属于RNA聚合酶 B、可单独识别启动子部位而无需核心酶的存在 C、转录始终需要σ亚基 D、决定转录起始的专一性 12．真核生物RNA聚合酶III的产物是：
A、mRNA B、hnRNA C、rRNA D、srRNA和tRNA 13．合成后无需进行转录后加工修饰就具有生物活性的RNA是：
A、tRNA B、rRNA C、原核细胞mRNA D、真核细胞mRNA 14．DNA聚合酶III的主要功能是：
A、填补缺口 B、连接冈崎片段 C、聚合作用 D、损伤修复 15．DNA复制的底物是：
A、dNTP B、NTP C、dNDP D、NMP 16．下来哪一项不属于逆转录酶的功能：
A、以RNA为模板合成DNA B、以DNA为模板合成DNA C、水解RNA－DNA杂交分子中的RNA链 D、指导合成RNA
五、问答题
1．什么是复制？DNA复制需要哪些酶和蛋白质因子？ 2．在转录过程中哪种酶起主要作用？简述其作用。
3．单链结合蛋白在DNA复制中有什么作用？
4．大肠杆菌的DNA聚合酶和RNA聚合酶有哪些重要的异同点？
5．下面是某基因中的一个片段的(－)链：3′??ATTCGCAGGCT??5′。 A、写出该片段的完整序列 B、指出转录的方向和哪条链是转录模板
C、写出转录产物序列 D、其产物的序列和有意义链的序列之间有什么关系？ 6．简要说明DNA半保留复制的机制。 7．用简图说明转录作用的机理。
8．各种RNA的转录后加工包括哪些内容？
六、计算题
1．大肠杆菌染色体的复制是定点起始、双向复制的，假设在37℃下每个复制叉每分钟净掺入45000对核苷酸残基，大肠杆菌DNA（分子量为2.2×109）复制一次约需要多少分钟？（每对核苷酸的分子量为618）
2．假设大肠杆菌的转录速度为每秒50个核苷酸残基，计算RNA聚合酶合成一个编码分子量为1000,000的蛋白质的mRNA大约需要多少时间？（氨基酸平均分子量为110）
答 案：
一、选择题 1.A 2.B 3.D 4.C 5.D 6.D 7.B 8.A 9.C 10.A 11.D 12.D 13.C 14.C 15.A 16.D
五、问答题 1.在DNA指导下合成DNA的过程。需要：DNA聚合酶I、III，连接酶，引物酶，引物体，解螺旋酶，单链DNA结合蛋白，拓扑异构酶。
2.RNA聚合酶。作用略。
3.使复制中的单链DNA保持伸展状态，防止碱基重新配对 保护单链不被降解。
4.DNA聚合酶和RNA聚合酶都能催化多核苷酸链向5′－3′方向的聚合；二者不同点为：DNA聚合酶以双链为
模板而RNA聚合酶只能以单链为模板；DNA聚合酶以dNTP为底物，而RNA聚合酶以NTP为底物；DNA聚合酶具有3′－5′以及5′－3′的外切酶活性而RNA聚合酶没有；DNA聚合酶可参与DNA的损伤修复而RNA聚合酶无此功能；二者的结构也是不相同的。
5. 3′??ATTCGCAGGCT??5′ 5′??ATTCGCAGGCT??3′
B、转录方向为（一）链的3′—5′ （一）链为转录模板 C、产物序列：5′??UAAGCGUCCGA??3′
D、序列基本相同，只是U代替了T。
6.DNA不连续复制的机理为：解链；合成引物；在DNA聚合酶催化下，在引物的3′端沿5′－3′方向合成DNA片段；在不连续链上清除引物，填补缺口，最后在连接酶的催化下将DNA片段连接起来。
7.略
8.转录后加工主要包括：断裂、拼接、修饰、改造等。 六、计算题 1.约40分钟 2. 545.4秒
蛋白质生物合成
一、选择题
1．下列有关mRAN的论述，正确的一项是（ ） A、mRNA是基因表达的最终产物
B、mRNA遗传密码的阅读方向是3′→5′ C、mRNA遗传密码的阅读方向是3′→5′
D、mRNA密码子与tRNA反密码子通过A-T，G-C配对结合 E、每分子mRNA有3个终止密码子
2．下列反密码子中能与密码子UAC配对的是（ ）
A、AUG B、AUI C、ACU D、GUA 3．下列密码子中，终止密码子是（ ）
A、UUA B、UGA C、UGU D、UAU 4．下列密码子中，属于起始密码子的是（ ）
A、AUG B、AUU C、AUC D、GAG 5．下列有关密码子的叙述，错误的一项是（ ）
