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生物分离工程部分习题和答案

来源:用户分享 时间:2025/6/17 2:11:27 本文由loading 分享 下载这篇文档手机版
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碟式离心机:(人工排渣式、喷嘴排渣式、活塞排渣式等) 螺旋卸料沉降离心机 离心过滤机 三足式离心机

9 试比较固液分离中过滤和离心分离技术的特点。

答:过滤在结晶体类、颗粒相对较大时(非粘性物料)的处理时较好用。离心在颗粒细微(最小可达到纳米级别),或是粘性物料处理时比较合适。

10 高压匀浆与高速珠磨破碎法各有哪些优缺点?

答:高压匀浆:优点是细胞经历了高速造成的剪切、碰撞、高压到常压的变化,从而造成细胞破碎。

缺点是较容易造成堵塞的丝状真菌、放线菌以及较小的G+菌不适合用本法。

? 能耗:蛋白质与酶的失活主要是由于匀浆过程中产生热所至。将温度控制在

35?C以下,损失可以忽略不计。

? 高压匀浆一般需多级循环操作,每次循环前需要进行级间冷却。 ? 压力可提高细胞破碎效果,但同时需要增加能耗和带走热量付出的代价。 ? 主要能耗是高压和维持低温操作能量消耗。 高速珠磨破碎法:

破碎率与能耗成正比。增加装珠量或延长破碎时间或增加转速均可提高破碎率,但同时能量消耗和产热增加,提高了制冷费和总能源消耗量。当破碎率≥80%,能耗急剧增加。

11 比较工业常用的过滤设备优缺点。离心与过滤各有什么优缺点?

答:板框过滤机的优点是过滤面积大、过滤压力可较大幅度调整和耐受较高压力差,应用

范围广;结构简单,价廉,动力消耗少;

缺点是不能连续操作,劳动强度大,卫生条件差,非生产周期长。 加压叶滤机:在密闭条件下操作,适应无菌过滤;机械装卸简单,清洗容易; 价高,更换过滤介质困难。

转鼓真空过滤机:能连续操作和自动化生产; 压差小,主要适应于霉菌发酵液。

离心法分离液体和固体的优点是技术容易掌握,分离结果重复性好,通过增加转速和延长离心时间可以使得一些难以过滤的物质(细胞碎片等)沉降下来,但缺点是难以除去一些密度较小的物质。生产投资较高,噪声较大等。

过滤技术难以掌握,影响因素很多,常出现颗粒泄漏和膜堵塞等问题,生产中稳定性不如离心好,常需要有经验的工人从事操作。但如果分离介质选择恰当和掌握好技术,对于一些密度差小离心难以分离的颗粒物质常可全部除去。

第三章 沉淀与结晶

一 解释名词

沉 淀: 由于物理环境变化(加入试剂、加热等),改变溶剂和溶质的能量平衡来降低溶质溶解度,使溶质生成固体颗粒沉降析出的现象。 结 晶: 从均匀液相或气相形成一定形状、大小的分子、原子或离子有规则排列的固体颗粒的过程。(工业结晶一般以液相为主)

盐 析: 蛋白质在高离子强度溶液中溶解度降低产生沉淀的现象。

盐 溶: 低盐离子强度下,随着离子强度增加蛋白质溶解度升高的现象。

盐析结晶: 在高离子强度溶液中,蛋白质形成一定形状、大小的分子、原子或离子有规则排列的固体颗粒的过程。

盐析沉淀: 由于溶液中离子的加入试剂,改变溶剂和溶质的能量平衡来降低溶质溶解度,使溶质生成固体颗粒沉降析出的现象。

硫酸铵饱和度: 指在100g硫酸铵溶液中硫酸铵在溶液中所占质量分数。

晶 种: 在结晶法中,通过加入不溶的添加物即晶种,形成晶核,加快或促进与之晶型或立体构型相同的对映异构体结晶的生长。 晶 核:晶体的生长中心。 晶 型:

饱和溶液:如果向溶剂中加入足够量的固体溶质,一定时间后溶剂中的溶质浓度不再升高,溶质在固液之间达到平衡,此时溶液中的浓度称为溶解度或饱和浓度;该溶液称为饱和溶液。 过饱和溶液:一定温度、压力下,当溶液中溶质的浓度已超过该温度、压力下溶质的溶解度,而溶质仍不析出的现象叫过饱和现象,此时的溶液称为过饱和溶液。 饱和度:某种溶液的饱和度是指在100g该溶液中溶质在溶液中所占质量分数。

二 简答题

1 根据加入沉淀剂的不同沉淀分离主要包括哪几类? 答:沉淀分离的主要方法: 1)盐析沉淀法

2)有机溶剂沉淀法

3)|pH水 – p I| Value调节法 4)亲水聚合物沉淀法 5)聚电解质絮凝法

6)高价金属离子沉淀法 7)亲和沉淀法

2 常用的蛋白质沉淀方法有哪些?有机溶剂沉淀蛋白质的机理什么?用乙醇沉淀蛋白质时 应注意哪些事项?

