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5.(16分)(2018·黄冈二模)微博传言手机上的细菌比马桶多。如图,央视和北京卫视通过实验展示调查结果。回答下列相关问题:
(1)配制培养基时,除了满足基本的营养条件外,还需要满足微生物生长对特殊营养物质、__________、__________的要求。
(2)据图,两电视台均采用________法接种,该方法需要________(多选)。 A.接种环 C.移液管 E.无菌水
(3)通过观察菌落的________________________________(写出两种),可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。
(4)按图操作的取样面积取样,实验员测定某手机屏幕的细菌数量。将10 mL菌悬液进行浓度梯度稀释,分别取0.1 mL稀释倍数为10的样品液接种到三个培养基上。培养一段时间后,统计菌落数分别为48、50、52,则该手机屏幕的细菌数为________个/平方厘米。该实验对照组应如何设置____________________
_________________________________________________________________ ______________________________________________________________。
【解析】(1)配制培养基时,除了满足基本的营养条件外,还需要满足微生物生长对特殊营养物质、pH以及O2(氧气)的要求。
(2)根据培养的效果图可以判断:两电视台均采用的接种方法是稀释涂布平板法。该方法在将菌液进行一系列浓度梯度稀释时,需使用E无菌水,用C移液管吸取1 mL培养的菌液或稀释液;涂布操作的流程为:将D涂布器浸在盛有酒精的烧杯中;取少量菌液(不超过0.1 mL)滴加到培养基表面;将沾有少量酒精的涂布器在B酒精灯火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却8～10 s;用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面,涂布时可转动培养皿,使菌液分布均匀。
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B.酒精灯
D.涂布器
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(3)通过观察菌落的形状、大小、隆起程度、颜色、光泽度、边缘形状等菌落特征,可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。
(4)按图操作的取样面积为5×5=25平方厘米。实验员测定某手机屏幕的细菌数量,将10 mL菌悬液进行浓度梯度稀释,分别取0.1 mL稀释倍数为10的样品液接种到三个培养基上,培养一段时间后,统计菌落数分别为48、50、52,则1 mL菌悬液的细菌数为(48+50+52)÷3÷0.1×10=5×10
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2
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个/mL,因此该手机屏幕的细菌数为5×10个/mL×10 mL÷25平方厘米=2×10个/平方厘米。为了排除无菌水或空白培养基被杂菌污染,确保平板上长出的菌落来自取样的手机和马桶,该实验对照组的设置为:培养基涂布0.1 mL无菌水放置于和实验组相同的条件下进行培养,或取未接种的空白培养基放置于和实验组相同的条件下进行培养。 答案:(1)pH O2(氧气) (2)稀释涂布平板 B、C、D、E
(3)形状、大小、隆起程度、颜色、光泽度、边缘形状
(4)2×10 取培养基涂布0.1 mL无菌水,放置于和实验组相同的条件下进行培养;或取未接种的空白培养基,放置于和实验组相同的条件下进行培养
6.(12分)(新题预测)“树橘柚者,食之则甘,嗅之则香”。橘子全身都是宝:不仅果肉的营养价值高,药用价值较高,其皮、核、络、叶都是“地道药材”。请回答下列问题:
(1)橘皮精油是一种广谱性的杀虫剂,具有很高的经济价值,常采用________法提取橘皮精油。若采取水中蒸馏法提取,橘皮精油的有效成分会发生部分水解和产生________________的问题。 (2)如图是提取橘皮精油的实验流程示意图:
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图中①过程处理的作用是______________________;③过程一般加入相当于橘皮质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4,其目的是_____________________________ __________________________。
(3)若想利用橘子生产果醋需要用到醋酸菌,醋酸菌的最适生长温度为________,当________________都充足时,醋酸菌可将柑橘汁中的糖分解成醋酸。
【解析】(1)由于橘皮精油的有效成分在水中蒸馏过程中会发生部分水解,同时水中蒸馏会导致原料焦糊问题,因此一般采用压榨法提取橘皮精油。
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(2)图中①过程是将干燥去水的橘皮用石灰水浸泡,该处理的作用是破坏细胞结构,分解果胶,防止橘皮压榨时滑脱,提高出油率。③过程为压榨,在压榨过程中一般加入相当于橘皮质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4,并将pH调至7～8,其目的是使橘皮精油易于与水分离。