A、密码子阅读是有特定起始位点的 B、密码子阅读无间断性 C、密码子都具有简并性 D、密码子对生物界具有通用性 6．密码子变偶性叙述中，不恰当的一项是（ ）
A、密码子中的第三位碱基专一性较小，所以密码子的专一性完全由前两位决定 B、第三位碱基如果发生了突变如A G、C U，由于密码子的简并性与变 偶性特点，使之仍能翻译出正确的氨基酸来，从而使蛋白质的生物学功能不变 C、次黄嘌呤经常出现在反密码子的第三位，使之具有更广泛的阅读能力，（I-U、 I-C、I-A）从而可减少由于点突变引起的误差
UUD、几乎有密码子可用XYC或XYC表示，其意义为密码子专一性主要由头两个
碱基决定
7．关于核糖体叙述不恰当的一项是（ ）
A、核糖体是由多种酶缔合而成的能够协调活动共同完成翻译工作的多酶复合体 B、核糖体中的各种酶单独存在（解聚体）时，同样具有相应的功能 C、在核糖体的大亚基上存在着肽酰基（P）位点和氨酰基（A）位点
D、在核糖体大亚基上含有肽酰转移酶及能与各种起始因子，延伸因子，释放因 子和各种酶相结合的位点
8．tRNA的叙述中，哪一项不恰当（ ） A、tRNA在蛋白质合成中转运活化了的氨基酸
B、起始tRNA在真核原核生物中仅用于蛋白质合成的起始作用
C、除起始tRNA外，其余tRNA是蛋白质合成延伸中起作用，统称为延伸tRNA D、原核与真核生物中的起始tRNA均为fMet-tRNA
9．tRNA结构与功能紧密相关，下列叙述哪一项不恰当（ ） A、tRNA的二级结构均为“三叶草形”
B、tRNA3′-末端为受体臂的功能部位，均有CCA的结构末端 C、T?C环的序列比较保守，它对识别核糖体并与核糖体结合有关
D、D环也具有保守性,它在被氨酰-tRNA合成酶识别时,是与酶接触的区域之一 10．下列有关氨酰- tRNA合成酶叙述中，哪一项有误（ ） A、氨酰-tRNA合成酶促反应中由ATP提供能量，推动合成正向进行 B、每种氨基酸活化均需要专一的氨基酰- tRNA合成酶催化
C、氨酰-tRNA合成酶活性中心对氨基酸及tRNA都具有绝对专一性
O
D、该类酶促反应终产物中氨基酸的活化形式为R－CH－C－O－ACC－tRNA NH2
11．原核生物中肽链合的起始过程叙述中，不恰当的一项是（ ） A、mRNA起始密码多数为AUG，少数情况也为GUG
B、起始密码子往往在5′-端第25个核苷酸以后，而不是从mRNA5′-端的第 一个苷酸开始的
C、在距起始密码子上游约10个核苷酸的地方往往有一段富含嘌呤的序列，它 能与16SrRNA3′-端碱基形成互补
D、70S起始复合物的形成过程，是50S大亚基及30S小亚基与mRNA自动组 装的
12．有关大肠杆菌肽链延伸叙述中，不恰当的一项是（ ） A、进位是氨酰-tRNA进入大亚基空差的A位点 B、进位过程需要延伸因子EFTu及EFTs协助完成
C、甲酰甲硫氨酰－tRNAf进入70S核糖体A位同样需要EFTu－EFTs延伸因 子作用
D、进位过程中消耗能量由GTP水解释放自由能提供 13．延伸进程中肽链形成叙述中哪项不恰当（ ）
A、肽酰基从P位点的转移到A位点，同时形成一个新的肽键，P位点上的tRNA 无负载，而A位点的tRNA上肽键延长了一个氨基酸残基
B、肽键形成是由肽酰转移酶作用下完成的，此种酶属于核糖体的组成成分 C、嘌呤霉素对蛋白质合成的抑制作用，发生在转肽过程这一步
D、肽酰基是从A位点转移到P位点，同时形成一个新肽键，此时A位点tRNA 空载，而P位点的tRNA上肽链延长了一个氨基酸残基 E、多肽链合成都是从N端向C端方向延伸的
14．移位的叙述中哪一项不恰当（ ）
A、移位是指核糖体沿mRNA（5′→3′）作相对移动，每次移动的距离为一个密码子B、移位反应需要一种蛋白质因子（EFG）参加，该因子也称移位酶C、EFG是核糖体组成因子D、移位过程需要消耗的能量形式是GTP水解释放的自由能
15．肽链终止释放叙述中，哪一项不恰当（ ）
A、RF1能识别mRNA上的终止信号UAA，UAGB、RF1则用于识别mRNA上的终止信号UAA、UGA C、RF3不识别任何终止密码，但能协助肽链释放
D、当RF3结合到大亚基上时转移酶构象变化，转肽酰活性则成为水解酶活性使多肽基从tRNA上水解而释放 16．70S起始复合物的形成过程的叙述，哪项是正确的（ ）
