戊巴比妥钠半数有效量的测定

药理学实验报告

实验：戊巴比妥钠半数有效量（ED50）的测定

一、实验目的和原理

测定戊巴比妥钠腹腔注射对小鼠催眠作用的ED50值。 戊巴比妥钠为巴比妥类镇静催眠药，用适当剂量给小鼠腹腔注射后产生的催眠效应，常用翻正反射的消失来判断，该指标仅有阳性（睡眠）和阴性（不睡眠）两种现象，属于质反应。质反应量效曲线的横坐标为对数剂量，而纵坐标采用阳性反应发生的频数时，一般为常态分布曲线。如改用累加阳性频数为纵坐标时，可以得到标准的S型曲线。该曲线的中央部分（50%反应处）接近一条直线，斜度最大，其相应的剂量也就是能使群体中半数个体出现某一效应的剂量，通常称为半数效应量。如效应为疗效，则称半数有效量（ED50）；如效应为死亡，则称半数致死量（LD50）。这些数值是评价药物作用强度和药物安全性的重要参数。

孙氏改进的Kaerber法的设计条件是：各组实验动物数相等，各组剂量呈等比数列，各组动物的反应率大致符合常态分布。若以Xm为最大反应率组剂量的对数，i为组间剂量比的对数，p为各组反应率，Pm为最高反应率，Pn为最低反应率，n为实验组数，则：

ED50＝lg-1[Xm－i（∑P－0.5）＋i/4（1－Pm－Pn）] 含0%及100%反应率时，

ED50＝lg-1[Xm－i（∑P－0.5）]

ED50的95％可信限＝lg-1（lgED50±1.96·S）

?P??P其中S＝i 二、实验材料

n?12

小鼠50只，1% 戊巴比妥钠（sodium pentobarbital solution）小鼠笼，天平，0.5ml或0.25ml注射器。 三、实验步骤

1、确定给药剂量：先以少量动物做预实验，以获得小鼠对戊巴比妥钠催眠反应率为100％的最小剂量（ED100）和反应率为0％的最大剂量（ED0）。然后在此剂量范围内，按等比数列分成几个剂量组（一般4～8组），各组剂量的公比（r）为 r＝n-1√ED100/ED0

求得r后，自第一剂量组（ED0）开始乘以r，可得相邻的下一个组的剂量。若共分为5个组，各组剂量分别为ED0、r·ED0、r2·ED0、r3·ED0、r4·ED0、r5·ED0。

2、给药：取体重25g左右的健康小鼠50只，查随机数字表，随机分为5个组，每组8只(除去极端重量小鼠2只)。按表1所列的各组给药浓度分别腹腔注射0.1ml/10g。

3、记录结果：以翻正反射消失为入睡指标，观察药物的催眠效应，记录各组腹腔注射后15min内睡眠鼠数，填入表1。 四、实验结果

表1 计算戊巴比妥钠ED50用表 组别 1 2 3 4 5

小鼠

药物浓度

给药剂量

对数

催眠鼠数 0 3 4 6 8

数 （mg/ml） （mg/kg） 剂量 8 8 8 8 8

2.0 2.6 3.5 4.6 6.0

20 26 35 46 60

1.3010 1.4150 1.5441 1.6628 1.7781

P 0

P2 0

0.375 0.141 0.500 0.250 0.750 0.563 1

1

根据表1的数据和上述公式可求得ED50=31.90 注意事项

1、为减少误差，由1人配药 2、保持环境安静

3、如果第一组出现阳性动物，则向下按公比增加一个低剂量组(d0=d1/r)

4、最后一组动物未全部阳性，向上增加一个剂量(dk+1=dkr)