岛津操作培训 - 液相色谱基础知识 - 图文

缓冲盐

选择缓冲液的步骤

1 .确定最佳分离状态时的流动相pH

2 .选择具有与流动相pH相近的pKa的缓冲液（即使浓度稀也具有较强能力的缓冲液）

3 .确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收

（在波长210nm附近进行检测时，不能用醋酸和柠檬酸的缓冲液）

46Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited缓冲盐

常用代表性的弱酸的pKa值

pK14.873.132.16

pK24.767.21

pK36.4012.32

醋酸柠檬酸磷酸

47Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited缓冲液

缓冲液的使用

μ使用前必须过滤

μ使用后一定要进行清洗，以免造成腐蚀、磨损、阻塞:

用含5%甲醇的水溶液冲洗30min（1ml/min），再用甲醇冲洗30min

μ用纯水冲洗泵头清洗管路μ易受到细菌和霉菌的影响

不能直接用有机溶剂冲洗缓冲盐溶液48Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited流动相的更换

不互溶的流动相不能直接更换

缓冲盐不能直接用有机溶剂更换

水缓冲盐异丙醇水正己烷

49有机溶剂

Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited溶剂的黏度

?乙腈和甲醇…黏度

Water/methanol

-乙腈黏度低在相同流速时有较低的柱压Water/methanol

Pressure (MPa)-当和水混合时黏度有变化柱压也相应有变化Water/acetonitrile

Water/acetonitrile

Water (100%)Water/Organic solvent 1:1Organic solvent (100%)

50Shimadzu International Trading (Shanghai) Co. Limited