第八章 蛋白质功能研究1 - 图文 

二、蛋白质相互作用研究策略和方法

（一）生化方法 （二）分子生物学方法

（一）生化方法

GST pull-down assay 亲和印迹 免疫共沉淀 化学交联

荧光共振能量转移 表面等离子共振技术 双分子荧光互补技术

1.GST(谷胱甘肽巯基转移酶) pull-down assay ?基本原理 靶蛋白-GST融合蛋白通过亲和作用固定在谷胱甘肽琼脂糖球上，可捕获与之相作用的目的蛋白，证实蛋白质间的相互作用。 该方法只是用于确定体外的相互作用。 应用：

1）确定目的蛋白与靶蛋白（protein X）间的新的相互作用

2）筛选已知的靶蛋白

2. 亲和印迹

蛋白质用PAGE胶分离后，转移到硝酸纤维素膜上，然后用特异性的蛋白质、肽段或配体来检测膜上的蛋白质，类似于western blot（使用抗体检测）。 复杂的蛋白质混合物，如全细胞裂解液，通过该技术可以直接分析，不需纯化。