答:①常用的蛋白质沉淀方法有:

蛋白质盐析沉淀、蛋白质等电点沉淀、有机溶剂沉淀法及运用沉淀动力学沉淀法等。

②有机溶剂沉淀蛋白质的机理是:

向蛋白质溶液中加入有机溶剂,水的活度降低。随着有机溶剂溶度的增大,水对蛋白质分子表面荷电基团的水化程度降低,液体的介电常数下降,蛋白质分子间的静电引力增大,从而凝聚和沉淀。

③用乙醇沉淀蛋白质时 应注意的事项:

1、低温条件下操作可以提高收率和减少蛋白质失活变性(加入有机溶剂为放热反应); 2、采用的有机溶剂必须与水互溶,与蛋白质不发生作用; 3、蛋白质分子量越大,需要加入的溶剂量越少;

4、一种蛋白质的溶解度常会因为另一种蛋白质存在而降低; 5、沉淀的蛋白如果不能再被溶解,可能已经变性;

6、很多酶和蛋白质在20-50%(V/V)就能产生沉淀;当溶剂量达到50%时,通常只有 分子量≤1500的蛋白留在溶液中;

7、PH=PI时,需要加入的溶剂量减少;

8、盐析法沉淀的蛋白质采用有机溶剂精制时必须与先进行透析。 3 影响盐析的主要因素有哪些?在工艺设计中如何应用?

答:用Cohn经验公式来看 lgS=-β--KsI

影响盐析的主要因素有:

β:与蛋白质种类、温度、pH有关,与无机盐种类无关

Ks:与无机盐种类、蛋白质种类(不同蛋白之间溶解度相差不超过1倍)有关,与温 度、pH无关.

在工艺设计中如何应用? 4 如何确定盐析过程中需要加入硫酸铵的量?

答:0~300C 溶解度变化很小,加入水中后溶液体积会变大(必须考虑到)。 200C 1L加至饱和浓度时体积变大为:1.425L(实际应加入) 761g

因此,要使1L溶液浓度由M1增加到M2需要加入多少克(NH4)2SO4需要按下式计算:

200C时—— G=533(M2-M1)/(4.05-0.3M2)或533(S2-S1)/(100-0.3S2) 00C时—— G=505(M2-M1)/(3.825-0.285M2)或505(S2-S1)/(100-0.285S2) 5 简述有机溶剂沉淀的原理。

答:有机溶剂沉淀的原理: ①亲水性有机溶剂加入溶液后降低了介质的介电常数,使溶质分子之间的静电引力增加,聚集形成沉淀;②水溶性有机溶剂的水合作用降低了自由水的浓度,压缩了亲水溶质分子表面原有水化层的厚度,降低了它的亲水性,导致脱水凝集。 6沉淀与结晶有何不同?

答:结晶为同类分子或离子以有规则排列形式析出,沉淀为溶质分子或离子以无规排列形式析出,构成成分复杂(目标分子、杂质、溶剂等)。

(沉淀与结晶的联系: 在本质上都是新相析出的过程,主要是物理变化,当然也存在化学反应的沉淀或结晶。)

7 结晶操作的原理是什么?常用结晶器包括哪两种类型?如何选择结晶设备? 答:结晶操作的基本原理:使溶液处于过饱和状态。

工业结晶设备主要有: 冷却式、 蒸发式(常压蒸发、减压蒸发)

结晶器的选择:根据目标产物溶解度曲线确定——目标产物溶解度随温度升高而显著升高则可选用其中任何一类;否则只能选用蒸发式结晶设备。 8 粒子大小与溶解度有何关系?

答:粒子大小与溶解度:颗粒直径越小,溶解度越大。

溶解度还与颗粒大小有关,微小颗粒的溶解度大于较大直径的颗粒。从热力学方法可得 到颗粒大小与溶解度的关系:

( C 普遍晶体溶解度 Cs半径为rc的晶体溶解度 σ结晶界面张力 Vm晶体摩尔体积 R气体常数 T绝对温度 ) 9 有哪些方法造成溶液过饱和? 答:冷却;蒸发结晶;加溶质。

10 绘制饱和温度曲线和过饱和温度曲线,并标明稳定区、亚稳定区和不稳定区。并简述其意义

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