SDA

3、创新点：

目前，国内外SDA技术检测病原菌的报道较少，SDA技术检测食品病原菌未见报道，SDA技术检测食品病原菌的试剂盒亦未见报道。

四、经济效益和社会效益分析及成果推广方式

1、经济效益

本项目完成后，将开发出SDA技术检测常见病原菌试剂盒，仅试剂盒销售一项，每年可产生几百万元的经济效益。另外，该试剂盒可以快速检出食品病原菌，保证了食品质量，避免食物中毒发生，亦使企业避免了经济损失，可为企业间接产生较大的经济效益。

2、社会效益

本项目完成后，可及时检出食品病原菌，避免发生食物中毒，保证消费者身体健康，提高企业的食品质量，保证企业的信誉。

3、成果推广方式

本项目完成后，申请发明专利，与相关企业采取合作的方式，将其产业化。可先在行业内推广，形成一定认知度以后，再向相关企业推广。

五、实施年限、经费概算与资金筹措

1、年度计划：

（1）2011年 设计扩增两对引物，选择限制性核酸内切酶，优化反应体系，对引物、限制性核酸内切酶、SDA聚合酶温度、时间

等因子进行优化，建立SDA方法，对SDA方法进行评价。

（2）2012年 设计不同的扩增引物，测试引物的特异性。研究食品中病原菌DNA的高效提取方法，优化反应条件建立SDA法检测六种食品病原菌的方法。确定SDA法的灵敏度和检出限，对检测食品病原菌的方法做出评价。

（3）2013年 试剂盒质量控制技术、检测效果评价和质量标准的建立，试剂盒的应用，SDA检测食品中常见病原菌方法标准的建立。

2、经费概算与资金筹措 （1）科研业务费：16万元

测试费，水电费，学术会议、学术交流，发表论文、文献查阅、资源交流、成果鉴定

（2）试验材料费：18万元 酶，试剂盒及各种生化试剂 （3）仪器设备费：1万元 多个恒温器

（4）协作费：18万元 （5）其它费用：4万元 （6）管理费：3万元 共计60万元

六、 现有条件和必要的支撑条件、组织措施及实施方案

本项目组拥有病原菌分子检测和常规检测所需的各种试验设备，

包括PCR仪、凝胶成像系统、电泳仪、恒温培养箱、生物安全柜、生物安全实验室，完全可以满足本课题的需要。

课题组成员由具有多年教学、科研经验的教授、博士、硕士组成，近年来，主要从事PCR、荧光定量PCR、基因芯片和环介导等温扩增技术（LAMP），检测食品病原菌的研究，在食品病原菌分子检测方面积累了一定得经验。本项目组现已收集大量食品病原菌，已对SPIA扩增方法进行了尝试，取得了较好的效果。近年来，在病原菌检测与控制方面发表了几十篇论文，在分子生物学领域取得了多项成果。

发表的论文和出版的著作：

1. 改良环介导等温扩增技术快速检测婴儿配方奶粉中的岅岐肠杆菌.微生物学报,2009,3. 通讯作者

2. FTA滤膜用于PCR检测肉中的金黄色葡萄球菌研究.生物工程学报, 2005,6. 通讯作者

3. PCR检测乳品中的金黄色葡萄球菌.中国农业科学 2006,5. 通讯作者

4. An Improved Template Preparation Tehnique for PCR Assay for detection of Enterobacter Sakazakii inInfan Formula.ICBBE,2008.(EI收录) 通讯作者

5. Analysis of bacterial foodborne disease outbreaks in China between 1994 and 2005.2007,8 FEMS.（SCI收录）通讯作者

6. Rapid detection of Bacillus cereus in pasteurized milk using

loop-mediated isothermal amplification method and FTA filtering technique. Journal of Biotechnology,2008.（SCI收录）通讯作者

7. A TaqMan based real-time PCR assay with the internal amplified control for the detection ofEnterobacter sakazakii in infant formula.ICBBE ,2009(EI收录) 通讯作者

8. Study on Loop-mediated Isothermal Amplification Assay for Detection of Salmonella in Meat Products.ICBBE,2009.(EI收录) 通讯作者

9. 五重PCR检测转基因大豆.中国粮油学报, 2008,3 . 通讯作者 10.用于PCR检测的乳品中金黄色葡萄球菌DNA提取方法比较研究.食品与发酵工业,2005,(9). 通讯作者

11.反转录PCR技术检测贝类中诺瓦克样病毒的研究.中国食品学报,2008,4. 通讯作者

12. FTA滤膜用于基因芯片检测肉中常见食源性致病菌的研究.中国食品学报,2008,4. 通讯作者

13. LAMP检测蜡样芽胞杆菌研究.中国食品学报,2009,3. 通讯作者

14. LAMP检测单核细胞增生性李斯特氏菌的研究.中国食品学报,2009,3. 通讯作者

15. FTA滤膜与多重PCR结合检测肉中3种食源性致病菌.中国食品学报,2009,4. 通讯作者

16.肉中金黄色葡萄球菌PCR检测模板制备方法. 食品与发酵工