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⑶ 抗O试验（ASO test）：抗链球菌溶素O试验(ASO test)是一项检测患者血清中是否有链球菌溶素O抗体的中和试验，常用于辅助诊断风湿热。风湿热患者血清中抗O抗体比正常人显著增高，大多在250单位左右；活动性风湿热患者一般超过400单位。 2、化脓性球菌有哪几种？各自引起疾病的种类。 +-种类：化脓性球菌包括G的葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、肠球菌和G的脑膜炎球菌与淋
球菌
所致疾病 葡萄球菌：
金黄色葡萄球菌可以引起如下疾病：① 侵袭性疾病：主要引起化脓性炎症，包括局部感染如疖、痈、毛囊炎、蜂窝组织炎，全身感染如败血症、脓毒血症等；② 毒素性疾病：包括食物中毒、假膜性肠炎、烫伤样皮肤综合征、毒性休克综合征等。 链球菌：
A群链球菌引起的疾病有三类。⑴ 化脓性疾病：包括淋巴管炎、淋巴结炎、蜂窝组织炎、脓疱疮、扁桃体炎、咽炎、咽峡炎、产褥热、中耳炎等，⑵ 中毒性疾病：猩红热等，⑶ 超敏反应性疾病：风湿热（风湿性心脏病、风湿性关节炎）、急性肾小球肾炎等。
B群链球菌（无乳链球菌）：条件致病菌，是新生儿败血症和脑膜炎主要致病菌。 肺炎链球菌：引起大叶性肺炎、支气管炎等疾病。感染后机体可建立牢固的型特异性免疫，但因菌型多，仍可再感染其他型别而发病。
甲型链球菌：条件致病菌，在一定条件下引起亚急性细菌性心内膜炎。 变异链球菌：与龋齿有密切关系。 C群链球菌：是咽喉炎的病原体。
肠球菌：主要引起医院内感染，以粪肠球菌为主，以尿路感染多见，多与尿路器械操作、留
置导尿管和患者的尿路结构异常等有关。
脑膜炎球菌：引起流行性脑脊髓膜炎（流脑）。临床表现：上呼吸道症状：鼻咽炎等；全身
感染症状：高热、出血点或瘀血点 ；脑膜炎症状：头痛、呕吐、颈项强直。
淋球菌：淋病。表现为尿道炎、宫颈炎、淋病性咽喉炎、淋病性结膜炎（新生儿淋菌性眼结
膜炎即脓漏眼??1%硝酸银滴眼）、幼儿淋病性外阴阴道炎等。
3、简述金黄色葡萄球菌鉴定的主要依据有哪些？ 金黄色葡萄球菌鉴定的主要依据有：
① 涂片、革蓝染色镜检：G+葡萄状排列的球菌。
② 血琼脂平板上分离培养：直径2～3mm、金黄色、光滑突起的圆形菌落，有时可见β-溶血环。
③ 主要生化鉴定试验：血浆凝固酶、耐热核酸酶、发酵甘露醇等。 【附】
金黄色葡萄球菌的主要培养特性
普通培养基、中等大小的S型菌落、产生脂色素（金黄色）、耐盐性强、β溶血现象 常用培养基及菌落特征：
脓、痰、脑脊液标本－→接种血平板：中等大小、S型菌落、脂溶性色素、透明溶血环 粪便标本－→高盐甘露醇平板（选择鉴别培养基）：光滑型、中等大小、淡橙黄色菌落。 高盐卵黄琼脂平板（选择鉴别培养基）：菌落周围形成白色沉淀圈（致病葡萄球菌） 血标本－→增菌（葡萄糖肉汤）－→分离培养（血平板）：混浊、胶胨状凝固、溶血。 增菌：血液与培养基比例：1：10，即5ml标本，50ml增菌液。 主要生化反应：
触酶试验：+ （籍此区别葡萄球菌属与链球菌属）
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多数菌能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产气。 葡萄糖氧化发酵试验：发酵+ 甘露醇分解试验：+
凝固酶与耐热核酸酶试验：+
新生霉素敏感试验：是用于鉴别表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌，前者为敏感（S），后者为耐药（R）。
