组织培养实验四-生根培养

实验四 植物生根培养

一、目的要求

通过在超净工作台上进行无菌操作训练 掌握试管苗生根操作技术。 二、基本原理

试管苗增殖阶段要将增殖的嫩枝进行壮苗和生根培养。多采用1/2MS。 本实验以菊花为例，学习生根培养的操作技术。 三、材料与用具

1．设备与用具 超净工作台、70％的乙醇、95％的乙醇、盛有培养基的培养瓶、接种器械（主要指剪刀、镊子等）、酒精灯、无菌纸。

2．材料 菊花的试管苗。 四、方法步骤

1．准备生根培养基，培养基为1/2MS+蔗糖+琼脂。

2．将接种需用的消毒剂、接种用具、酒精灯、烧杯、无菌水、无菌培养皿、培养基等置于超净工作台的接种台面；打开超净台的电源开关，打开鼓风开关（调节送风量），并打开紫外灯消毒20min，之后关掉紫外灯，继续送风20min，打开荧光灯开关，准备接种。

3．无菌操作前，将双手用70%乙醇棉球擦拭消毒，剪刀、镊子等金属工具在用酒精灯外焰灼烧灭菌，后置于支架上冷却备用。

4．无菌纸置于超净工作台，打开包纸，用镊子将无菌纸取出，置于操作人员的正前方。 5．在酒精灯火焰处打开外植体材料瓶，将植物材料用无菌的镊子取出置于无菌纸上。 6．一手持镊子，一手持剪刀，将植物材料按照要求切割。切割时，应尽可能使单株上的茎、叶保持完整，切去原来的变褐根，仅留色白、幼嫩的根。依照形态学上端向上，形态学下端向下的原则，将材料接种于生根培养基中，每瓶可适当多接材料，分布要均匀。同时宜将大小较一致的材料接种于一瓶中，以便移栽时，每瓶中材料大小一致。

7．将接好的培养瓶暂时放在超净工作台上，材料接完后一块取出培养瓶。在标签上写

上植物编号，日期、班级、学号，放于培养箱中进行培养。

8．接种结束后，关闭和清理超净工作台，并清洗用过的玻璃器皿等。 五、结果与分析（附图）