2012年
一. 解释下列名词（每小题3 分，共30 分） 1. oxidative phosphorylation 2. 反义链或模板链 3. 亲合层析 4. 不对称转录 5. 脂肪酸的β-氧化作用 6. 减色效应 7. 酶的比活力
8. supersecondary structure 9. phosphopentose pathway 10. 沉降系数 二. 填空题（每空 0.5分，共20 分） 1. SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳其蛋白质分子的电泳迁移率主要取决于_ _，而聚丙烯酰胺凝胶电泳，蛋白质分子的迁移率取决于_ __。
2. 在有竞争性抑制剂存在时，酶催化反应的Vmax_ __，Km _ __。
+
3. 谷氨酸的pK1(α-COOH)=2.19，pK2(α-NH3)=9.67，pKR(R基)= 4.25，谷氨酸等电点为_ _。 4.核酸的一级结构中，脱氧核苷酸或核苷酸的连接具有严格的方向性，由前一个核苷酸的__ _与下一个核苷酸的___ 之间形成了3′,5′-磷酸二酯键。
5. 生物体中ATP的合成途径有三种，即__ _、 和__ _。 6. 一分子脂肪酸活化后需____转运才能由胞液进入线粒体内氧化，氧化产物乙酰CoA需经____ 才能将其带出线粒体参与脂肪酸合成。
7. 体内的脱氧核糖核苷酸是由各自相应的核糖核苷酸在__ _水平上还原而成的，催化UDP转变为dUDP的酶是 ___，此酶需要 ___和__ _为辅因子。此反应的最终供氢体是__ _。
8. 当RNA合成时，RNA聚合酶沿有意义链移动的方向是_ __，RNA链合成的方向是__ _。
9. 新合成的多肽链的加工修饰包括__ __、_ ___等。 10. 1961年，Jacob和Monod提出了关于原核生物基因结构及表达调控的__ _学说。该结构通常是由_ __ 、_ __、___ 三种成分组成。
11. 从A260/A280的比值可判断核酸样品的纯度，纯DNA的A260/A280应大于_ ，纯RNA的A260/A280应达到__ _。
12. 嘌呤核苷酸的嘌呤环上的第1位与第9位N原子分别来自于氨基酸_ _和__ __。 13. 乙醛酸循环含有__ _和 ___两个特异酶。 14. 核酸、变性核酸、水解后的核酸对260 nm的紫外吸收能力不一，其中_ __吸收能力最大，而___ 吸收能力最小，这是由于_ __。 15. 乳糖操纵子的诱导物是__ _，色氨酸操纵子的辅阻遏物是 ___。 16. 当DNA复制时，一条链是连续的，另一条是不连续的，称为_ __复制；复制得到的子代分子，一条链来自亲代DNA，另一条链是新合成的，这种方式叫_ _ _复制。 17. Sephadex G-25使蛋白质脱盐，从层析柱中首先洗脱下来的是 ___。 18. TPP的中文名称是__ _。 三. 选择题（每小题 1分，共10 分）
1. 下列关于DNA复制和转录的描述中哪项是错误的？( )
A. 在体内以一条DNA链为模板转录，而以两条DNA链为模板复制 B. 在这两个过程中合成方向都为5′→3′ C. 复制的产物通常情况下大于转录的产物 D. 两过程均需RNA引物
2. 病毒中具有mRNA功能的链称为( )。
A. (+)链 B. (-)链 C. 有意义链 D. 反意义链 3. 当DNA加热变性时，下列叙述错误的是？( )
A. 黏度下降 B. 沉降系数加大 C. 紫外吸收降低 D. 发生螺旋-线团转换
4. 典型的α螺旋是( )。
A. 2.610 B. 310 C. 3.613 D. 4.015 5. 长链脂肪酰CoA的β氧化作用是在( )细胞器上进行的。
A. 微粒体 B. 内质网 C. 线粒体 D. 细胞膜 6. 与mRNA的ACG密码子相对的反密码子是( )。 A. UGC B. TGC C. GCA D. CGU 7. 细胞内能荷高时，不受抑制的代谢途径是( )。