4、简述从可疑金黄色葡萄球菌败血症患者中分离鉴定细菌的步骤、依据和报告。
⑴ 取血液标本涂片革兰染色镜检：典型G+成堆排列的球菌；初步报告:“查见革兰阳性葡萄串状排列球菌，疑为葡萄球菌”
⑵ 分离培养：血液标本先经液体培养基增菌培养6~8小时后再接种于血平板上，观察中等大小的典型S型菌落：直径2～3mm，金黄色、光滑突起的圆形菌落，有时可见β-溶血环。
⑶ 鉴定试验：H2O2试验、血浆凝固酶试验、耐热核酸酶试验、分解甘露醇等。 上述试验阳性，结合临床可报告“金黄色葡萄球菌”感染。
5、肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌的比较。 菌名 形 态 菌 落 胆汁 溶菌试验 + Optochin敏菊糖分解小白鼠毒感试验 试验 力试验 + +/－ + 肺链 G+矛头状、成双脐窝状、草绿色排列、有荚膜 溶血环 G+圆形、短链、针尖状、草绿色无荚膜 溶血环 甲链 － － － －
6、简述甲型溶血性链球菌的致病过程以及引起的主要病种。
甲链是口腔及上呼吸道部位的正常菌群，随口腔破溃处进入血液并引起菌血症，随血流到达心脏，如果心瓣膜有损伤或有先天性缺陷，细菌则在损伤部位繁殖，引起亚急性细菌性心内膜炎。是一种条件致病菌引起的感染。
7、简述肺炎链球菌鉴定的主要依据。
⑴ 菌体形态：矛头状成双排列，宽端相对，矛头向外的G+ 球菌。
⑵ 血平板：灰白色、半透明、表面光滑、扁平的细小菌落，菌落周围有草绿色溶血环。48小时后，由于肺炎链球菌的自溶作用，菌落中央可凹陷而呈―脐窝状‖。 ⑶ 生化鉴定： Optochin敏感试验（+）、胆汁溶菌试验（+）等 ⑷ 血清学试验：荚膜肿胀试验（+）
8、临床上流脑标本的采集与送检应注意什么？为什么？
保暖、保湿、立即送检，培养基预温，最好床边接种。因抵抗力很弱。对寒冷、湿热、干燥、消毒剂、紫外线均敏感。室温3h即死，55℃ 5min内被破坏。且能产生自溶酶。
9、根据所学的知识，请列举出6~8种常见性传播疾病（STD）的病原体极其所致的疾病。 ⑴ 淋病——淋病奈瑟氏菌
⑵ AIDS——HIV（人类免疫缺陷病毒）
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⑶ 梅毒——梅毒螺旋体
⑷ 尖锐湿疣——HPV（人乳头瘤病毒）
⑸ 非淋菌性尿道炎——解脲支原体和沙眼衣原体等 ⑹ 性病淋巴肉芽舯——沙眼衣原体 ⑺ 软下疳——杜克嗜血杆菌
⑻ 生殖器疱疹——HSV-Ⅱ（单纯疱疹病毒Ⅱ）
10、简述淋病的病原学诊断是什么？
淋病的病原学诊断：
淋病属性传播性疾病，要求及时进行微生物学检查、正确诊断。标本采取：用无菌棉拭子沾取泌尿生殖道脓性分泌物或官颈口表面分泌物。方法如下：
① 直接涂片镜检：将标本涂片，经革兰染色后镜检，如在中性粒细胞内外均发现革兰阴性双球菌时，可初步诊断；
② 分离与鉴定：将标本立即接种于预温的巧克力色血琼脂平板或T-M培养基上，置37％、5％C02下孵育36-48小时，取典型菌落作形态学检查、氧化酶试验、糖发酵试验等给予鉴定
③ 有条件者可采用核酸杂交技术或核酸扩增技术进行检测。
11、简述A群乙型溶血性链球菌的鉴定依据有哪些？ ⑴ 形态染色：革兰阳性球菌，链状排列。
⑵ 菌落特征：在血平板上菌落细小灰白，周围有宽大的透明溶血环。 ⑶ 触酶试验阴性、杆菌肽敏感试验阳性。 【附】链球菌的主要鉴定依据：
