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猪抗原抗体检测方案

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新疆天康畜牧生物公司饲料事业部

猪抗原抗体检测方案 一、检测的目的 1.疾病预警

(1)了解疾病在场内的污染状况,制定相应策略 (2)提前了解免疫抗体的高低及整齐度,及时纠正 2.免疫程序的评估与优化 (1)了解母源抗体的消长情况 (2)疫苗接种的效果-----免疫抗体监控

3.疾病控制和清除计划:通过系统检测和措施,实施疾病的控制或清除计划 4.疾病诊断

二、重点进行监测三大猪病:猪瘟、蓝耳、伪狂犬 1. 猪瘟主要问题 (1) 抗体水平偏低

(2) 疫苗的选择及剂量:细胞苗?脾淋苗?,150 RID = 37 PD50 (3) 持续性感染猪的存在 2. 猪瘟抗原检测

(1) 常用方法:PCR、荧光抗体和ELISA

(2) 检测目的:引进种猪或后备母猪时的检查,疑似病例的确诊,猪群带毒率的定期评估

(3) 结果分析:猪瘟抗原ELISA阳性结果代表野毒阳性,PCR和荧光抗体阳性结果有可能是疫苗毒的干扰。 3. 猪瘟抗体ELISA检测要点:

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A.怎样评估母源抗体和免疫效果

1)当母源抗体的降到阻断率(Block)50%以下时,才能不干扰疫苗的免疫。(确定首免日龄)

2)免疫后阻断率(Block)上升到50%以上才能代表免疫合格。

良好的种猪场要求:阳性率100%(>40),合格率90%(>50) cv<25%) B. 剔除持续感染猪或无抗体反应猪。

1)持续性感染的种猪可间断性或持续性排出病毒,他们成为整个猪群的感染源。

2)首次使用应对母猪群进行检测,对抗体低下猪只进行补针后6周复检。若仍然没有抗体产生,应进行淘汰。 C. 猪瘟抗体检测结果分析

1) Cutoff值是 >1:16代表抗体阳性

2) 实际生产中至少要在1:64以上才有一定的保护,经产母猪多次疫苗免疫后抗体水平一般会在1:256到1:1024左右波动。

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D. 猪瘟抗体 ELISA检测时间表 品项 种类 时间 目的 野毒感染和抗体水平 取样数量 全部 日常评估 后备母猪 在配种前 经产母猪 3个月一次 评估母猪群的健康状态20 和抵抗力 商品猪 首免日龄 仔猪 二免后4-6周 监控免疫效果 21日龄 28日龄 35日龄 42日龄 20 评估母源抗体衰减水平,15 选择最佳首免时间 15 15 15

4.蓝耳病的主要问题

(1) 毒株的变异与交叉保护

(2) 疫苗的选择:灭活疫苗、弱毒疫苗 (3) 猪群稳定性评估 5.蓝耳病的检测方法 (1) 抗原:RT-PCR (2) 抗体:ELISA 6.蓝耳病的抗体检测结果分析

(1)对于稳定的种猪群,S/P值为0-2左右,很少大于2.5.

(2)良好免疫群的典型的S/P比值范围为:0.7 to 1.8 ;有些可能>2.0 。

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(3)如果每年免疫两次,仍有多于20%的猪抗体为阴性,需要对疫苗的管理和使用进行检查。

(4) 当S/P >2.5 – 病毒血症 (5) 当S/P >3.5-高于5.0 – 急性感染

(6) 6-7周龄时,多数仔猪抗体可变为阴性(无病毒循环) (7) 引进种猪,要剔出阳性值SP>1.2的猪只,保证种群的稳定 (8) 公猪抗体阳性值SP>2.5的最好不要使用

(9) 母猪群间隔1-2个月对群体进行监控,了解猪群等稳定状态 (10) 仔猪了解病毒的感染时间,加强药物保健

(11) 当S/P >2.5时,猪群即呈现不稳定状态,需要采取措施进行控制 7.蓝耳病抗体检测时间表 品项 种类 时间 目的 防止引入不稳定猪只 了解猪群稳定性 监控免疫效果和稳定性 取样数量 全部 20 20 日常评估 后备母猪 在配种前 经产母猪 2个月一次 商品猪 8.伪狂犬的主要问题

3个月一次 (1)种猪群野毒抗体(gE抗体)阳性率居高不下 (2)中大猪的呼吸道问题 (3)散发性母猪繁殖障碍 (4)净化方案的选择 9.伪狂犬的检测方法

(1) PRVgB:总抗体,S/N值和阻断率(BLOCK值)

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(2) PRVgE(I):野毒抗体

(3)通过PRV-gB和PRV-gI抗体检测可了解本场伪狂犬病的流行状况,制定相应的免疫方案及措施。 10.伪狂犬清除计划

(1) 在阳性率低的种猪群,建议一次性淘汰所有阳性种猪。每个季度筛选一次,加强疫苗免疫,同时保证引入阴性后备母猪和种公猪,一般一年见效。

(2) 在阳性率很高的种猪群,保证引入阴性后备母猪和种公猪,加强免疫。每季度抽样监控野毒阳性比例防止感染扩大并用PRV-gB评估免疫抗体水平,三年可见效。 11.伪狂犬检测时间表 品项 种类 时间 目的 取样数量 日常评估 后备母猪 在配种前 野毒感染和抗体水平全部 (gB和gE抗体) 经产母猪 3个月一次 评估母猪群的健康状态20 和抵抗力(gB和gE抗体) 商品猪 首免日龄 仔猪 免疫后4周 监控免疫效果(gB抗体) 20 70-80日龄免评估母源抗体衰减水平,15 疫前 选择最佳首免时间(gB抗体)

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