（1）一个小肽的氨基酸顺序的测定 （2）多肽链的氨基末端的确定
（3）一个没有二硫键的蛋白质的可逆变性 （4）芳香族氨基酸残基的羧基一侧肽键的水解 （5）甲硫氨酸的羧基一侧肽键的裂解 （6）通过氧化途径将二硫键打开
答案：一个小肽的氨基酸顺序的测定用异硫氰酸苯酯；多肽链的氨基末端的确定用丹磺酰氯；一个没有二硫链的蛋白质的可逆变性用尿素；芳香族氨基酸残基的羧基一侧肽键的水解用胰凝乳蛋白酶；甲硫氨酸的羧基一侧肽键的裂解用溴化氰；通过氧化途径将二硫键打开用过甲酸。
29、已知一个九肽的氨基酸顺序是：Ala-Pro-Lys-Arg-Val-Tyr-Glu-Pro-Gly，在实验室只有氨基酸分析仪，而没有氨基酸顺序测定仪的情况下，如何使用（1）羧肽酶A或B；（2）氨肽酶；（3）2，4二硝基氟苯（FDNB）；（4）胰蛋白酶；（5）胰凝乳蛋白酶，来验证上述肽段的氨基酸顺序。
答案：用两种羧肽酶和氨肽酶作用此九肽，都不能释放出氨基酸，证明了第2位和第8位的残基均为脯氨酸；用FDNB可以测得该肽的N末端为Ala，用胰蛋白酶作用可得到Ala，Pro，Lys组成的三肽，这表明了第3位的残基为Lys；同时得到一段五肽和游离的Arg，这提示了Arg是第4位残基，用凝胶乳蛋白酶作用后，可得到一段六肽和一段三肽，同时也确认了第6位残基是带芳香性侧链的Tyr，由六肽的氨基酸组成测得，确定其中含有Val，很自然地可认定这残基应是第五为的残基，用FDNB证明了酶解后所得到三肽的N端，即九肽的第7位残基，是Glu后，九肽的C末端也肯定是Gly.
30、比较肌红蛋白和血红蛋白的氧合曲线，并加以简单说明。
答案：肌红蛋白和血红蛋白的氧合曲线的差别是，前者是双曲线形式，后者是S性曲线，原因是肌红蛋白是单个亚基氧结合蛋白，不存在协同效应；而血红蛋白是含4个亚基的氧结合蛋白，彼此之间存在着协同效应。
31、大肠杆菌含有2000种以上的蛋白质，为了分离它所表达的一个外源基因的产物并保持它的活性，常有很大困难。但为了某种目的，请根据下列要求写出具体的方法。
（1）利用溶解度差别进行分离。 （2）利用蛋白质分子大小进行分离。 （3）根据不同电荷进行分离。
（4）已制备有该产物的抗体进行分离。 （5）产物的浓缩
（6）产物纯度的鉴定。
答案：首先要有一种或几种检测或鉴定外源基因表达产物的方法，然后，在每一次分离纯化后，检测表达产物存在那一个级分中。（1）用硫酸铵或酒精分级沉淀，可根据蛋白质的溶解度的差别进行分离。（2）SDS-PAGE、凝胶过滤、超离心，以及超滤可对分子量不同的蛋白质进行分离。（3）对带行为不同的蛋白质可用离子交换层析、等电聚焦、圆盘电泳、毛细血管电泳等方法进行分离，但是在使用这一类型的方法时选择溶液的pH至关重要，因为蛋白质的带电行为和溶液的pH
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密切相关。（4）如果具备表达产物的抗体，则可以使用亲和层析或免疫沉淀方法简捷地他离所需的表达产物。（5）使用叭附量较大的离子交换层析和亲和层析，以及对换饱和硫酸铵或聚乙二醇反透析，还有冷冻干燥等方法都可以达到浓缩样品的目的，然而这些方法使用时，都存在着脱盐或除去小分子化合物的问题，相比而言，选用合适截留分子量的超滤膜，进行超过滤，往往能同时达到浓缩样品和去盐（包括小分子）的目的。（6）要上述的（2）和（3）这两大类用于分离纯化产物的过程，实际上也有这样纯度鉴定的作用。此外，末端分析、质谱和反相的HPLC层析也都是有效的样品纯度鉴定的方法，但是应注意，样品的纯度是一个相对概念。
32、简介信号肽及识别信号肽的信号识别体的结构特征？
