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四.克隆基因的分离与鉴定
用克隆杂交对基因组文库进行筛选:
用已知氨基酸序列设计的寡核苷酸探针筛选文库克隆基因:
差别杂交:若A 组细胞用生长因子处理,B 组细胞不作处理,将其中的一组mRNA 逆转
录成cDNA文库,与另一组的mRNA 杂交,或将两组的mRNA 均逆转录成cDNA 再进行分子杂交,不能形成杂交双链的是二者差异表达的基因。
扣除杂交:比差别杂交省时、省力、灵敏度高,基本原理如图所示。
用Southern 杂交法鉴定克隆基因:
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