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BG11液体培养配方

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BG11液体培养基就是: Stock1 定容100mL 柠檬酸 0.3g 柠檬酸铁胺 0.3g EDTANa2 0.05g

Stock2 定容1000mL NaNO3 30g K2HPO4 0.78g MgSO4·7H2O 1.5g

Stock3 定容100mL CaCl2·2H2O 1.9g

Stock4 定容100mL Na2CO3 2g

Stock5 定容1000mL H3BO3 2.86g MnCl2·4H2O 1.81g ZnSO4·7H2O 0.222g Na2MnO4·2H2O 0.391g CuSO4·5H2O 0.079g Co(NO3)2·6H2O 0.049g

Stock1 取用2mL Stock2 取用20mL Stock3 取用2mL Stock4 取用1mL Stock5 取用1mL 总定容 1000mL

D1 (Diatom medium)

Component Amount Stock Solution (1) NaNO3 1 mL/L 12 g/100ml dH2O (2) K2HPO4 1 mL/L 4 g/100 mL dH2O (3) MgSO4·7H2O 1 mL/L 7g/100 mL dH2O (4 ) CaCl2·2H2O 1 mL/L 2 g/100 mL dH2O (5 ) KH2PO4 1 mL/L 8 g/100 mL dH2O (6 ) Na2SiO3.9H2O 1 mL/L 10g/100ml dH2O (7) MnSO4 0.1mL/L 0.2g/100ml dH2O (8) 柠檬酸铁 1 mL/L 0.5g/100ml dH2O (9) A5 (Trace mental solution) 1ml/L H3BO3 2.86g/L dH2O MnCl2·4H2O 1.86g/L dH2O ZnSO4·7H2O 0.22g/L dH2O Na2MoO4.2H2O 0.39g/L dH2O CuSO4. 5 H2O 0.08g/L dH2O Co(NO3)2.6 H2O 0.05g/L dH2O (10) 土壤提取液 20 mL/L

土壤提取液配制方法:

取花园土未施过肥200g置于烧杯或三角瓶中,加入蒸馏水1000毫升,瓶口用透气塞封口,在水浴中沸水加热3小时,冷却,沉淀24小时,此过程连续进行

3次,然后过滤,取上清液,于高压灭菌锅中灭菌后于4℃冰箱中保存备用。

f/2 medium

Component Amount (1) NaNO3 75 mg/L (2) NaH2PO4 · 2H2O 0.6 mg/L (3) Vitamin B12 0.5 μg/L (4) Biotin 0.5 μg/L (5) Thiamine HCl 100μg/L (6) Na2SiO3 · 9H2O 10 mg/L (7) f/2 metals 1 mL/L Na2EDTA · 2H2O 4.4g FeCl3 · 6H2O 3.16 g CoSO4 · 7H2O 0.012g ZnSO4 · 7H2O 0.021g MnCl2 · 4H2O 0.18 g CuSO4 · 5H2O 0.007g Na2MoO4 · 2H2O 0.007g Distilled water 1000 mL (8) Seawater 1000 mL

BG-11是培养蓝藻使用最广泛的培养基,微量元素溶液 A5 是BG-11培养基微量元素的重要组成部分。

试剂名称 NaNO3 K2HPO4 MgSO4.7H2O CaCl2.7H2O Na2CO3 Citric acid(柠檬酸) Ammonium ferric citrategreen (柠檬酸铁铵)

g/L 1.5g 0.04g 0.075g 0.036g 0.02g 0.006g 0.006g 备注 或柠檬酸铁0.004g

EDTA 微量元素溶液 氨苄青霉素 (终浓度) 蒸馏水 * 微量元素溶液 A5 H3BO3 MnCl2.4H2O ZnSO4.7H2O Na2MoO4 CuSO4.5H2O Co(NO3)2.6H2O 0.001 g A5 1ml 50μg/ml 919ml 2.86g 1.81g 0.222g 0.39g 0.079g 0.049g A5溶液 1ml 参考:中科院水生生物研究所淡水藻种库

一、目的要求

了解培养基的配制原理。 了解培养基常规配制程序。

了解培养基配制过程各环节的要求和注意事项。

二、基本原理

正确掌握培养基的配制方法是从事微生物学实验工作的重要基础,由于微生物种类及代谢类型的多样性, 因而用于培养微生物培养基的种类也很多,它们的配方及配制方法虽各有差异。但一般培养基的配制程序却大致相同,例如器皿的准备,培养基的配制与分装,棉塞的制作,培养基的灭菌,斜面与平板的制作以及培养基的无菌检查等基本环节大致相向。 三、实验材科 (一)药品

待配各种培养的组成成分,琼脂,1mol/L NaOH溶液,1mol/L (升,统一用大写)HCl溶液。 (二)仪器

天平或台秤,高压蒸汽灭菌锅。 (三)玻璃器皿

移液管、试管、烧杯、量筒、锥形瓶、培养皿、玻璃漏斗等。 (四)其他物品

药匙、称量纸、pH试纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸等。 四、实验内容

(一)玻璃器皿的洗涤和包装 1.玻璃器皿的洗涤

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