答案：目前通常所说的信号肽是指翻译产物，新生肽链N端引导新生肽链进入内质网的肽段。这种信号肽一般含有20个氨基酸残基，从其结构上看，中间集中了较多的疏水性残基，两端是一些极性残基，识别信号的识别体，也称为信号肽识别颗粒（SRP）。它是7SRNA和6条不同分子量的肽链组成的复合物，除了信号肽结合外，识别颗粒还可以和其他一些帮助新生肽穿越内质网膜的蛋白质（或复合物）结合，后者停靠蛋白和核糖体受体等。 33、用什么试剂可将胰岛素链间的二硫键打开与还原？如果要打开牛胰核糖核酸酶链内的二硫键，则在反应体系中还必须加入什么试剂？蛋白质变性时，为防止生成的-SH基重新被氧化，可加入什么试剂来保护？
答案：最常用的打开二硫键方法是使用巯基试剂，例如巯基乙醇，可使参与二硫键的2个半胱氨酸还原为带有游离巯基的半胱氨酸，为了使还原反应能顺利进行，通常加入一些变性剂，如高浓度尿素等，加入过量的还原剂可以防止还原所得的巯基被重新氧化，如果不准备使 肽链重氧化，而是进一步进行结构化学结构的研究，可以将巯基转化为其它的修饰形式，例如和羧甲基化等烷化剂反应。 34、免疫球蛋白质是属于
A、核蛋白 B、简单蛋白 C、脂蛋白 D、糖蛋白 答案：D
34、总复习：
氨基酸的分类（分别以R基团的不同或疏水性的强弱分）必需氨基酸 氨基酸的紫外吸收特性，氨基酸与茚三酮的反应特征？肽的结构通式肽键、氨基酸残基、侧链等电点和解离常数蛋白质二、三和四级结构的主要作用力分别是什么？二级结构的种类。
结构域的概念亚基的概念
血红蛋白分子病蛋白质的沉淀作用和变性作用的原理及其应用。蛋白质分离纯化有哪些方法，简述各方法的原理。测定蛋白质含量有哪些方法，主要原理是什么？
第二章 核酸的化学
1、比较DNA、RNA在化学组成上、大分子结构上、生物学功能上的特点。 2、DNA双螺旋结构模型有哪些基本要点？这些特点能解释哪些基本的生命现象？
3、如果人体有1014个细胞，每一细胞DNA含量为6.4×109bp，试计算一下人体
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DNA的总长度为多少米？它相当于地球到太阳的距离（2.2×109米）之几倍？（2.2×1011米，100倍）。
4、核酸有何紫外吸收特点？在实验室如何利用这一特点研究核酸？ 5、核酸的热变性有何特点？Tm值表示什么？Cot值表示什么？（Cot值表示DNA复性反应的速度。）
6、核酸杂交技术的基础是什么？有哪些应用价值？Southern印迹法的基本步骤是什么？
7、比较DNA与RNA一级结构的异同点。
答案：不同点：DNA的一级结构中组成成分为脱氧核糖核苷酸，核苷酸残基的数目由几千到几千万个；而RNA的组成成分为核糖核苷酸，核苷酸残基的数目仅有几十到几千个。另外，在DNA分子中A=T，G=C；而在RNA分子中A≠U，G≠C。
二者的相同点在于，它们都是以单核苷酸作为基本组成单位，核苷酸残基之间都是由3′，5′-磷酸二酯键相连接的。
8、为什么Φ×174的DNA不符合Chargeff碱基定律。
解析：
Chargaff等在50年代应用纸层析及紫外分光光度计对各种生物DNA的碱基组成进行了定量测定，发现如下规律：
（1）所有DNA中腺嘌呤与胸腺嘧啶的摩尔含量相等，即A=T；鸟嘌呤与胞嘧啶的摩尔含量相等，即G=C。因此，嘌呤的总含量与嘧啶的总含量相等，即A+G=C+T。
（2）DNA的碱基组成具有种的特异性，即不同生物种的DNA具有自己独特的碱基组成。但DNA的碱基组成没有组织和器官司的特异性。生长发育阶段、营养状态和环境的改变都不影响DNA的碱基组成。
所有DNA中碱基组成必定是A=T，G=C。这一规律的发现，提示了A与T，G与C之间碱基互补的可能性，为以后DNA双螺旋结构的建立提供了重要根据。
