661(658＋3)bp三种。(3)图示方框内发生碱基对的替换后，形成的d基因失去了1个Sma Ⅰ的识别序列，故D基因、d基因用Sma Ⅰ完全切割后产物中除原有的3种长度的DNA片段外，还增加一种537＋790 bp的DNA片段。(4)目的基因的两端都有BamH Ⅰ的识别序列，质粒的启动子后抗生素A抗性基因上也有BamH Ⅰ的识别序列，故应选用的限制酶是BamH Ⅰ，此时抗生素B抗性基因作为标记基因，故筛选时培养基中要添加抗生素B。若重组质粒已导入了受体细胞却不能表达，很可能是因为用同种限制酶切割后，目的基因和质粒有两种连接方式，导入受体细胞的重组质粒可能是目的基因和质粒反向连接形成的。
8． 我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普
通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。如图为培育转基因水稻过程示意图，请回答：
(1)在上述工程中，铁结合蛋白基因称为__________，获取该基因后常用__________技术进行扩增。
(2)构建重组Ti质粒时，通常要用同种限制酶分别切割________________和__________。将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用________处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。 (3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以获得____________________________________；培养基3与培养基2的区别是____________________________。
(4)检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻__________________。 答案 (1)目的基因 PCR (2)含目的基因的DNA片段
质粒 CaCl2 (3)含有重组质粒的愈伤组织 生长素和细胞分裂素的浓度比例不同 (4)种子中铁含量
解析 本题中培育转基因水稻的目的是获得铁含量比普通大米高的大米，因此目的基因为铁结合蛋白基因，要大量获得一般采用PCR技术进行扩增。构建重组质粒要用同种限制酶切割含目的基因的DNA片段和质粒。将外植体培养成试管苗的过程要用到不同的培养基，各培养基最明显的差别在于所添加激素的比例不同。
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