项是a、c。（2）①根据物质的相互转化关系及产生B的分子式可推知：A是甲苯，结构简式是
，由于在甲基上有3个饱和H原子可以在各种下被Cl原子取
代，因此在光照射下除产生二氯取代产物外，还可能发生一氯取代、三氯取代，产生的物质有三种，因此步骤I中B的产率往往偏低。②卤代烃在NaOH的水溶液中，在加热条件下发生水解反应，由于一个碳原子上连接两个羟基是不稳定的，会脱去一个分子的水，形成醛基。步骤II反应的化学方程式为
。③根据图示可知：
步骤III的反应类型是醛与醛的加成反应。④C发生消去反应形成D：
，D含有醛基，被银氨溶液氧化，醛基被氧化变为羧基，因此
得到的肉桂酸的结构简式为。⑤C的同分异构体有多种，其中
若苯环上有一个甲基，而且是酯类化合物，则另一个取代基酯基的结构可能是HCOOCH2—、CH3COO—、CH3OOC—三种，它们与甲基在苯环上的位置分别处于邻位、间位、对位三种不同的位置，因此形成的物质的种类数目是：3×3=9种。 考点：考查有机物的结构、性质、转化、反应类型、化学方程式和同分异构体的书写的知识。 33．【生物-现代生物科技专题】（10分）
GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体（如图1所示），并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答：
（1）在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目的是 。 （2）构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的 限制酶进行酶切。 （3）经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有三种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接（如图1所示）。为
鉴定这3种连接方式，选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。图中第 泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。
（4）将正向连接的表达载体导入神经干细胞后，为了检测GDNF基因是否成功表达，可用相应的 与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到一定的密度时，需进行 培养以得到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。 【答案】（1）使细胞分散开 （2）XhoI （3）○2 （4）抗体 传代
【解析】选修本的理论测试重点在相关工程的理论基础和操作流程，一般题目要求难度不大，以记忆为主，记忆以操作流程为主干辅以理论基础。（1）动物细胞培养时，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶作用，使细胞分散开。
（2）质粒上有XhoⅠ识别位点，而且在启动子之后，所以选用XhoⅠ限制酶进行酶切。 （3）泳道①仅有一种条带，属于载体自连；泳道②有两种条带，且长度分别与质粒和GDNF基因长度相同，为正向连接；泳道③有两种条带，长度与BamHⅠ酶切后结果相同，为反向连接。
（4）检测基因是否表达采用抗原抗体杂交法。培养动物细胞采用动物细胞培养法，当细胞密度达到一定程度，需要进行分瓶，进行传代培养。
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