竞赛时间: 15分钟
一、说明
1.本题满分100分,完成时间15分钟。 2.要求独立完成,不得相互询问或讨论。
3.考核成绩为操作过程评分、操作结果评分和考核时间评分之和。 4.全部操作过程时间和操作后处理时间计入时间限额。 二、实验原理
葡萄糖氧化酶(GOD)催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸(D-葡萄糖酸δ内酯),并产生过氧化氢:
???葡萄糖酸+2H2O2 葡萄糖+2H2O+O2?GOD在色原性氧受体(如联大茴香胺、4-氨基安替比林偶氮酚)的存在下,过氧
化物酶催化过氧化氢,氧化色原物质,生成有色化合物。其颜色深浅与血清葡萄糖含量成正比。 三、实验器材
小号试管3支、试管架1个、手动可调式移液器(已校正)2~20μl 1把及配套枪头、枪头盒、刻度吸管5ml或10ml一支、洗耳球一个、计时器、记号笔1支、托盘、722分光光度计、比色皿三个、水浴箱、滤纸、计算器、台面垃圾桶、废液桶、比色皿回收桶、试管回收桶、刻度吸管回收盘等。(学生准备红色粗体字部分的器材和试剂) 四、实验试剂
葡萄糖标准液应用液、蒸馏水、酶酚混合试剂。(学生准备红色粗体字部分的器材和试剂)
五、实验标本 质控血清(中生北控生物科技股份公司生产)。 六、操作步骤
取3支小试管,按表进行操作。 加入物(ml) 蒸馏水
葡萄糖标准应用液 血清
酶酚混合试剂
空白管 0.02 3.0
标准管 0.02 3.0
测定管 0.02 3.0
混匀,置37℃水浴中,保温10min,分光光度计波长505nm,比色杯光径1.0cm,以空白管调零,分别读取标准管和测定管的吸光度。 选手编号: 工位号: 标本号: 比赛日期:2015年 5 月 日 午 时 分
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七、数据记录与计算
1.数据记录.
标准管吸光度(A标)
测定管吸光度(A测)
裁判签名确认
2.计算血清葡萄糖浓度(写出计算公式及过程).(取小数点后两位)
裁判签名确认 八、报告
裁判签名确认
选手编号:___工位号: 标本号: 比赛日期:2015年 5 月 日 午 时 分 ????????????密??封??线??内??不??要??答??题???????????
第二届全国卫生职业院校检验技能竞赛 血糖测定(葡萄糖氧化酶偶联法)评分表 序号 1 项目 准备工作 (准备结束后举手
考核内容 着白大衣、帽、口罩、手套并按要求佩戴参赛签、仪表端庄、头发符合要求 报告参赛项目及序号 分值 3 项 漏缺一项 扣分标准 仪容、着装不整及漏缺某一1 1 扣得分 分
报告开始计时) 准备器材:小号试管3支、试管架1个、1把2~20μl移液器及枪头、枪头盒、刻度吸管5ml或10ml一支、洗耳球一个、记号笔1支、托盘、计时器。 准备试剂:标准液、蒸馏水、酶工作液。 缺选及多选及台面凌乱 1 试管无编号 空白管加蒸馏水 ①试管编号 ②空白管加蒸馏水20μl ③标准管加葡萄糖标准液20 μl 11 ④测定管加血清20μl ⑤各管分别加酶工作液3 ml ⑥各管置37℃水浴保温10分钟取出比色 2 标准管加葡萄糖标准 测定管加血清20μl 各管分别加酶工作液 加液顺序错(应先加量少再加量多) 加错液 加液量不准确 无混匀或混匀不规范 无水浴 操作 水浴时间不准确 左手使用加样枪 加样枪枪头混用 加样枪的使用 5 加样枪枪头液体未排尽 加样枪用完未退除枪头 用完未调至最大量程 取液未使用食指 液体误入洗耳球 读数时视线未与凹液面平 刻度吸管的使用 6 读数时刻度吸管内有气泡 放液时试管及试剂瓶未倾斜 刻度吸管内的剩余液体未倒入废液桶 无调波长或调波长不准 无调T0 ①调波长(505) ②将各管溶液倒入干燥清洁的比色杯,置比色槽中 ③调 “T 0” 和“T 100%”,重复2次 14 ④进行比色测定,记录读数,反应液倒回原试管 ⑤切断光路回位至显示器出现“0.0” 无调T100% 分光光度计闭盖预热 双手碰触比色杯光滑面 倒液后未用滤纸吸拭杯外壁 比色杯未正确放比色槽 显示器未稳定时读数 读数不准确 比色液体未达杯高一半 反应液无倒回原试管 试管的反应液未倒入废液桶 比色结束后未切断光路
1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 3 用722分光光度计比色
比色杯和试管未放入回收桶 原始记录填写完整、规范 单位正确 公式正确 计算过程及结果准确 报告单正确完整 相对误差(α)=(︱X-T5 计数结果 ︱/T) (X为计数值,T为靶值) 操作完成清理台面 将使用过的一次性物品弃入污物缸或指定位置。 仪器的保护 注意生物安全防护 7 8 9 实验后洗手 安全,规范,流畅,完成质量好 不延时,超过规定时间5分钟,终止比赛 合计 50 5 不完整、不规范 单位不正确 公式不正确 计算过程及结果不正确 报告不完整、不正确 α≤5% 5%<α≤60%, 扣分:(︱X-T︱/T)×50 α>60% 未清理 使用过的一次性物品未放入垃圾桶 损坏仪器 划伤手和血标本外流等 实验后不洗手 从生物安全,规范操作,完成质量等方面考虑 每超时1分钟 ,倒扣2分 1 1 1 1 1 1 0 50 1 1 1 1 1 1 4 数据与报告 6 文明操作 5 总体印象 完成时间 1 100 现场裁判签名: 结果评分裁判签名: 复核裁判签名: 现场裁判长签名:
选手编号:___工位号: 标本号: 比赛日期:2015年 5 月 日 午 时 分 ????????????密??封??线??内??不??要??答??题???????????
第二届全国卫生职业院校检验技能竞赛 形态学检验竞赛试卷 熟练掌握血液标本中各种外周血液细胞、细菌和疟原虫,粪便标本中的寄生虫(卵),尿沉渣标本中的各种细胞、管型、结晶和其他有形结构等的形态特点(详见附件),并在规定时间内做出正确判断。 镜下形态鉴别范围
序号
标本 范 围
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