(3)醋酸菌的最适生长温度为30～35 ℃,当氧气和糖源都充足时,醋酸菌可将柑橘汁中的糖分解成醋酸。
答案:(1)压榨 原料焦糊
(2)破坏细胞结构,分解果胶,防止橘皮压榨时滑脱,提高出油率 使橘皮精油易于与水分离 (3)30～35 ℃ 氧气和糖源
7.(12分)青霉素是抗菌素的一种,是指分子中含有青霉烷、能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用的一类抗生素,是从青霉菌中提取的抗生素。青霉是生产青霉素的主要菌种,广泛分布于土壤、空气及腐败的有机材料中。回答下列有关问题:
牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成和含量 培养基成分 牛肉膏 蛋白胨 NaCl H2O 含量 5 g 10 g 5 g 定容至1 000 mL (1)上表培养基可为微生物提供的营养成分有________________________。若要培养获得点青霉的单菌落,还需在上述成分的基础上加入___________________ __________________。 (2)除了提供微生物生长所需的各种营养成分外,培养基还需要满足微生物生长对pH、
__________________________以及________________________的要求。培养点青霉的培养基灭菌前需将pH调至________。
(3)通过稀释涂布平板法培养点青霉单菌落时,需对接种的菌液进行稀释,目的是____________________________。
(4)一个与空气意外接触过的金黄色葡萄球菌培养皿中长出了一团蓝绿色霉菌(即点青霉)。再用显微镜观察培养皿时发现,霉菌周围的葡萄球菌菌落已被溶解。现已获得一株点青霉菌株A,请通过实验判断该菌株是否具有杀菌力,写出实验思
路:_____________________________________________________________ ________________________________________________________________。
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【解题指导】解答本题的技巧:
预判断该菌株是否具有杀菌力,需将该菌株和无菌水分别接种到培养金黄色葡萄球菌的培养基上。
【解析】(1)上表培养基可为微生物提供的营养成分有碳源、氮源、水、无机盐、维生素(缺一不可)。若要培养获得点青霉的单菌落,还需在上述成分的基础上加入琼脂、青霉素。
(2)除了提供微生物生长所需的各种营养成分外,培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。培养点青霉的培养基灭菌前需将pH调至酸性。
(3)通过稀释涂布平板法培养点青霉单菌落时,需对接种的菌液进行稀释,目的是使菌液中聚集在一起的微生物分散成单个细胞,便于在培养基表面形成单菌落。
(4)在两个生长着等量金黄色葡萄球菌菌落的培养基平板上分别接种等量的A菌液和无菌水,相同条件下培养一段时间,观察、比较两培养基平板上金黄色葡萄球菌的菌落数量(或者接种等量的培养菌株A的培养液和无菌水)
答案:(1)碳源、氮源、水、无机盐、维生素(缺一不可) 琼脂、青霉素 (2)特殊营养物质 氧气 酸性
(3)使菌液中聚集在一起的微生物分散成单个细胞,便于在培养基表面形成单菌落
(4)在两个生长着等量金黄色葡萄球菌菌落的培养基平板上分别接种等量的A菌液和无菌水,相同条件下培养一段时间,观察、比较两培养基平板上金黄色葡萄球菌的菌落数量(或者接种等量的培养菌株A的培养液和无菌水)
8.(16分)运用所学知识回答下列与生物技术实践相关的问题。
(1)在图甲所示的两发酵瓶中装入等量的葡萄汁进行果酒制作实验,若在A装置的通气口补充无菌空气,那么一段时间后,能获得葡萄酒的是________装置,发酵
是否成功可在酸性条件下用______________________对发酵产物进行检验确认。
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(2)图乙是胡萝卜素提取粗品鉴定结果示意图。点加提取样品的是______点,点加标准样品的是________点,该鉴定实验的方法叫做_______________________ __________________________________。
(3)微生物培养时,如果想让培养基内只生长真菌,则可用含________________的培养基。 【解析】(1)果酒发酵是利用酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的原理,需要隔绝空气创造无氧环境。在图甲所示的两发酵瓶中装入等量的葡萄汁进行果酒制作实验。若在A装置的通气口补充无菌空气,则瓶中的酵母菌进行有氧呼吸,不能获得葡萄酒。而B装置的充气管密闭,可创造无氧环境,则一段时间后,能获得葡萄酒。发酵是否成功的关键是检测有无酒精生成,而橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应呈现灰绿色,因此可用重铬酸钾溶液对发酵产物进行检验确认。 (2)图乙所示鉴定胡萝卜素的方法是纸层析法。提取出来的胡萝卜素往往含有杂质,在纸层析标准结果示意图中会有其他色素带,而标准样品只有一个色素带,所以图中A、B、C、D四点中,点加提取样品的是B、C点,点加标准样品的是A、D点。
(3)青霉素等抗生素能杀死细菌,但对真菌不起作用,因此微生物培养时,如果想让培养基内只生长真菌,则可用含抗生素(或青霉素)的培养基。 答案:(1)B 重铬酸钾溶液 (2)B、C A、D 纸层析法 (3)抗生素(或青霉素)
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