高效液相色谱原理 - 图文

⑥ 应避免使用具有显著毒性的溶剂，以保证工作人员的安全。

液相色谱法中常用的流动相有正己烷、正庚烷、甲醇、乙腈等。 4、高效液相色谱法的主要类型 （1）液—固吸附色谱法

①分离原理：基于各组分吸附能力的差异来进行混合物分离的。 ②固定相：极性和非极性两种。 极性固定相：硅胶、氧化镁。

非极性固定相：多孔微粒活性炭、多孔石墨化炭黑。 ③流动相：基本原则：极性大的试样用极性较强的流动性；极性小的试样用极性较低的流动性。

液—固吸附色谱法适用于分离具有中等相对分子质量的非极性或非离子型的油样品；分离异构体；但不适用于分离同系物。

（2）液—液分配色谱法

①分离原理：利用混合物中各组分在固定相和流动相中溶解度的差异来进行分离的。

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②正相与反相液-液分配色谱：

正相液—液色谱分离：流动相的极性小于固定液的极性。固定相为极性组分，流动相为非极性溶剂。适用于极性组分的分离。

反相液—液色谱分离：流动相的极性大于固定液的极性。固定相为非极性组分，流动相为极性溶剂。适用于非极性组分的分离。

③固定相：固定液涂在载体上或微球吸附剂上。

④流动相

（3）凝胶色谱法（分子排阻色谱法）

根据所用流动相的不同，凝胶色谱法可分为两类： 凝胶过滤色谱法：（GFC）用水溶剂作流动相。 凝胶渗透色谱法：（GPC）用有机溶剂四氢呋喃。

凝胶色谱法主要用来分析高分子物质的分子量分布，以鉴定高分子聚合机理，选择聚合工艺及条件，并考察聚合材料在加工和使用过程中分子量的变化。 二、高效液相色谱仪 1、仪器基本构造

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先做一个个单元组件，然后根据需要将各个单元组件组合起来。 最基本的组件是高压输液系统、进样器、色谱柱、检测器和工作站（数据处理系统）。

可根据需要配置自动进样系统、预柱、流动相在线脱气装置和自动控制系统等。

下图是典型HPLC系统的结构示意图 （1） 仪器工作流程：

高压输液泵将储液器中的流动相以稳定的流速（或压力）输送至分析体系，在色谱柱之前通过进样器将样品导入，流动相将样品依次带入预柱、色谱柱，在色谱柱中各组分被分离，并依次随流动相流至检测器，检测到的信号送至工作站记录、处理和保存。

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（2） 流动相净化装置 A. 过滤：

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