A、mRNA与30S亚基结合过程需要超始因子IF1B、mRNA与30S亚基结合过程需要超始因子IF2
C、mRNA与30S亚基结合过程需要超始因子IF3D、mRNA与30S亚基结合过程需要超始因子IF1、IF2和IF3
17．mRNA与30S亚基复合物与甲酰甲硫氨酰-tRNAf结合过程中起始因子为（ ） A、IF1及IF2 B、IF2及IF3 C、IF1及IF3 D、IF1、IF2及IF3 二、填空题
1．三联体密码子共有 个，其中终止密码子共有 个，分别为 、 、 ；而起始密码子共有 个，分别为 、 ， 这两个起始密码又分别代表 氨酸和 氨酸。
2．密码子的基本特点有四个分别为 、 、 、 。
3．次黄嘌呤具有广泛的配对能力，它可与 、 、 三个碱基配对，因此当它出现在反密码子中时，会使反密码子具有最大限度的阅读能力。 S，大亚基为 S，小亚基为 S。
5．原核起始tRNA，可表示为 ，而起始氨酰tRNA表示为 ；真核生物起始tRNA可表示为 ，而起始氨酰-tRNA表示为 。
4．原核生物核糖体为 S，其中大亚基为 S，小亚基为 S；而真核生物核糖体为
6．肽链延伸过程需要 、 、 三步循环往复，每循环一次肽链延长 个氨基酸残基，原核生物中循环的第一步需要 和 延伸因子；第三步需要 延伸因子。
7．原核生物mRNA分子中起始密码子往往位于 端第25个核苷酸以后，并且在距起始密码子上游约10个核苷酸的地方往往有一段富含 碱的序列称为Shine-Dalgrano序列，它可与16S-rRNA 端核苷酸序列互补。
8．氨酰-tRNA的结构通式可表示为tRNA- ，与氨基酸键联的核苷酸是 。
9．氨酰-tRNA合成酶对氨基酸和相应tRNA都具有较高专一性，在识别tRNA时，其tRNA的 环起
着重要作用，此酶促反应过程中由 提供能量。
10．肽链合成的终止阶段， 因子和 因子能识别终止密码子，以终止肽链延伸，而 因子虽不能识别任何终止密码子，但能协助肽链释放。
11．蛋白质合成后加工常见的方式有 、 、 、 。
12．真核生物细胞合成多肽的起始氨基酸为 氨酸，起始tRNA为 ，此tRNA分子中不含 序列。这是tRNA家庭中十分特殊的。
四、简答题
1．氨酰-tRNA合成酶在多肽合成中的作用特点和意义。
2．原核细胞与真核细胞蛋白质合成起始氨基酸起始氨基酰—tRNA及起始复合物的异同点有那些？ 3．原核生物与真核生物mRNA的信息量及起始信号区结构上有何主要差异。
答案：
一、选择题 1.C 2.B 3.B 4.A 5.C 6.A 7.B 8.D 9.D 10.C 11.D 12.C 13.D 14.C 15.C 16.D
17.A
二、填空题 1. 64 3 UAA UAG UGA 蛋缬 2.从5′→3′ 无间断性 简并性 变偶性 通用性 3. U C A 4. 70 50 30 80 60 40 5.tRNAf甲硫 fMet-tRNAf甲硫 tRNAI甲硫 Met-tRNAf甲硫 6.进位 转肽 移位 一 EFTu EFTsEFG 7. 5′－嘌呤 3′－ O
8. tRNA－O－C－CH－R A（腺嘌呤核苷酸） 9. T?C ATP水解 10.RF1 RF2 RF3
NH2
11. 磷酸化 糖基化 脱甲基化 信号肽切除 12.甲硫 tRNAI甲硫 T?C
四、简答题：
1．氨基酰-tRNA合成酶具有高度的专一性：一是对氨基酸有极高的专一性，每种氨基酸都有一种专一的酶，它仅作用于L-氨基酸，不作用于D-氨基酸，有的氨基酸-tRNA合成酶对氨基酸的专一性虽然不很高，但对tRNA仍具有极高专一性。这种高度专一性会大大减少多肽合成中的差错。
2．为了便于比较列表如下
起始氨基酸 起始复合物核糖体大小 起始氨基酰-tRNA 3．
每个mRNA信息量 5′-端AUG上游 5′-帽子
原核生物 甲酰甲硫氨酸 70S fMet－tRNAf甲硫 真核生物 甲硫氨基酸 80S Met-tRNAI甲硫 原核生物 一般是多个顺反子 富含嘌呤碱 无 真核生物 一般含单个顺反子 无此结构 有
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