焦糖色中焦糖色中4-甲基咪唑的检测

焦糖色中4-甲基咪唑的检测

桂林红星谢长兴

现行国标GB8817-2001用薄层法检测，人为因素影响大，操作复杂，且GB8817中本身存在明显的错误，在判定不合格时，会出现很多争议。

国标修改草案对此进行了修改，采用气相色谱法，是从FCC引用过来的。

附 录 A 检验方法

A.1 4-甲基咪唑的测定

A.1.1 方法提要

在选定的工作条件下，使试样气化后经色谱柱分离，用火焰离子化检测器检测，用外标法定量。

A.1.2 试剂和材料

A.1.2.1 氢氧化钠溶液：3 mol/L。 A.1.2.2 丙酮：色谱纯。

A.1.2.3 4-甲基咪唑标准品：纯度≥99 %。 A.1.2.4 硅藻土：色谱纯。 A.1.2.5 二氯甲烷。

A.1.2.6 水：GB/T 6682-2008中规定的一级水。

A.1.2.7 氮气：其体积分数不低于99.8 %。使用前需用脱水装置、硅胶、分子筛或活性炭等进行净化处理。

A.1.3 仪器和设备

气相色谱仪：配有火焰离子化检测器，整机灵敏度和稳定性应符合GB/T 9722的规定。 A.1.4 参考色谱条件

推荐的色谱柱和典型色谱操作条件见表A.1。其他同样能达到同等分离程度的色谱柱和色谱操作条件均可使用。

表A.1 推荐的色谱柱及典型色谱操作条件

色谱柱 柱长×柱内径 柱温 进样口温度 检测器温度 载气 流速 进样量 硅烷化玻璃柱或其他等效色谱柱，填料为90~100目 Anakrom ABS，含7.5 %聚乙二醇20M及2 %氢氧化钾，或其他等效物 1 m×4 mm 190℃ 200℃ 250℃ 氮气 50 mL/min 5.0 μL A.1.5 分析步骤

A.1.5.1 4-甲基咪唑标准贮备液的制备

准确称取50 mg 4-甲基咪唑标准品，置于50 mL容量瓶中，然后用丙酮稀释到刻度，充分混匀，冷藏保存备用。

A.1.5.2 4-甲基咪唑标准溶液的制备

量取1.0 mL、1.5 mL、2.0 mL、2.5 mL、3.0 mL、3.5 mL、4.0 mL及5.0 mL 4-甲基咪唑标准贮备液，分别置于10 mL容量瓶中，分别用丙酮稀释到刻度，混匀，制得浓度分别为100、150、200、250、300、350、400及500 μg/mL的4-甲基咪唑标准溶液。将4-甲基咪唑标准溶液冷藏保存，并在1个月内使用。

A.1.5.3 试样溶液的制备

称取10.0 g试样，置于一个250 mL烧杯中，加入5 mL氢氧化钠溶液，摇匀，使混合液的pH值超过12。然后，在烧杯中加入20.0 g硅藻土，用宽刃的不锈钢刮刀充分搅匀，直至形成半干、均一的混合物。

在一根300 mm×22mm（内径）、带聚四氟乙烯旋塞的色谱柱底部塞一块细玻璃棉，定量转移混合物至色谱柱中。柱层高大约150 mm，连续均匀，且易于洗脱。在柱顶部放置一块玻璃棉，然后让柱垂直落下一段距离，使内容物更坚实。用二氯甲烷清洗试样杯，打开旋塞，将溶液倾倒至柱中。待二氯甲烷通过色谱柱流至旋塞时关闭旋塞，让二氯甲烷停留在柱层中5 min。打开旋塞，让二氯甲烷以5 mL/min的流速通过柱子。收集200 mL洗脱液于一个300 mL圆底烧瓶中。将装有洗脱液的烧瓶置于旋转蒸发仪上，水浴温度维持在35℃，压力为350~390 mm汞柱，使大部分洗脱液中的溶剂蒸发掉，浓缩至大约1 mL。在浓缩过程中仔细观察烧瓶，确保试样不会因爆沸而损失。用吸管定量转移提取浓缩物至一个5 mL容量瓶中，用丙酮洗涤烧瓶数次（每次约0.7 mL），洗涤液全部转移至5 mL容量瓶中，最后用丙酮定容至刻度，彻底混匀，备用。

A.1.5.4 测定

根据仪器说明书，调节气相色谱仪至表A.1所示的操作条件，待仪器稳定后即可分别对不同浓度的4-甲基咪唑标准溶液和试样溶液进行色谱分析。用微量进样器或自动进样器进样，用色谱数据处理机或工作站处理计算结果，以外标法定量。

附：FCC原文见下页