答案：Chargaff碱基比定律主要是用来描述双螺旋DNA的碱基组成的，而Φ×174是单链环状的，所以它的DNA碱基组成不符合Chargaff碱基比定律。
9、简述B型DNA和Z型DNA的结构特点及两者之间的关系。
答案：B型DNA的结构特点：①两条多核苷酸链反向平行绕成一个右手螺旋。②碱基位于双螺旋内侧，与纵轴垂直糖磷酸骨架位于外侧与纵轴平行。③分子表面朋大沟和小沟。④双螺旋的平行直径为2nm，每10对碱基旋绕一周，每周螺距为3.4nm。⑤氢键与碱基堆积力为维持其结构的主要作用力。
Z型DNA的结构特点：①两条多核苷酸链反向平行绕成一个左手螺旋。②碱基对在分子轴外侧，并构成了分子的凸面。③糖磷酸骨架链的走向呈“Z”字型。④分子表面只有小沟。⑤DNA双螺旋体细长。
两者之间的关系：B型、Z型DNA为DNA的两种结构形式，都是反向平等的双螺旋结构，B型DNA与Z型DNA之间可以互相转变。
10、溶液A中含有浓度为1M的20个碱基对的DNA分子，溶液B中含有0.05M的400个碱基对的DNA分子，所以每种溶液含有的总的核苷酸残基数相等。假设DNA分子都有相同的碱基组成。
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（a）当两种溶液的温度都缓慢上升时，哪个溶液首先得到完全变性的DNA？ （b）哪个溶液复性的速度更快些？ 解析：
（a）溶液A中的DNA将首先被完全变性，因为在20个碱基对螺旋中的堆积作用力比在400个碱基对螺旋中的力小很多，在DNA双链的末端的DNA的碱基对只是部分堆积。在片段短的分子中这种“末端效应”更大。
（b）在溶液A中复性的速率更大。成核作用（第一个碱基对的形成）是一个限速步骤，单链分子的数目越大，重新形成碱基对的机率就越大，因而在溶液A中的DNA（含有2M单链DNA）将比溶液B中的DNA（含有0.1M）更快地复性。
答案：（a）溶液A；（b）溶液A。
11、假尿苷(pseudouridine)中的糖苷键是（ ） （1）C-N连接 （2）C-C连接 （3）N-N连接
12、一tRNA的反密码子为IGC，它可识别的密码子为（ ） （1）GCA （2）GGG （3）CCG （4）ACG
13、核酸分子杂交的概念及其意义。
概念：两条来源不同的单链核酸（DNA或RNA），只要它们有大致相同的互补碱基顺序，经退火处理即可复性，形成新的杂种双螺旋，这一现象称为核酸的分子杂交。
意义：广泛应用在分子生物学和分子遗传学研究领域。利用核酸的分子杂交，可以确定或寻找不同物种中具有同源顺序的DNA或RNA片段。
14、印渍技术的类别及应用。 ①DNA印渍技术：又称为Southern杂交，即DNA-DNA杂交分析。②RNA印渍技术：又称为Northern杂交，即RNA-DNA杂交分析。③蛋白质印渍技术：又称为Western杂交，或免疫印渍技术，即利用抗原-抗体反应，检测转移到硝酸纤维素膜上的特异性蛋白质。
15、稀有核苷酸碱基主要是在哪类核酸中发现？
A、rRNA B、mRNA C、tRNA D、核仁DNA 答案：C。
16、绝大多数mRNA的5′端有
A、polyA B、帽子结构 C、起始密码子 D、终止密码子 答案：B
17、真核生物mRNA的帽子结构中，m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基连接，连接方式是 A、2′-5′ B、3′-5′ C、3′-3′ D、5′-5′ 答案：D
18、细胞质中主要有三种RNA：tRNA、mRNA和rRNA，其相对含量是 A、tRNA>mRNA>rRNA B、tRNA>rRNA>mRNA C、rRNA>tRNA>mRNA
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