人哭的话，那就一定是TALEN相关公司了。
正所谓“长江后浪推前浪，前浪死在沙滩上”，科学也有更新换代，算是自然规律使然。Cas9无论是从理论分析，可行性便捷性，还是实际结果，效率上都轻松的“秒杀”了前任明星——TALEN。【1】【17】【19】【21】. 没办法，在秉承了“更高、更快、更强”精神的Cas9同学面前，曾经风光无限的TALEN同学只能默默垂泪离去，剩下一堆公司做好准备血本无归了。
百花齐放，四海皆准
Human这个大boss都搞掂了，剩下的估计问题不大。也的确是这样，一时间，各种物种体内的Cas9运用文章哗啦啦的冒出来——斑马鱼【24】酵母【25】小鼠（多基因同时，还是丛乐老板课题组的作品）【26】细菌（仍然是丛乐老板课题组作品）【27】，Cas9大热正式出现。
眼看，一个Cas9的时代就这样到来了。
精确定位，潜力无穷
其实，Cas9的成功给了我们一个运用CRISPR系统方便快捷定位基因序列的可能，但仅仅局限于编辑基因吗？其实可以做的远不止于此。
图17 利用Cas9定位控制转录【28】
比如可以利用这种特异性，做有针对性的表达调控【28】，比如利用双切致死性“自动”筛选突变株【27】。未来，也许还有更多应用，开动脑筋改造他，还有很大潜力。
四、惊喜连连，奇妙继续
——CRISPR系统在各个层次的广泛性与给我们的认知拓展
主观来讲，一个好故事的结尾总是留有悬念的开放式，为了讲个好故事，我们的CRISPR也不负重望，更多发现，让我再多写一节。
客观来讲，能够开启一个分子生物学的新局面已经够牛气了，可是偏偏人家还有更大的使命——让我们继续思考原核的种种，调控网络的种种。
道高一尺魔高一丈——病毒抗CRISPR系统机制
有个问题不知道大家有没有想过，如果CRISPR在原核生物中真的那么所向披靡，那噬菌体、病毒对于细菌早就没任何威胁能力了，早就给干掉了。“这不科学啊”~ 俗话说“道高一尺魔高一丈”，你细菌能有CRISPR对付我病毒，我病毒也必然有一套甚至几套机理来对付你。【6】【31】 “别拿豆包不当干粮”，别拿病毒不当生命，人家不但能“借尸还魂”繁殖自己，连特异性的免疫系统，都是可以有的！
奥特曼与小怪兽共同成长———军备竞赛，协同进化
正如这个有趣的题目CRISPR-mediated phage resistance and the ghost of coevolution past【33】，让我们感兴趣的是CRISPR系统中那些细菌病毒协同进化的证据。【31】中噬菌体对抗CRISPR基因来源等表明，细菌和噬菌体简直“你中有我”“我中有你”，不断竞争，共同成长。
想一想，大自然的法则多么有哲学意义啊！
苦肉计——自身抗逆，作用比我们想的更多
更玄妙的机制是这个“苦肉计”——细菌通过CRISPR调节自身基因，帮助自己躲避哺乳动物的免疫系统。
2013年4月的一篇文章【5】表明细菌Francisella novicida的传染力依赖自身的CRISPR系统。 在哺乳动物细胞内生长时，细菌会通过CRISPR系统关闭自身脂蛋白的合成基因，以避免被宿主免疫系统发现并摧毁。
“如果将宿主的免疫细胞比作大海中的鲨鱼，那么对于它们来说，细菌脂蛋白就如同海水里的血一般充满着吸引力。因此，为了不被免疫系统发现，细菌就必须关闭脂蛋白的生产。” 太神奇了！
“除了切割噬菌体基因以外，Cas9还能够调节细菌基因，这是一项新发现，”
看来CRISPR系统是一种原核生物间、原核和真核之间综合性的调控网络的中心，是原核生物抵御外界不良环境的手段方法，并非切切外源基因那么简单。也给了我们一个机会，
让我们从CRISPR的角度重新认识一下奇妙的“微生物界”。
当然，还有更多关于CRISPR的报道【32】引导我们继续去关注。
“小东西”搞出“大名堂”故事的“启示”
好啦，故事讲到这里也差不多了，是时候总结一下啦，故事梗概如图所示，多说一遍也没啥意思。
“不幸的各有各的不幸，幸运的都差不多一个样子。”其实想想，也许这就是一个nice的科学故事该有的pattern——从最初一片草莽中被慧眼识英雄，到研究不断深化，打开一片认知新天地，甚至改写固有“教科书”，改变固有观念。而后派上用场，为更多研究服务。并且同时开启一个新领域，新视野。
然而这个故事的意义还在于提醒我们怎么做好的研究，回顾整个故事，其实无论在哪里及时进入有所建树都是很好的研究。关键在于如何敏锐的发现这自然宝藏的价值所在，看得比别人远，下手比别人早，而且动作比别人快。
自然界有很多宝藏，怪不得venter要下海去找。我们可以不去找，就盯着那些出土的，嗅觉灵敏，慧眼识珠，有了make a difference的机遇，果断抓住！
希望再有这样的好“戏”，我们不但在台上，唱的还是高潮部分~
Reference
[1] Le Cong, F. Ann Ran, David Cox, et al. Multiplex Genome Engineering Using CRISPR/Cas Systems, Science,2013, Vol. 339 no. 6121 pp. 819-823 DOI: 10.1126/science.1231143