A群链球菌－－杆菌肽敏感试验（+）、PYR（ +） B 群链球菌－－CAMP试验（+）、马尿酸钠水解试验（+） D群链球菌－－胆汁七叶苷试验（+）、6.5％氯化钠生长（－） 肺炎链球菌－－Optochin敏感试验（+）、胆汁溶菌试验（+）、形态和菌落特征典型 甲型链球菌－－Optochin敏感试验（－）、胆汁溶菌试验（－）、菊糖分解试验（-） 肠球菌－－革兰阳性球菌，短链排列；营养要求高；在10℃、45℃、pH9.6条件下均可生长；血平板上溶血现象不定；触酶试验（-）；胆汁七叶苷试验（+）；6.5％NaCl生长试验（+）；PYR试验（+）；血清学分类属D群。
12、肠球菌属和D群链球菌的比较。 试验 胆汁-七叶苷试验 PYR试验 65g/LNaCl中生长 45℃生长 肠球菌属 ＋ ＋ ＋ ＋ D群链球菌 ＋ － － － 乳球菌属 ＋ ＋ V － 三者相同点：⑴ 细菌排列……均为成双、链状；⑵ 溶血特征……前两者均可为α、β、γ，而乳球菌属为α、γ；⑶ 万古霉素敏感试验……均为S。
13、简述脑膜炎球菌的鉴定依据有哪些？
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形态染色：革兰阴性球菌（肾形）、成双排列 菌落典型：光滑型，易乳化，盐水中无自凝 生化反应：氧化酶（+）、触酶（+）、糖代谢试验：发酵葡萄糖、麦芽糖 生长特性试验：生长温度、营养需求（普通培养基不生长） 血清学鉴定与分群：可与相应分群诊断血清发生凝集。
14、临床病例分析题
（一）患者李某，男，28岁，有不洁性交史，以尿痛、尿道口有脓性分泌物就诊。1周前开
始有尿道口瘙痒感，伴尿急、尿痛、尿道口发红，分泌物由浆液性逐渐变成黄色粘稠脓性。你对患者的初步诊断是什么？应如何进行微生物学检查？ 初步诊断是淋病奈瑟菌引起的急性淋菌性尿道炎。
⑴ 取脓性分泌物做直接涂片染色镜检，可见中性粒 细胞内、外G-双球菌。 ⑵ 分离培养：取材接种于巧克力平板，观察典型菌落；
⑶ 鉴定：氧化酶试验、分解利用葡萄糖、多克隆和单克隆荧光抗体染色法协同凝集实验等。 ⑷ 非培养法：ELISA、核酸探针试验。
（二）患者李某某，女，38岁，因SLE并发肾功能衰竭而入院治疗，采用激素冲击疗法，
连续应用激素1周。该患者的肾衰有所缓解，但却出现发热、咳嗽、气喘等呼吸系统症状，听诊肺部有啰音。
⑴ 与该患者出现的呼吸道症状有关的是
A、SLE合并肺部感染 B、普通感冒 C、激素的副作用 D、医院感染 E、气管炎 ⑵ 若该患者咳痰为脓色、黏稠，可能感染的细菌是
A、金黄色葡萄球菌 B、化脓性链球菌 C、肺炎克雷伯菌 D、铜绿假单胞菌 E、肺炎链球菌 ⑶ 若该患者咳痰为铁锈色，可能感染的细菌是 A、铜绿假单胞菌 B、乙型溶血性链球菌
C、肺炎克雷伯菌 D、肺炎链球菌 E、金黄色葡萄球菌 ⑴ D ⑵ A ⑶ D
（三）患者王某，女，发热胸痛伴咳脓痰3天，急诊入院。患者3天前突发高热寒战，胸痛
如针刺样，呼吸时加剧，咳嗽且有粘稠脓痰，有时带血丝。发病一周前面部皮肤有一疖子，曾自行挤压过。既往体健。入院检查：T：39.5℃，Bp：120/70mmHg，急性面容，神清，烦躁，气促。胸部叩诊浊音，双肺可闻及湿罗音，心音正常，腹软，肝脾仅可扪及，X线检查：双肺呈大片状阴影，肋隔角钝圆，无明显积液征象。血常规：WBC：48000/mm3，中性粒细胞占83%，并伴核左移。医生初步诊断为肺炎、败血症（病原菌待查）。要求血培养+药敏。请问你将如何进行检验？并写出你的鉴定步骤与依据。
标本：血液—血培养—分离培养—鉴定并做药敏试验—报告
血培养：取血液标本5ml注入含50ml葡萄糖肉汤增菌液的培养瓶内，混匀后37℃培养18~24h，培养瓶内液体浑浊、溶血、并有胶冻状凝固。
分离培养：取增菌后培养物转种血平板上进行分离培养。
鉴定：取可疑菌落进行革兰染色、触酶试验、血浆凝固酶试验、发酵甘露醇（耐热核酸酶）。
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