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着与其所带电荷相反的电极移动
B.蛋白质在SDS-聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度完全取决于其所带净电荷多少 C.蛋白质在SDS-聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度基本取决于其相对分子质量的大小 D.电泳结果表明溶液中蛋白质可能有两种,但也可能只有一种
【解析】 蛋白质的氨基与羧基可发生解离,使其带正电或负电,在电场中发生迁移。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳所加的SDS可掩盖蛋白质本身所带电荷,故电泳迁移速度与本身所带电荷无关,而由其分子大小决定。SDS会使蛋白质解聚成单条肽链,故结果所示可能只有一种蛋白质(有两种肽链),也可能是两种蛋白质。
【答案】 B
14.动物血液常常被选作提取DNA和提取血红蛋白的实验材料,请回答下列有关问题: (1)提取DNA和提取血红蛋白,猪血都是适宜材料吗?为什么?
_______________________________________________________________。
(2)无论是提取DNA还是提取血红蛋白,都需要先用________对红细胞进行洗涤,其目的是________________。
(3)电泳是分离鉴定蛋白质的常规方法。下图为几种蛋白质通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的图谱,据图,你认为相对分子质量最大的蛋白质是__________,依此推理该样品在凝胶色谱法中最后流出的蛋白质应该是__________。
【解析】 (1)猪血是提取血红蛋白的适宜材料,不是提取DNA的适宜材料,因为其成熟红细胞没有细胞核,提取DNA应该用鸡血。
(2)提取DNA和血红蛋白,需要先用生理盐水对红细胞进行洗涤,其目的是去除杂蛋白。
(3)图为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的图谱,γ球蛋白离点样处最近,说明质量最大,清蛋白离点样处最远,相对分子质量最小;在凝胶色谱法中相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶颗粒内部的通道,路程长,移动速度慢;而相对分子质量大的蛋白质无法进入凝胶颗粒内部,路程较短,移动速度快,最后流出的蛋白质应该是相对分子质量最小的清蛋白。
【答案】 (1)猪血是提取血红蛋白的适宜材料,不是提取DNA的适宜材料,因为其成精品文档
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熟红细胞没有细胞核
(2)生理盐水 去除杂蛋白
(3)γ球蛋白 清蛋白
15.红细胞含有大量血红蛋白,红细胞的功能主要是由血红蛋白完成的,血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2,我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验,来提取和分离血红蛋白。根据材料回答下列问题。
(1)实验前取新鲜血液,要在采血器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是________________。
(2)在对样品进行处理及粗分离时,主要包括________________、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析等步骤。其中透析技术的原理是___________ __________________________________________________________________。
(3)同学甲利用琼脂糖凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离,在电泳过程中,影响蛋白质迁移速率的因素包括蛋白质分子的________、________以及分子的形状等。
(4)同学乙利用凝胶色谱法进行血红蛋白分离(如图一),他在操作中加样的正确顺序是__________,在执行图一中②所示操作时,色谱柱下端连接的尼龙管应该________(填“打开”或“关闭”)。
(5)图二、图三分别是同学甲、乙利用同一种样品分离得到的结果,则图三中与图二中蛋白质P对应的是________。
【解析】 (1)加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固。(2)对样品的处理及粗分离包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析等步骤。其中透析的原理是小分子
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可以自由进出透析袋(半透膜),而大分子不能通过。(3)电泳时,影响蛋白质迁移率的因素有蛋白质分子大小、带电性质及分子的形状等。(4)正确的加样顺序可依据样品在色谱柱及凝胶层中的渗入量进行分析,可以得出的是④①②③;同时进行②所示环绕加样时,应关闭下出口。(5)SDS-凝胶电泳装置是垂直的装置,此种电泳方法主要取决于蛋白质相对分子质量的大小,与电荷无关,同时加样在“-”极,通电后,样品蛋白质向“+”极移动,相对分子质量相对小的,移动距离大,因此从图二的电泳结果分析,P比N、M移向“+”距离大,说明P的相对分子质量相对比较小,因此洗脱出来的时间比较长,符合图三中的丙。
【答案】 (1)防止血液凝固 膜),而大分子不能通过 (3)大小
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红细胞的洗涤 小分子可以自由进出透析袋(半透带电性质 (4)④①②③ 关闭 (5)丙
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