高二生物导学案 2.2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
一、预习学案 1．基础知识
1．1 尿素是一种重要的氮肥，农作物不能（能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为 氨和CO2，这是因为细菌能合成脲酶。
1．2 科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为 热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物 ，这样也适用于实验室中微生物的筛选，原理是 人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、PH等），同时抑制或阻止其他微生物生长 。
1．3在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是 稀释涂布平板法 。除此之外，显微镜直接计数 也是测定微生物数量的常用方法。
1．4 采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于 1个活菌 。通过统计菌落数 ，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 30～300的平板进行计数。
1．5统计的菌落数比活菌的实际数目 低 。这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是 一个 菌落。因此，统计结果一般用 菌落数 来表示。
1．6设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。 1．7对照实验是指除了 被测试条件外，其他条件都 相同 的实验。满足该条件的称为 对照组，未满足该条件的称为 实验 组。 2．实验设计
2．1 实验设计的内容包括实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排等。 2．2 根据图示2－7填写以下实验流程： 配制土壤溶液 菌落计数 系列稀释 涂布平板与培养
2．3 土壤微生物主要分布在距地表3～8cm的近中性的潮湿土壤中，约70％～90％为细菌。 2．4 分离不同的微生物采用不同的稀释度，其原因是不同微生物在土壤中含量不同。
2．5 培养不同微生物往往需要不同培养温度和时间。细菌一般在30～37℃培养1～2d，放线菌一般在25～28℃培养5～7d，霉菌一般在25～28℃的温度下培养3～4d。 2．6菌落的特征包括形状、大小、隆起程度、颜色等方面。 2．7实验过程
1）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。
2）应在火焰旁称取土壤 10 g。将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，塞好棉塞。 3）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行。
4）实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度等。 5）为了提高效率，在操作时更加有条不紊，应当事先制订计划。 3．结果分析与评价
3．1 对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助 生物化学 的方法。
3．2 在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的 脲酶 将尿素分解成了氨。氨会使培养基的碱性增强，PH升高。因此，我们可以通过检测培养基 pH 变化来判断该化学反应是否发生。
成功不是靠梦想和希望，而是靠努力和实践
3．3 在以 尿素 为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红 ，说明该细菌能够 分解尿素 。 二、巩固练习
1．从土壤中分离能分解尿素的细菌，可以利用选择培养基，其成分中一定有 （ ） ①尿素②有机氮化合物③无机盐④有机碳化合物⑤水⑥无机碳化合物
A （1）（3）（4）（5） B（2）（3）（4）（5） C （1）（3）（5）（6） D（2）（3）（5）（6） 2．可用于菌落数目统计的培养基是 （ ） A 固体培养基 B液体培养基 A一个细菌 液体培养基 C一个细菌 固体培养基
C半固体培养基
D天然培养基
3．产生标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是 （ ）
B许多细菌 液体培养基 D许多细菌 固体培养基
4．要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用 （ ） A加入青霉素的培养基 B 固体培养基
C液体培养基 D加入高浓度食盐的培养基 5．右表资料表明在各种培养基中细菌的生长，S C M 为简单培养，UVXYZ代表加入培养基的不同物质，问哪一种物质细菌不能合成 A. U B.V
C.Y D.Z
6培养基中浓度过高抑制微生物生长的原因是（ ） A含热量太多 B 会使微生物失水
C 导致微生物休眠 D培养基中的碳源和氮源比例失衡 7．不同种类的细菌菌落表现为不同的特征，下列属于菌落特征的是①菌落大小②菌落形状⑶菌落的隆起程度④菌落的颜色⑤菌落的透明度 （ ）
A（1）（2）（3） B（2）（3）（4） C（1）（3）（4） D（1）（2）（3）（4）（5） 8．某同学在１０、100、1000倍稀释液的平均菌落数为2760、295、46,则菌落总数为 ( ) A 27600 B 29500 C 46000 D 37750
9.下列氮肥能被植物直接吸收的是 (1)硝酸盐(2)尿素(3)磷酸二氢氨 (4) 氨 ( ) A(1)(2)(3)(4) B(1)(3)(4)
C (2)(3)(4) D (1)(3)
10．将某种细菌接种到彻底灭菌的固体培养基上，经过一段时间后能得到 （ ） A无一定形态的群体 B 菌丝 C单个细菌 D菌落
培养基 SCM SCM+U+Y SCM+Z+X SCM+v+Y SCM+U+X SCM+Y+Z 生长状态 __ + __ + __ + SCM + V +Z __ 1-10 AACBC BDCBD
成功不是靠梦想和希望，而是靠努力和实践
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