[2] M. Jinek et al ., A programmable dual-RNA-guided DNA endonuclease in adaptive bacterial immunity. Science337, 816(2012).doi:10.1126/science.1225829 Medline [3] Philippe Horvath, Rodolphe Barrangou, CRISPR/Cas, the Immune System of Bacteria and Archaea , Science ,DOI: 10.1126/science.1179555, 167 (2010); 327
[4] Rimantas Sapranauskas, et al ., The Streptococcus thermophilus CRISPR/Cas system provides immunity in Escherichia coli , Nucleic Acids Research, 2011, Vol. 39, No. 21 9275–9282
[5] Timothy R. Sampson et al ., A CRISPR/Cas system mediates bacterial innate immune evasion and virulence, Nature, doi:10.1038/nature12048
[6] Kimberley D. Seed et al ., A bacteriophage encodes its own CRISPR/Cas adaptive response to evade host innate immunity, Nature, doi:10.1038/nature11927
[7] YOSHI ZUMI ISHINO, et al.,Nucleotide Sequence of the iap Gene, Responsible for Alkaline Phosphatase Isozyme Conversion in Escherichia coli, and IdentificationoftheGeneProduct, JOURNAL OF BACTERIOLOGY, Dec. 1987, p. 5429-5433 [8] Ruud. Jansen, et al ., Identification of genes that are associated with DNA repeats in prokaryotes, Molecular Microbiology (2002) 43(6), 1565–1575
[9] Matthijs M Jore ,et al ., Structural basis for CRISPR RNA-guided DNA recognition by Cascade, Nature Structural & Molecular Biology,2011 doi:10.1038/nsmb.2019
[10] Caryn R. Hale et al ., Essential Features and Rational Design of CRISPR RNAs that Function with the Cas RAMP Module Complex to Cleave RNAs, Molecular Cell,45, 292–302, February 10, 2012
[11] Blake Wiedenheft , et al ., RNA-guided genetic silencing systems in bacteria and archaea, Nature, 2012, doi:10.1038/nature10886
[12] Ibtissem Grissa et al ., CRISPRFinder: a web tool to identify clustered regularly interspaced short palindromic repeats Nucleic Acids Research, 2007, Vol. 35, Web Server issuedoi:10.1093/nar/gkm360
[13] Giedrius Gasiunas, et al ., Cas9 –crRNA ribonucleoprotein complex mediates specific DNA cleavage for adaptive immunity in bacteria, PNAS, September 4, 2012 | E2579 –E2586
[14] Zihni Arslan et al ., Double-strand DNA end-binding and sliding of the toroidal
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