A. EMP途径 B. TCA循环 C. PPP途径 D. 氧化磷酸化 8. 通过代谢可转变为烟酸的氨基酸是( )。
A. Trp B. Phe C. Val D. Tyr 9. Km值的意义是指( )。
A. 与酶对底物的亲和力无关 B. 是V达到Vmax所需的底物浓度 C. 同一组酶的同工酶的Km值相同 D. 是V达到1/2 Vmax的底物浓度 10. Tm是指( )的温度。
A. 双螺旋DNA达到完全变性时 B. 双螺旋DNA开始变性时 C. 双螺旋DNA结构失去1/2时 D. 双螺旋结构失去1/4时 四. 判断题（每小题 0.5分，共10 分） 1. 胸腺嘧啶核苷酸只存在于DNA分子中。( )
2. 柠檬酸循环中底物水平磷酸化直接生成的是ATP。( ) 3. 核苷中碱基和糖的连接一般是C-C连接的糖苷键。( )
4. 糖酵解过程没有氧的消耗，但仍可进行氧化还原反应，而若没有无机磷酸的参加，则酵解反应将终止。( )
5. 盐析法可使蛋白质沉淀，但不引起变性，所以盐析法常用于蛋白质的分离制备。( ) 6. 非竞争性抑制作用可通过提高酶浓度的方式解除抑制作用。( ) 7. 真核生物的5S、18S、28 SrDNA通常组成一个单位进行转录。( )
8. 逆转录酶和DNA聚合酶一样，因都以4种dNTP为底物，合成DNA时都需要引物，都具有校对功能。( )
9. 寡聚酶一般是指由多个相同亚基组成的酶分子。( )
10 蔬菜中的β-胡萝卜素在人体内可以转化为维生素A。( ) 11. 细胞代谢的调节主要是通过控制酶的作用实现的。( )
12. 在蛋白质合成中，起始复合物合成时起始tRNA结合在核糖体的A位。( ) 13. 20种天然氨基酸都具有旋光对映体。( ) 14. 真核生物的冈崎片段比原核生物的要长。( )
15. 在熔解温度时，双链DNA分子会变为无序的单链分子。( )
16. 反密码子的第一位碱基若为I，它可与密码子第三位的A、U或C的密码子通过氢键配对结合。因此，当反密码子的第一个碱基为时I，这种tRNA可读三种不同的密码子。( ) 17. 磷酸肌酸分子中含高能磷酸键。( )
18. 酶的最适pH与酶的等电点是两个不同的概念，但两者之间有相关性，两个数值通常比较接近或相同。( )
19. 脂肪酸活化为脂酰CoA时，需要消耗2个高能磷酸键。( )
20. 二硫键和蛋白质的三级结构密切有关，因此没有二硫键的蛋白质就只有一级和二级结构。( )
五. 问答题（共80 分）
1. 简要说明为什么大多数球状蛋白质在溶液中具有如下性质：
①在低pH时沉淀；
②当离子强度从零增至高值时，先是溶解度增加，然后溶解度降低，最后沉淀； ③在等电点pH时溶解度呈现最小； ④加热时沉淀；
⑤在与水能混溶的有机溶剂中沉淀。 (10分)
2. 对比脂肪酸的合成与分解代谢，说明脂肪酸生物合成并非其氧化的简单逆转。(10分) 3. 请根据下面的信息确定蛋白质的亚基组成：①用凝胶过滤层析测定，分子质量是200 kDa； ②用SDS-PAGE测定，分子质量是100 kDa；③在β-巯基乙醇存在下用SDS-PAGE测定，分子质量是40 kDa和60 kDa。(10分)
4. 某生物化学家发现并纯化了一种新的酶，纯化过程及结果如下页表：
操作程序 1粗提取 2盐析沉淀 3 pH沉淀 4离子交换层析 5亲和层析 6排阻层析 总蛋白(mg) 20 000 5 000 4 000 200 50 45 活性(U) 4 000 000 3 000 000 1 000 000 800 000 750 000 675 000 根据表中结果：①计算每一步纯化程序后酶的比活性。②指出哪一步对酶的纯化最有效。③指出哪一步对酶的纯化无效。④表中结果能否说明该酶已被纯化？若估计酶的纯化程度还需要做些什么？⑤若该单纯酶由682个氨基酸残基组成，该酶的相对分子质量约为多少？(10分)
5. 运用操纵子模型解释酶的阻遏。(10分)
