一.培养基：微生物生存的环境和营养物质 1.基本成分：
（1）碳源：分无机碳源：CO2、CO32-、HCO3-主要用来培养自养微生物 有机碳源：牛肉膏、蛋白胨等，主要用来培养异养微生物
（2）氮源：分无机氮源：NH4＋、NO3-（为硝化细菌提供N源和能源） 有机氮源：牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等
教师强调：含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源。 2.特殊营养：维生素、碱基等（生长因子）（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有） 3.pH、氧气的需求：
思考：不同的微生物培养时所需要的培养基成分相同吗？
不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 (参考教材附录3内容)
教师总结：不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、 无机盐等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方。 学生自主分析其营养构成？ 思考探究：
1.牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供哪些营养物质？
糖 、维生素 和 有机氮 等营养物质。
2.培养乳酸杆菌时培养基需要特殊添加什么物质？ 维生素
3.培养霉菌时需要如何调节培养基的pH？将培养基pH调节为 酸性 4.培养细菌时需要如何调节培养基的pH？将pH调节为 中性或微碱性 。 二. 配制原则
①目的要明确：根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。 ②营养要协调：培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。例如：碳氮比4∶1时，谷氨酸棒状杆菌大量繁殖而产生谷氨酸少；碳氮比为3∶1时，菌体繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。
③pH要适宜：细菌培养基pH中性或偏碱性，霉菌培养基呈酸性。 典例精析
例3.牛肉膏与蛋白胨中的牛肉膏能为细菌提供的营养成分是（ ） A.无机盐 B. 提供碳源、氮源等 C.不能为微生物提供生长因子 D.只是碳源 答案：B。
[解析]牛肉膏与蛋白胨培养基是一种应用十分广泛的天然培养基,其中的牛肉膏为微生物提供碳源、磷酸盐和维生素,蛋白胨主要提供氮源和维生素,还可以提供生长因子.
2.无菌技术
探究新知：学生阅读课本“无菌技术”，讨论回答下列问题： 消毒方法：
（1）日常生活经常用到的是 煮沸 消毒法；
（2）对一些不耐高温的液体，则使用 巴氏 消毒法（作简要介绍）；
（3）对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒 石炭酸或煤酚皂 等溶液以增强消毒效果，然后使用 紫外线 进行物理消毒。
（4）实验操作者的双手使用 酒精 进行消毒； （5）饮水水源用氯气 进行消毒。 灭菌方法：
（1）接种环、接种针、试管口等使用 灼烧 灭菌法；
（2）玻璃器皿、金属用具等使用 干热 灭菌法，所用器械是 干热灭菌箱 ； （3）培养基、无菌水等使用 高压蒸汽 灭菌法，所用器械是 高压蒸汽灭菌锅 。 （4）表面灭菌和空气灭菌等使用 紫外线 灭菌法，所用器械是 紫外灯 。 2.1.消毒与灭菌：获得纯净培养物的关键是 防止外来杂菌的入侵。
教师总结：课件展示消毒与灭菌的器材和区别。补充芽孢和孢子（课件展示）
芽孢：有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌。
孢子：细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖作用的生殖细胞。能直接发育成新个体。
思考：请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 高压蒸汽灭菌 （2） 玻璃棒、试管、烧瓶和吸管 高压蒸汽灭菌或灼烧灭菌
（3） 实验操作者的双手 酒精消毒 典例精析
例4.灭菌的标准是（ ）。
A. 杀死所有的病原微生物 B. 杀死所有的微生物 C. 杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子 D.使病原菌不生长 答案：C
[解析]灭菌是指使用强烈的理化因素，杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 2.2. 无菌技术的范围： 1.无菌技术包括：
（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 清洁和消毒 ； （2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行 灭菌 ；
（3）为避免周围微生物污染，实验操作应在 酒精灯火焰附近 旁进行； （4）避免已灭菌处理的材料用具与 周围物品 相接触。 2.无菌范围：实验操作空间消毒、操作者的手、衣着消毒 实验用具灭菌、实验操作过程、酒精灯旁操作
思考：无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是？ 防止感染实验操作者 。 典例精析
例5.将配制好的培养基进行灭菌应用() A．灼烧灭菌 B．高压蒸汽灭菌 C．干热灭菌 D．煮沸灭菌 答案：B
[解析]培养基要用来培养微生物。，所以要严格无菌，包括芽孢和孢子，即灭菌。
课堂小结
本节课可以结合前面果酒果醋制作等实际生产实例导入，使学生认识在微生物的培养过程中，保持培养物纯净的重要性。由于微生物的微观性和危害性，引入无菌技术，并强调无菌技术的范围，教育学生一定要培养良好的卫生习惯，不吃长毛的或过期的食品，防止杂菌污染。
课后习题
１、收集生活中与微生物有关的实例，并通过所学知识对其进行解释 ２、我们打针输液时，首先要用酒精擦拭针刺处，为什么？
板书
专题2 微生物的培养与应用 课题2.1 微生物的实验室培养
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