6. 为什么蛋白质在细胞中能保持相对的稳定性？(10分) 7. 层析法均采用交联的多聚物作为支持介质，为什么在凝胶过滤时相对分子质量小的蛋白质有较长的停留时间，而在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时它又跑得最快？(10分) 8. 分离蛋白质混合物的方法很多，选择不同的分离方法主要参考蛋白质在溶液中的哪些特性？若有一批含大量无机盐的蛋白样品需要你纯化，你将选择什么样的方法？说明理由。(10分) 11年
一，名词解释
1、前馈激活 2、操纵子 3、增色照应 4、酶的比活力 5、pentose phosphate pathway 6、级联系统 7、biological oxidation 8、不对称转录 9、Km 10、共价调节酶 二、填空题
1.蛋白质的组成单位是 ，当ph=pI时，蛋白质主要以 形式存在。脯氨酸与茚三酮反应产生 色物质
2.核黄素构成的辅酶是 和 。
3.参与嘌呤核甘酸合成的氨基酸有 ， 和 。
4，在线粒体外膜脂酰CoA合成酶催化下，游离脂肪酸与 和 反应，生成脂肪酸的活化形式 ，再经线粒体内膜上的 系统进入线粒体衬质。 5，乙醛酸循环中两个关键酶是 和 ，使异柠檬酸避免了在 循环中的两次脱羧反应，实现了从乙酰CoA净合成三羧酸中间物 的目的。
6，解释氧化磷酸化作用机制被公认的学说是 ，他是英国生物化学家 于1961年提出来的。该学说主要论点认为呼吸链组分定位于 内膜上。其递氢体有 作用，因而造成内膜两侧的 差，同时被膜上 合成
酶所利用、促使ADP＋Pi→ATP。
7.酶的活性中心包括 和 两个功能部位，其中 直接与底物结合，决定酶的专一性， 是发生化学变化的部位，决定催化反应的性质。
8.DNA变性后，紫外吸收 ，粘性 ，浮力密度 ，生物活性将 。 三，选择题
1.抗霉素A是一种
A 解偶联剂 B传递链的抑制剂 C ATP酶的抑制剂 D以上都不对 2，利用操纵子控制酶的合成属于哪种水平的调节
A翻译后加工 B翻译水平 C转录后加工 D 转录水平 3.在嘧啶核甘酸的生物合成中不需要下列哪种物质
A氨甲酰磷酸 B天冬氨酸 C谷氨酰氨 D核糖焦磷酸 4，脂肪酸从头合成的酰基载体是
A ACP B COA C生物素 D TPP 5,TCA循环中发生底物水平磷酸化的化合物是
A α-酮戊二酸 B 琥珀酰 C 琥珀酸CoA D苹果酸
6.我国生化工作者在国际上首次人工合成有活性的结晶牛胰岛素的时间是 A 1945年 B 1954 年 C 1965年 D 1975年 7.竞争性抑制的动力学特点是
A Km不变，Vmax升高 B Km升高，Vmax不变 C Km降低，Vmax降低 D Km升高，Vmax降低 8.形成稳定的肽链空间结构，非常重要的一点是肽键中的四个原子以及和他相邻的两个α-碳原子处于
A 不断绕动状态 B 可以相对自由旋转
C 同一平面 D 随不同外界环境而变化的状态 9.目前公认的酶与底物结合的学说是
A 活性中心学说 B 诱导契合学说 C 锁匙学说 D中间产物学说 10.具有生物催化剂特征的核酶其化学本质是
A 蛋白质 B RNA C DNA D 糖蛋白 四，判断题
1.紫外线照射可使DNA互补双链间形成T∧T 2.所有的终止子都依赖ρ因子
3.一个肽平面是由一个氨基酸残基构成的 4.DNA复制需要RNA引物
5.氨基酸组成的相同蛋白质一定具有相同的构象 6.组成多酶复合体的各种酶都是同工酶
7.脂肪酸的从头合成需要柠檬酸裂解提供乙酰CoA 8.脂肪酸β-氧化酶系存在于胞桨浆中
9.维生素E不容易被氧化，因此可做抗氧化剂
10.E.coli RNA聚合酶的α亚基与转录的终止识别有关 五，问答题
1.DNA和RNA各有几种合成方式，各由什么酶催化新链的合成？ 2.以乳糖操纵子为例说明酶诱导合成的调控过程
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